【摘要】：目的:制備無穩(wěn)定劑修飾的漢防己甲素PLGA納米粒,研究其理化性質(zhì)及細胞毒和細胞攝取特性。方法:以聚乳酸-羥基醋酸共聚物(PLGA)為載體材料,采用無穩(wěn)定劑修飾的納米沉淀法制備漢防己甲素納米粒;通過單因素試驗考察不同制備工藝對納米粒理化性質(zhì)的影響;通過載藥量、包封率、累積釋藥量等指標考察其載藥特性;采用MTT比色法檢測其對人肺腺癌細胞株A549的細胞毒性;采用共聚焦顯微鏡技術(shù)考察其細胞攝取特性。結(jié)果:無穩(wěn)定劑修飾的漢防己甲素PLGA納米粒平均粒徑169.3 nm,與有穩(wěn)定劑的漢防己甲素PLGA納米粒相比外觀無明顯改變。在一定范圍內(nèi),隨著PLGA用量的增加,納米粒的粒徑呈上升趨勢;隨著投藥量的增加,納米粒的載藥量顯著增加,包封率下降。在pH7.4的釋放介質(zhì)中,納米粒釋慢釋藥,96 h累積釋藥率60.44%。細胞毒試驗顯示,當培養(yǎng)時間為8 h時,漢防己甲素組的細胞毒性大于漢防己甲素納米粒組;當培養(yǎng)時間延長至24 h時,漢防己甲素納米粒組的細胞活性明顯低于純藥物組;高劑量的空白納米粒組始終表現(xiàn)較低的細胞毒性。激光共聚焦電鏡斷層掃描顯示漢防己甲素納米粒能夠較好的被細胞攝取。結(jié)論:制備的無穩(wěn)定劑修飾的漢防己甲素PLGA納米粒大小均一,包封率高,體外釋藥表現(xiàn)出較好的緩釋效果,易被細胞攝取,對A549細胞的增殖有明顯的抑制作用。
【圖文】：

－ＰＬＧＡＮＰｓ和２％ＰＶＡ－Ｔｅｔ－ＰＬＧＡＮＰｓ懸液適量，稀釋，滴加在硅膠晶板上自然揮干，ＱｕｏｒｕｍＱ１５０ＥＳ噴金儀真空條件噴金，掃描電鏡觀察形態(tài)結(jié)構(gòu)（圖１）。（２）ＴＥＭ樣品制備：�。裕澹簦校蹋牵粒危校蠛停玻ィ校郑粒裕澹簦校蹋牵粒危校髴乙哼m量，稀釋，滴加在覆蓋碳膜的銅網(wǎng)上，用２．０％的磷鎢酸鈉液負染，透射電鏡觀察形態(tài)結(jié)構(gòu)（圖２）。ａ．無穩(wěn)定劑修飾；ｂ．２％ＰＶＡ修飾ａ．ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒ－ｆｒｅｅ；ｂ．２％ＰＶＡ圖１載藥ＰＬＧＡ納米粒的ＳＥＭ照片Ｆｉｇ１ＳＥＭｉｍａｇｅｓｏｆＰＬＧＡｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｌｏａｄｉｎｇｄｒｕｇ２．２．２Ｚｅｔａ電位和粒徑分析分別取Ｔｅｔ－ＰＬＧＡＮＰｓ和２％ＰＶＡ－Ｔｅｔ－ＰＬＧＡＮＰｓ懸液適量，稀釋，激光散射法測定其粒徑及粒徑分布，并檢測Ｚｅｔａ電位（圖３）。·１３７６·中國醫(yī)院藥學(xué)雜志２０１５年８月第３５卷第１５期ＣｈｉｎＨｏｓｐＰｈａｒｍＪ，Ａｕｇ２０１５，Ｖｏｌ３５，Ｎｏ．１５

ａ．無穩(wěn)定劑修飾；ｂ．２％ＰＶＡ修飾ａ．ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒ－ｆｒｅｅ；ｂ．２％ＰＶＡ圖２載藥ＰＬＧＡ納米粒的ＴＥＭ照片Ｆｉｇ２ＴＥＭｉｍａｇｅｓｏｆＰＬＧＡｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｌｏａｄｉｎｇｄｒｕｇ圖３載藥ＰＬＧＡ納米粒（ａ．無穩(wěn)定劑修飾；ｂ．２％ＰＶＡ修飾）的粒徑分布圖Ｆｉｇ３ＳｉｚｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｂｙｉｎｔｅｎｓｉｔｙｏｆＰＬＧＡｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｌｏａｄｉｎｇｄｒｕｇ（ａ．ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒ－ｆｒｅｅ；ｂ．２％ＰＶＡ）２．３單因素試驗考察無穩(wěn)定劑修飾的ＰＬＧＡＮＰｓ的制備工藝從ＰＬＧＡ用量、乙醇和純化水體積比兩方面對無穩(wěn)定劑修飾的ＰＬＧＡ納米粒制備工藝進行考察。２．４Ｔｅｔ－ＰＬＧＡＮＰｓ穩(wěn)定性考察Ｔｅｔ－ＰＬＧＡＮＰｓ懸液離心收集納米粒，，重分散于ｐＨ７．４ＰＢＳ緩沖液中，室溫保存，通過測量０，３，６，９，１２ｄ不同時間點粒徑對其穩(wěn)定性進行考察。２．５Ｔｅｔ－ＰＬＧＡＮＰｓ包封率和載藥量測定２．５．１色譜條件色譜柱：ＲＰ１８－ｓｅｌｅｃｔＢ（１２５ｎｍ×４ｍｍ）；流動相：水－乙腈－三乙胺（７００∶３００∶１）（調(diào)ｐＨ７．４）；流速：０．７ｍｌ·ｍｉｎ－１；進樣量：２０μｌ；柱溫：３５℃；紫外檢測器；檢測波長：２８０ｎｍ。２．５．２包封率及載藥量的測定精密稱取一定量的Ｔｅｔ－ＰＬＧＡＮＰｓ凍干粉，以乙腈溶解，經(jīng)０．２μｍ微孔濾膜過濾，取濾液，ＨＰＬＣ法測定Ｔｅｔ的含量，并按下式（１）（２）計算包封率（ＥＥ％）

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 李巍松;施誠仁;杜勇;;漢防己甲素誘導(dǎo)神經(jīng)母細胞瘤株TGW凋亡作用的實驗研究[J];臨床兒科雜志;2006年06期

2 曾萍;彭明利;徐溢;;PLGA微粒/納米�；蜉d體的研究進展[J];藥學(xué)學(xué)報;2010年11期

3 蔣新宇,周春山,唐課文;二元溶劑分散法制備PLA和PLGA納米粒[J];應(yīng)用化學(xué);2003年08期

4 程國華,王娟;均勻設(shè)計法優(yōu)化漢防己甲素肺靶向微球的處方及制備工藝[J];中國醫(yī)院藥學(xué)雜志;2003年07期

5 張富強,佘文s

本文編號：2690624