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載氧脂質微泡的制備及體外實驗研究

發(fā)布時間:2020-05-11 23:15
【摘要】:目的:調整載氧脂質微泡(LOM)氣體核內O2與C3F8的體積比,構建一種較穩(wěn)定、高效的LOM,并評價其理化性質。 方法:以DSPC+DPPE-MPEG5000脂質體為外殼材料,采用機械振蕩法制備六種不同體積比氣體核的LOM,即O2與C3F8的體積比為0:1、1:0、1:1、3:1、5:1、10:1。光鏡下觀察各組微泡不同時間(3h、1d、3d、7d)微泡的形態(tài),計數板計數各組微泡不同時間(3h、1d、3d、7d)的濃度,Malvern激光測量儀檢測各組微泡不同時間(1d、3d、7d)粒徑大小,溶解氧測定儀測定各組微泡在制備后0.5h、3.0h、1d在極度缺氧溶液中溶液溶解氧濃度(DO)的變化。選擇較優(yōu)的O2與C3F8體積比,并觀察該體積比微泡的Zeta電位,7天內PH值的變化,以及60Co輻照后,微泡的形態(tài)、大小、濃度、Zeta電位及釋氧能力的改變。MTT法檢測較優(yōu)LOM對缺氧胎鼠海馬神經元有無細胞毒性作用,分為四組:①缺氧+LOM組、②缺氧對照組、③triton-x100組、④未缺氧正常組。 結果:機械振蕩法制備的各種LOM中,以LOM5:1最優(yōu),其制備后微泡形態(tài)好,大小分布均勻,微泡濃度約為(4.01±0.69)×109/mL,平均粒徑約為(959.7±161.2)nm,Zeta電位為-(12.9±2.4)。7d觀察時間內,上述物理性質無顯著變化(p0.05)。LOM5:1在極度缺氧(DO=0.4mg/l)溶液中能高效釋放氧氣,使溶液DO值增加約12倍,載氧能力最強,且在1d內其釋氧時間-強度曲線無明顯變化。60Co輻照LOM5:1后,微泡形態(tài)大小、濃度、Zeta電位及釋氧能力無明顯變化(p0.05)。MTT結果顯示:50μl LOM5:1對細胞無毒性。①和④組比較,其MTT吸光值差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);而和②、③組比較,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。 結論:以DSPC+DPPE-MPEG5000為外殼材料,氣體核內O2與C3F8體積比為5:1構建的LOM5:1,,微泡形態(tài)好,濃度高,粒徑小且分布范圍較窄,7天內物理性質無明顯變化,1天內微泡能穩(wěn)定載氧。同時,LOM5:1對缺氧的胎鼠大腦海馬神經元無細胞毒性作用。 目的:評價LOM5:1在中度缺氧溶液及離體人靜脈血中的釋氧能力;探討超聲輻照對LOM5:1釋氧量的增強效果;觀察LOM5:1增強兔肝顯影的效果。 方法:機械振蕩法制備LOM5:1,溶氧儀檢測LOM5:1對中度缺氧(DO=4.0mg/L)溶液DO值的影響;在有超聲輻照的條件下,檢測中度缺氧溶液DO值的改變,對比有無超聲輻照LOM5:1釋氧量的改變。LOM5:1與離體人靜脈血混合后,檢測靜脈血Po2值的變化,并通過物理推算LOM5:1中的含氧量。評價微泡增強兔肝超聲顯影的效果。 結果:LOM5:1使中度缺氧溶液DO值增加約0.5倍;超聲輻照條件下,能顯著增加微泡的釋氧量,使中度缺氧溶液DO值增加約1倍;LOM5:1能使離體人靜脈血Po2增加約4倍,顯著升高離體人靜脈血Po2(p0.05)。載氧脂質微泡可明顯增強兔肝實質超聲顯影,且持續(xù)增強約30min。 結論:LOM5:1在中度缺氧環(huán)境中較在極度缺氧環(huán)境中釋放氧氣量少;超聲輻照下,該微泡在中度缺氧環(huán)境中的釋氧量明顯增加;能顯著增加離體人靜脈血Po2。LOM5:1有望成為一種安全、有效的靜脈攜氧劑。
【圖文】:

微泡,時間點,濃度


16圖 1-3 各組微泡各時間點光鏡觀察(×400)Fig.1-3 Microscope images of different LOMs at different time(×400)2 各組 LOM 濃度隨時間的變化①LOM 0:1:制備后 3 h,微泡濃度為(2.720±0.647)×109/ml;制備后 1 d,泡濃度為(2.637±0.657)×109/ml;制備后 3 d,微泡濃度為(2.734±0.743)109/ml;制備后 7 d,微泡濃度為(2.629±0.623)×109/ml; ② LOM 1:0:制后 3 h,微泡濃度為(0.446±0.104)×109/ml;制備后 1 d,微泡濃度為(0.041

PH值,微泡,溶液,懸液


LOM 5:1 微泡在制備后0.5 h、1 d、3 d及7 d,其懸液PH值分別為7.120±0.078、7.073±0.031、7.070±0.075及7.010±0.026,表明該組微泡在7天內溶液PH值無明顯變化(P>0.05)(圖1-7)。LOM 5:1 微泡溶液Zeta電位為 -(12.9±2.4)
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R943

【參考文獻】

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1 雷瑚儀;趙謝蘭;;幽門螺桿菌細胞毒素相關蛋白A在特發(fā)性血小板減少性紫癜發(fā)病機制中的作用[J];醫(yī)學研究生學報;2012年01期

2 譚開彬,高云華,劉平,左松,劉政,朱賢勝;自制脂膜氟碳聲學造影劑長時間增強組織灰階顯像的機理初探[J];中國超聲醫(yī)學雜志;2003年03期



本文編號:2659218

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