【摘要】：目的:構(gòu)建粒徑約30 nm的長春新堿低密度脂蛋白納米給藥系統(tǒng),并將靶向功能基T7肽共價(jià)連接于LDL表面,而T7肽和LDL分別靶向于BBB中的TfR和LDLR,使納米遞送系統(tǒng)能穿透BBB后進(jìn)一步靶向于腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞。方法:利用密度梯度離心法從人血漿中提取分離得到LDL,采用干膜法制備載VCR的LDL納米粒(LDL-VCR),然后將T7肽修飾于LDL上得到T7-LDL-VCR,并對(duì)其進(jìn)行表征和穩(wěn)定性的研究。然后用親酯性熒光探針DiI標(biāo)記T7-VCR-LDL納米粒,用激光共聚焦顯微鏡觀察膠質(zhì)瘤細(xì)胞及其腫瘤球模型對(duì)DiI-T7-LDL-VCR和DiI-LDL-VCR的攝取和體外跨越BBB情況,并采用MTT法評(píng)價(jià)制劑對(duì)C6細(xì)胞的毒性作用。再采用腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞C6建立了KM小鼠原位腦膠質(zhì)瘤模型,選擇DiR作為熒光探針,借助活體成像技術(shù)在體實(shí)時(shí)觀察了游離VCR溶液、LDL-VCR納米粒和T7-LDL-VCR納米粒的體內(nèi)分布情況。8 h后處死小鼠,取出腦及主要臟器進(jìn)行離體成像實(shí)驗(yàn)。最后以荷膠質(zhì)瘤模型的小鼠為研究對(duì)象,通過體重變化、MRI、腦膠質(zhì)瘤體積抑制率和生存曲線考察LDL-VCR納米粒對(duì)荷瘤小鼠的治療效果。結(jié)果:對(duì)處方進(jìn)行優(yōu)化,得到包封率為15.6±0.94%,載藥量為4.03±0.61%;T7共價(jià)連接于LDL表面的效率為63.88%;納米粒粒徑約30 nm,形態(tài)圓整;并且藥物在低密度脂蛋白中的釋放有延緩作用。體外評(píng)價(jià)結(jié)果表明DiI-T7-LDL-VCR的攝取強(qiáng)度均高于DiI-LDL-VCR,T7-LDL-VCR可以在一定程度上促進(jìn)藥物跨越體外BBB,并呈時(shí)間依賴性,MTT實(shí)驗(yàn)中得到空白LDL、游離VCR、LDL-VCR和T7-LDL-VCR的IC_(50)分別為0.15μM、0.048μM、0.0075μM和0.95 nM,說明T7-VCR-LDL抗腫瘤細(xì)胞增殖作用最強(qiáng)。T7-LDL-VCR納米粒的腦部蓄積能力更強(qiáng),對(duì)荷瘤小鼠體重下降幅度最小,腫瘤體積最小,腫瘤體積抑制率為70%,是VCR-LDL的1.69倍、游離VCR的2.83倍;中位生存期為36天,高于VCR-LDL 1.38倍、游離VCR 1.85倍和對(duì)照組2倍。結(jié)論:本課題成功構(gòu)建了腦靶向給藥系統(tǒng)T7-LDL-VCR,具有BBB和腦腫瘤細(xì)胞雙級(jí)靶向能力,為膠質(zhì)瘤靶向治療研究領(lǐng)域提供了新思路。
【圖文】：

前學(xué)者更傾向于選擇的策略。蛋白主要分為以下三種：基于實(shí)體瘤的高滲識(shí)別的主動(dòng)靶向及基于外界或腦膠質(zhì)瘤一種研究較少。主動(dòng)靶向系統(tǒng)又分為二靶向給藥系統(tǒng)。研究表明，，TfR 和 LD載體如己糖轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)內(nèi)源性物質(zhì)具有良好的生物相容性[7-10 通過肝臟多次變換和轉(zhuǎn)運(yùn)產(chǎn)生，正常情，結(jié)構(gòu)構(gòu)成如圖 1 所示：疏水內(nèi)核由較脂層和膽固醇覆蓋，最外層被體積較大胞內(nèi)溶酶體，并且可以將靶向分子共價(jià)。

圖 2 長春新堿分子結(jié)構(gòu)式射后，在血中與紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血漿均至各組織，不能通過血腦、脊液屏障進(jìn)入中便排泄，約 12%由尿中排出，其中又有 21�。ǔ扇俗⑸� 1-2 mg/周），但是神經(jīng)毒性目前減少長春新堿神經(jīng)毒性的主要方法就力學(xué)參數(shù)，提高其生物利用度及靶向效率思路
【學(xué)位授予單位】：湖北科技學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R96

【參考文獻(xiàn)】

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1 朱世t

本文編號(hào)：2688531