【摘要】：肺癌是臨床最常見的惡性腫瘤之一,主要包括非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌,其中非小細(xì)胞肺癌(NSCLCs)占肺癌比例的85%左右,5年生存率約15%。目前肺癌的臨床治療手段主要是手術(shù)、放療、化療,其中化療基本為口服或靜脈給藥,藥物全身分布,達(dá)到肺癌組織的藥物量有限。光動(dòng)力學(xué)療法(PDT)是一種新型治療手段,利用光敏劑在一定波長(zhǎng)激光激發(fā)下產(chǎn)生單線態(tài)氧的原理,殺死周圍腫瘤細(xì)胞。決定PDT效果的關(guān)鍵是腫瘤組織內(nèi)有一定量光敏劑和激發(fā)光能到達(dá)病變組織。吉非替尼是第一個(gè)表皮生長(zhǎng)因子酪氨酸激酶抑制劑,屬分子靶向藥物。吉非替尼的上市劑型為口服片(Iressa~?),藥物吸收后到達(dá)肺部的藥物量有限。而口服后藥物分布到其他組織會(huì)帶來(lái)一些副作用,如腹瀉,皮疹,皮膚干燥和痤瘡等。同時(shí)由于其價(jià)格昂貴,也帶來(lái)較高的治療成本。本研究制備了吉非替尼的脂質(zhì)體和納米粒,并進(jìn)一步制備成肺吸入制劑,可將吉非替尼直接輸送至肺部。與吉非替尼片比較,吉非替尼納米粉霧劑的肺組織分布量大,維持時(shí)間長(zhǎng),藥效顯著提高。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步考察了肺吸入吉非替尼納米制劑聯(lián)合PDT治療肺癌的效果。姜黃素已被證明具有抗腫瘤效果,但其易氧化、水溶性差、體內(nèi)代謝快,限制了姜黃素的臨床應(yīng)用。本研究制備了肺吸入姜黃素脂質(zhì)體粉霧劑,與肺吸入姜黃素原料粉末、吉西他濱溶液比較,前者的藥效強(qiáng)。本文深入探討了其抗肺癌機(jī)制。1.吉非替尼納米制劑的制備及性質(zhì)用乙醇注入法制備吉非替尼脂質(zhì)體,經(jīng)凍干和篩分獲得吉非替尼脂質(zhì)體粉霧劑,并用正交試驗(yàn)篩選獲得最優(yōu)處方,即大豆磷脂:膽固醇:吉非替尼=15:3:5(mol/mol),占25%,甘露醇占75%;復(fù)溶后的脂質(zhì)體粒徑為79.22nm。用紫外分光光度法和凝膠柱色譜法測(cè)定吉非替尼脂質(zhì)體的載藥量為5.91%,包封率為98.09%。粉霧劑空氣動(dòng)力學(xué)粒徑為5.32μm,肺部沉積率為35.23%,適合肺吸入給藥。用乳化法制備吉非替尼聚乳酸羥基乙酸(PLGA)納米粒,粒徑為222.53nm。用高效液相色譜法和離心法測(cè)定吉非替尼納米粒的含藥量為5mg/mL,包封率為100%。2.吉非替尼制劑藥代動(dòng)力學(xué)建立原發(fā)性大鼠肺癌模型,肺部給藥吉非替尼原料、吉非替尼脂質(zhì)體粉霧劑以及口服吉非替尼片,用高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)血藥濃度和組織分布,發(fā)現(xiàn)相同給藥劑量下,三組血藥濃度相當(dāng),但吉非替尼原料和脂質(zhì)體組中的肺組織藥物濃度是口服組的5倍以上,口服組的肝中藥物濃度顯著高于肺給藥組,原料組的藥物肺滯留時(shí)間較長(zhǎng)。3.吉非替尼制劑藥效學(xué)原發(fā)性肺癌大鼠分別進(jìn)行口服吉非替尼片、肺部給藥吉非替尼原料藥或吉非替尼脂質(zhì)體粉霧劑。與口服組比較,原料及脂質(zhì)體組的肺組織損傷減輕,肺泡灌洗液中炎癥因子(TNF-α、總蛋白)顯著降低,肺組織EGFR和AKT被顯著抑制。脂質(zhì)體組的肺癌細(xì)胞線粒體膜電位降低,Caspase-3水平升高,凋亡增強(qiáng),與口服和原料組比較均有顯著性差異。原發(fā)性肺癌大鼠肺部給藥吉非替尼納米粒,以及單獨(dú)或聯(lián)合5-氨基酮戊酸(5-ALA)PDT(660nm,30s),經(jīng)1周治療,吉非替尼聯(lián)合PDT的療效比單獨(dú)吉非替尼或單獨(dú)PDT好。4.姜黃素脂質(zhì)體粉霧劑的制備及性質(zhì)用薄膜分散法制備姜黃素脂質(zhì)體,然后用噴霧干燥法制備姜黃素脂質(zhì)體粉霧劑,并用正交試驗(yàn)篩選獲得最優(yōu)處方,即大豆磷脂:姜黃素=2:1(mol/mol),占17%,乳糖占83%;復(fù)溶后的脂質(zhì)體粒徑為20~30nm。離心后用HPLC測(cè)定姜黃素脂質(zhì)體的載藥量為3.5%,包封率為89.1%。粉霧劑空氣動(dòng)力學(xué)粒徑為5.81±0.06μm,肺部沉積率為46.71%,適合肺吸入給藥。5.姜黃素的細(xì)胞毒性考察姜黃素原料和脂質(zhì)體對(duì)人肺癌A549細(xì)胞和人支氣管上皮BEAS-2B細(xì)胞的毒性,其中姜黃素脂質(zhì)體比姜黃素原料的A549細(xì)胞攝取率高,誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡,細(xì)胞毒性強(qiáng);對(duì)BEAS-2B細(xì)胞有一定毒性,100μmol/L時(shí),但姜黃素脂質(zhì)體的選擇指數(shù)是姜黃素原料的90倍左右。6.姜黃素粉霧劑的藥效學(xué)原發(fā)性肺癌大鼠分別進(jìn)行吉西他濱溶液、姜黃素原料、姜黃素脂質(zhì)體粉霧劑肺部給藥。與吉西他濱組和原料組比較,脂質(zhì)體組的肺組織損傷減輕,肺泡灌洗液和肺組織中炎癥因子(TNF-α、MDA、Bcl-2)顯著降低。脂質(zhì)體組的肺癌細(xì)胞線粒體膜電位降低,Caspase-3水平升高,凋亡增強(qiáng),與吉西他濱組和原料組比較有顯著性差異。姜黃素副作用小,肺部給藥克服了其缺點(diǎn),可能成為新一代肺吸入治療肺癌的有效藥物。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R943

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2658282