發(fā)布時間：2020-05-16 23:49

【摘要】：每年約超過一百萬人在遭受神經(jīng)損傷的傷害,周圍神經(jīng)損傷的治療依然是世界性醫(yī)學難題,鑒于傳統(tǒng)臨床治療方法存在的諸多問題和局限,廣大神經(jīng)修復研究者致力于開發(fā)多功能的神經(jīng)導管來治療神經(jīng)損傷。雖然各類神經(jīng)導管(Nerve conduits,NCs)也逐漸應(yīng)用于臨床,但至今并未制備出效果優(yōu)良的理想神經(jīng)導管,針對現(xiàn)階段導管存在的諸多不足,本論文首先優(yōu)選制備導電聚合物苯胺四聚體(Tetraaniline,TA),再物理復合聚乳酸(Poly-dl-lactic acid,PDLLA),并負載神經(jīng)生長因子(Nerve growth factor,NGF),研制具有電刺激作用的PDLLA/TA/NGF復合載藥神經(jīng)導管。首先,采用氧化偶聯(lián)聚合法合成氧化態(tài)苯胺四聚體(Emeraldine tetraaniline,EM TA),再還原制備還原態(tài)苯胺四聚體(Leucoemeraldine tetraaniline,LE TA),并通過傅立葉變換紅外光譜(Fourier transform infrared spectrum,FTIR)、紫外可見分光光度法(Ultraviolet-visible spectrophotometry,UV-Vis)、質(zhì)譜法(Massspectrography,MS)、薄層色譜法(Thin layer chromatography,TLC)、掃描電子顯微鏡(Scanning electron microscope,SEM)表征EM TA和LE TA的成分、結(jié)構(gòu)以及微觀形貌,同時利用四探針電阻率儀對比其導電性差異。最后設(shè)計正交實驗,探究N-苯基對苯二胺(PPDA)與氧化劑過硫酸銨的質(zhì)量比、反應(yīng)時間、質(zhì)子酸濃度對產(chǎn)率的影響,并確定TA的最佳制備工藝為:PPDA與氧化劑反應(yīng)比為1:1、反應(yīng)時間為2小時、HCl濃度為2 mol/L。通過物理復合法制備不同比例的PDLLA/TA復合神經(jīng)導管,并探究TA摻雜量對復合神經(jīng)導管機械性能、親水性能、電導率和微觀形貌的影響。結(jié)果表明,PDLLA/TA復合神經(jīng)導管具有良好的機械性能與親水性能,導電率滿足神經(jīng)生長所需要的電刺激條件,同時其機械性能、親水性能、電導率隨TA摻雜量的增大呈上升趨勢,最后結(jié)合其微觀形貌優(yōu)選出TA的摻雜量為10%。通過測定PDLLA/TA神經(jīng)導管在降解過程中的質(zhì)量損耗、降解液的pH值,以及SEM觀察降解前后的微觀形貌,評價其降解性能。結(jié)果表明:TA的摻雜促進了PDLLA/TA神經(jīng)導管的降解,使其降解速度可控,并改善了單純PDLLA導管降解過程中局部環(huán)境酸性過高的問題。通過物理混合將牛血清蛋白(Bovine serum albumin,BSA)負載在PDLLA/TA神經(jīng)導管上,探究TA的摻雜量和環(huán)境pH值對BSA釋放行為的影響,并以此為模型對照,負載NGF制備PDLLA/TA/NGF神經(jīng)導管,研究NGF的釋放性能。結(jié)果表明PDLLA/TA/NGF復合載藥神經(jīng)導管可以在不同酸堿環(huán)境下實現(xiàn)其緩慢釋放。采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法,選取雪旺細胞(Rat schwann cells,RSC96)和腎上腺嗜鉻細胞瘤(Pheochromocytoma 12 cells,PC12)兩種神經(jīng)細胞來評價不同神經(jīng)導管的細胞毒性,并通過免疫熒光法與SEM觀察細胞在神經(jīng)導管表面的粘附與增殖情況,結(jié)果表明TA與NGF的摻雜促進了細胞增殖和粘附,PDLLA/TA/NGF神經(jīng)導管具有良好的細胞親和性。自制電刺激裝置對復合培養(yǎng)的RSC96細胞和PC12細胞外加電刺激,探究電壓、電流與電刺激時間對細胞生長的影響。結(jié)果表明外源電刺激促進了兩種細胞的增殖與生長,同時確定電刺激的最優(yōu)參數(shù)為:電壓250 mV、電流150 mA、時間36小時。選取SD大鼠并建立相應(yīng)周圍神經(jīng)損傷動物模型,考察1、3個月后SD大鼠坐骨神經(jīng)的生長情況以及肌肉等功能恢復狀態(tài),評估不同神經(jīng)導管對大鼠坐骨神經(jīng)損傷的修復效果。步態(tài)分析、組織學分析等結(jié)果表明PDLLA/TA/NGF復合載藥神經(jīng)導管修復治療最佳,較接近自體神經(jīng)移植組。綜上所述,PDLLA/TA/NGF復合載藥神經(jīng)導管具有良好的生物相容性和電刺激作用,能促進神經(jīng)再生,有望應(yīng)用于周圍神經(jīng)損傷的治療。
【圖文】：

第 1 章 緒論損傷與治療百萬人會遭受神經(jīng)損傷的傷害[1]，這嚴重影缺損可通過神經(jīng)再生功能自我修復，而針對粗手術(shù)進行縫合與自體神經(jīng)移植法進行治療斥反應(yīng)等諸多問題。為了解決以上問題，廣的神經(jīng)導管以替代自體移植，甚至超越自體療困境。損傷及再生

大量巨噬細胞，去吞噬變性軸突[7]，隨著吞噬細胞的聚集，，形成中空的神經(jīng)通過該區(qū)域時，這一區(qū)域?qū)ι窠?jīng)再生功能重建具有重要作用。神度分類分為三類：神經(jīng)失用、軸突斷裂、神經(jīng)斷裂。其中神經(jīng)失用是一種，此時神經(jīng)仍然保持著連續(xù)性與功能。軸突斷裂是指軸突與髓鞘圍的神經(jīng)束膜與神經(jīng)外膜仍然存在，結(jié)締組織可以為軸突再生提供斷裂是指受傷的神經(jīng)存在缺口，軸突和周圍結(jié)締組織被破壞，其再生難以修復的周圍神經(jīng)損傷[8]。神經(jīng)再生的過程是復雜與艱難的，其中素，因此受損神經(jīng)的修復與重建，仍然是臨床的一大挑戰(zhàn)。
【學位授予單位】：武漢理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R943

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 殷義霞;李世普;;In vitro Biocompatibility Assessment of a Novel PRGD/PDLLA/NGF Composite Material[J];Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science Edition);2011年06期

2 王永紅;李世普;;Evaluation of a Novel Bioabsorbable PRGD/PDLLA/β-TCP/NGF Composites in Repair of Peripheral Nerves[J];Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science Edition);2009年03期

3 閆玉華;;Preparation and Charactcrization of a Novel PDLLA/Chondroitin Sulfate/Chitosan Asymmetry Film[J];Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science Edition);2007年04期

4 萬濤;;Degradation Characteristic of PDLLA/HA Composite Fiber in vitro[J];Journal of Wuhan University of Technology-Materials Science;2005年S1期

5 齊進如,楊選平,吳平林,周斌,任世祥;國產(chǎn)PDLLA可吸收棒髓內(nèi)植入治療掌骨骨折32例[J];武警醫(yī)學院學報;2004年03期

6 李進,楊述華,杜靖遠,邵增務(wù),肖寶鈞,楊操,許偉華,劉國輝;PDLLA可吸收螺釘治療踝關(guān)節(jié)骨折的臨床研究[J];中華創(chuàng)傷骨科雜志;2003年04期

7 王靜霞;陳嶼恒;倪茂君;陳竹平;劉思陽;彭朝榮;;PDLLA-g-NVP纖維膜材料的體外降解性能研究[J];化工新型材料;2018年03期

8 ;Effect of Penetrating Injury by Different Absordable PDLLA Rod on the Development of Growth Plate[J];生物醫(yī)學工程學雜志;2005年S1期

9 張國富,柯雯曇,段軍;PDLLA可吸收螺釘治療四肢松質(zhì)骨骨折76例[J];武漢大學學報(醫(yī)學版);2005年06期

10 郭興蕾;劉剛;HE Qundi;徐海星;YU Yunxuan;KE Changsheng;MING Xiaofei;ZHAO Meng;WANG Xiaobin;HUANG Zhijun;許沛虎;;The Study of Nerve Conduit with Biocompatibility and Electrical Stimulation Effect[J];Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science);2018年06期

相關(guān)會議論文 前10條

1 王友法;閆玉華;李世普;嚴瓊姣;;PRGD/PDLLA/n-HAP神經(jīng)再生細胞支架材料(英文)[A];第七屆中國功能材料及其應(yīng)用學術(shù)會議論文集（第2分冊）[C];2010年

2 ;PRGD/PDLLA/n-HAP scaffolds for peripheral nerve regeneration[A];第七屆中國功能材料及其應(yīng)用學術(shù)會議論文集（第7分冊）[C];2010年

3 郝勇;周躍;初同偉;潘勇;王衛(wèi)東;滕海軍;;可降解材料聚內(nèi)消旋乳酸(PDLLA)椎間融合器的生物力學測試[A];第八屆全國脊柱脊髓損傷學術(shù)會議論文匯編[C];2007年

4 王欣宇;單學智;韋明;韓穎超;李世普;;HA/PDLLA復合材料的制備、力學性能及體外降解研究[A];《硅酸鹽學報》創(chuàng)刊50周年暨中國硅酸鹽學會2007年學術(shù)年會論文摘要集[C];2007年

5 杜珂;甘志華;;PDLLA/HA納米復合材料表面形貌對細胞粘附生長的影響[A];中國化學會第15屆反應(yīng)性高分子學術(shù)討論會論文摘要預(yù)印集[C];2010年

6 苗強;馬楚凡;;PDLLA控釋的鈦納米管載HHC-36抗菌肽涂層的構(gòu)建及其性能研究[A];第十一次全國口腔修復學學術(shù)會議論文匯編[C];2017年

7 裴慶國;王宗生;潘可風;蔣欣泉;張秀麗;;新型多孔HA/PDLLA支架體外細胞相容性的實驗研究[A];2005年上海市醫(yī)用生物材料研討會論文匯編[C];2005年

8 譚立偉;彭錦榮;錢志勇;;DTX-MPEG-PDLLA-PLL納米膠束制劑的制備、表征及乳腺癌治療中的應(yīng)用[A];中國化學會2017全國高分子學術(shù)論文報告會摘要集——主題G：藥物控釋載體高分子[C];2017年

9 劉芳;金艷;賈德民;;MDI對PDLLA/HA復合材料的增容機理研究[A];中國復合材料學術(shù)研討會論文集[C];2005年

10 劉芳;金艷;賈德民;;MDI對PDLLA/HA復合材料的增容機理研究[A];全國首屆青年復合材料學術(shù)交流會論文集[C];2007年

相關(guān)重要報紙文章 前2條

1 本報記者 曾文;技術(shù)加資本 迪康給藍圖[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導報;2002年

2 楊文豐;可吸收骨折內(nèi)固定螺釘面市[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2001年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 李賓斌;神經(jīng)損傷修復及抑制神經(jīng)瘢痕材料的研究[D];武漢理工大學;2015年

2 閔少雄;恒河猴間充質(zhì)干細胞誘導分化成骨細胞復合PDLLA/PLA-PEG-PLA嵌段共聚物支架修復顱骨缺損[D];第一軍醫(yī)大學;2004年

3 趙建華;骨修復材料PDLLA/HA/DBM的研制及其應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D];第三軍醫(yī)大學;2003年

4 蔡林;可吸收聚乳酸材料（PDLLA）對幼兔骨骺生長影響的實驗研究[D];武漢大學;2004年

5 徐海星;用于神經(jīng)修復的自組裝材料及導電材料的研究[D];武漢理工大學;2007年

6 凌卓彥;PDLLA可吸收材料髓內(nèi)固定對骨折愈合的實驗研究[D];蘇州大學;2016年

7 董軍峰;載利福平多孔復合物作為結(jié)核性骨缺損修復材料的研究[D];華中科技大學;2014年

8 李瑞君;多孔聚外消旋丙交酯醫(yī)用膜防止周圍神經(jīng)粘連的實驗研究[D];吉林大學;2015年

9 許子星;氨等離子體錨定短肽組織工程骨的制備及實驗研究[D];南方醫(yī)科大學;2011年

10 王海燕;血管內(nèi)皮祖細胞的基因修飾與體外三維培養(yǎng)的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2010年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 郭興蕾;具有電刺激作用的復合載藥神經(jīng)導管的研究[D];武漢理工大學;2018年

2 于曉;PDLLA/PRGD/n-HAP多孔復合材料的制備及性能研究[D];武漢理工大學;2016年

3 班瑩瑩;n-HAP/PRGD/PDLLA復合膜的制備及性能研究[D];武漢理工大學;2015年

4 曾莉;應(yīng)力對PDLLA降解的影響及PDLLA泡沫襯墊對應(yīng)力遮擋作用的實驗研究[D];四川大學;2007年

5 宋杰;生物可降解聚乳酸（PDLLA）的合成及性能表征[D];武漢理工大學;2004年

6 何祺;可吸收椎體內(nèi)支撐器體內(nèi)植入的生物安全性研究[D];昆明醫(yī)學院;2008年

7 張聰;PDLLA/納米羥基磷灰石纖維膜的制備及生物相容性研究[D];吉林大學;2015年

8 張曉彥;哌嗪擴鏈的新型形狀記憶聚氨酯脲的研究[D];重慶大學;2012年

9 文文;可吸收椎體內(nèi)支撐器植入中遠期組織學、影像學及生物降解研究[D];昆明醫(yī)學院;2009年

10 鐘偉業(yè);HA/PDLLA復合材料在體內(nèi)降解及引導成骨過程的組織學觀察[D];中南大學;2010年

本文編號：2667551