【摘要】：目的:觀察疏水氨基酸側(cè)鏈不同的離子互補(bǔ)型自組裝短肽與大黃素的相互作用,考察不同疏水側(cè)鏈離子互補(bǔ)型自組裝短肽對(duì)大黃素的載藥、釋藥性能,以離子互補(bǔ)型自組裝短肽初步構(gòu)建疏水藥物的混懸液-原位凝膠給藥系統(tǒng),研究其作為疏水藥物載體的可行性。方法:1.采用平衡法以紫外分光光度法測(cè)定大黃素在水、p H 6.8、p H 7.4、乙醇等介質(zhì)中的平衡溶解度。2.自組裝短肽分別與芘和大黃素的相互作用研究:利用芘分子熒光法測(cè)定RADA16-I與RVDV16-I的臨界聚集濃度;熒光分光光度法考察RADA16-I與RVDV16-I分別與芘和大黃素的相互作用。以激光粒度儀、掃描電鏡等表征自組裝短肽與大黃素形成的混懸液;平衡法測(cè)定大黃素在兩種短肽溶液中的溶解性。3.大黃素與自組裝短肽的混懸液-原位凝膠給藥系統(tǒng)的構(gòu)建及控釋研究:以粒徑為指標(biāo)考察自組裝短肽-大黃素混懸液形成的最優(yōu)條件。以粒徑及大黃素的含量為指標(biāo),考察自組裝短肽-大黃素混懸液的穩(wěn)定性。采用流變儀表征自組裝短肽-大黃素原位凝膠的形成及流變學(xué)特性。采用動(dòng)態(tài)透析膜法考察原位凝膠中大黃素的體外釋放。4.采用MTT法測(cè)定自組裝短肽-大黃素原位凝膠對(duì)腫瘤細(xì)胞A549和Hep G2的體外增殖抑制作用。結(jié)果:1.大黃素在水中的溶解度為6.9μg/m L,在含30%乙醇的p H 7.4 PBS中的溶解度為72.6μg/m L,滿(mǎn)足體外釋放的漏槽條件。2.RVDV16-I和RADA16-I的臨界聚集濃度分別為66.1μM、125.9μM。芘和大黃素?zé)晒獍l(fā)射光譜強(qiáng)度隨著短肽濃度增加而增加。短肽與大黃素在機(jī)械攪拌下形成黃色混懸液。SEM顯示混懸液呈顆粒狀均勻分布。自組裝短肽-大黃素混懸液在模擬生理?xiàng)l件(p H 7.4)下能原位形成水凝膠。RADA16-I和RVDV16-I的最低成膠濃度分別為3.0 mg/m L和2.5 mg/m L。凝膠呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)將大黃素包裹,短肽濃度越大,包裹越致密。3.1000 r/min攪拌48 h,RADA16-I和RVDV16-I分別與大黃素在水中形成相對(duì)穩(wěn)定的混懸液,在4℃放置30天粒徑和含量均穩(wěn)定。流變學(xué)結(jié)果顯示RADA16-I、RVDV16-I與PBS混合后,G'和G''分別增大了近10倍。凝膠的G'和G''隨短肽濃度在一定范圍內(nèi)增加而增加,剪切頻率增大時(shí),G'和G''值保持相對(duì)恒定。大黃素從低、中、高濃度RADA16-I和RVDV16-I與大黃素形成的原位水凝膠中36 h累積釋放率分別為68.7%、66.7%、55.3%和61.8%、56.6%、48.3%。表現(xiàn)出一定的緩釋現(xiàn)象,符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)釋放模型。4.在大黃素濃度為120μM的凝膠中,RADA16-EM和RVDV16-EM對(duì)A549和Hep G2細(xì)胞的抑制率分別為71.7%、64.4%,和65.4%、62.5%,大黃素-水混懸液對(duì)A549和Hep G2細(xì)胞的抑制率分別為61.5%和59.9%。結(jié)論:具有不同疏水性側(cè)鏈氨基酸的自組裝短肽RADA16-I與RVDV16-I均能與疏水的大黃素相互作用,相互作用以疏水相互作用為主導(dǎo),疏水性較強(qiáng)的RVDV16-I與疏水藥物的相互作用較強(qiáng)。在機(jī)械攪拌下,兩種自組裝短肽均能與大黃素在水中形成相對(duì)穩(wěn)定的混懸液,混懸液在模擬生理?xiàng)l件下均能形成原位凝膠,凝膠中大黃素的體外釋放呈現(xiàn)一定的緩釋現(xiàn)象。自組裝短肽-大黃素原位凝膠保持或增強(qiáng)了大黃素固有的抑制腫瘤細(xì)胞增殖作用。RADA16-I與RVDV16-I對(duì)疏水性藥物均有良好的載藥和釋藥能力,可通過(guò)調(diào)整短肽種類(lèi)或濃度調(diào)節(jié)藥物的釋放,并保持或促進(jìn)藥物的作用,因而在疏水性藥物傳遞系統(tǒng)中具有一定的應(yīng)用潛力。
【圖文】：

遵義醫(yī)學(xué)院碩士論文 孟翠究具有重要的啟發(fā)作用。在上述研究的基礎(chǔ)上，探討不同氨基酸組成的離子互補(bǔ)型自組裝短肽與疏水藥物的相互作用并探究氨基酸殘基對(duì)自組裝短肽載藥系統(tǒng)的影響，有望篩選、發(fā)現(xiàn)更多的自組裝短肽作為可用的藥物載體具有重要的基礎(chǔ)理論意義和應(yīng)用價(jià)值。

5[35, 36]（圖2）�，F(xiàn)代藥理學(xué)研究結(jié)果顯示，大黃素的藥理作用十分廣泛[37]，除具有很強(qiáng)的抗菌抗炎作用外[38]，，還具有免疫抑制、降壓、抗腫瘤等藥理作用[39]。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外研究者對(duì)大黃素抗腫瘤作用的研究做出了極大的
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R943

【參考文獻(xiàn)】

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1 唐富山;原凌燕;高冬芳;宋鴻;;自組裝短肽RAD16-I在水溶液中對(duì)疏水性化合物的穩(wěn)定作用[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2015年01期

2 曹軍;何陽(yáng);劉洪強(qiáng);王賽博;趙保成;鄭曉輝;程英升;;肺癌A549裸大鼠移植瘤模型的建立及應(yīng)用[J];介入放射學(xué)雜志;2014年10期

3 王祺s

本文編號(hào)：2662666