【摘要】：姜黃素(curcumin,Cur)是一種天然的黃色酸性酚類(lèi)化合物,有著極其廣泛的藥理作用,其中包括抗腫瘤、抗炎、抗病毒等藥理作用。但Cur在水中溶解度極低且穩(wěn)定性差,生物利用度低,臨床應(yīng)用受到了一定的限制。為提高Cur的溶解度、穩(wěn)定性和生物利用度,目前的研究主要集中于將Cur制備成新劑型。普朗尼克(Pluronic)能在水溶液中自組裝成膠束系統(tǒng),能增加Cur的溶解度。聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯(D-α-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate,TPGS)是一種安全的非離子表面活性劑,能夠增加Cur的溶解度和姜黃素納米混合膠束制劑的穩(wěn)定性。將普朗尼克和TPGS制備成混合膠束,穩(wěn)定性得到提高。葉酸受體(folate receptor,FR)是錨定在細(xì)胞膜上的一種糖蛋白,腫瘤細(xì)胞表面的葉酸受體的表達(dá)顯著高于正常細(xì)胞的表達(dá)水平,但在正常的組織細(xì)胞中則無(wú)或極少表達(dá)。葉酸受體能將藥物濃集于病灶靶區(qū),可避免對(duì)正常細(xì)胞產(chǎn)生毒性,增加療效。本研究以Cur、TPGS、Pluronic P123(P123)、Pluronic F127(F127)為原料制備了姜黃素TPGS/P123/F127納米混合膠束(Cur-TFPs)。在合成Fa-P123的基礎(chǔ)上,制備了葉酸修飾的姜黃素TPGS/P123/F127納米混合膠束(Fa-Cur-TFPs),分別考察了載姜黃素的TPGS/F127/P123納米混合膠束(Cur-TFPs)、Fa-Cur-TFPs的理化性質(zhì),采用MTT法研究了Cur-TFPs和Fa-Cur-TFPs對(duì)He La細(xì)胞和Hep G2細(xì)胞的抑制作用。1紫外分光光度法(UV-vis法)測(cè)定Cur-TFPs中Cur的含量采用UV-vis法測(cè)定Cur-TFPs中姜黃素的含量,檢測(cè)波長(zhǎng)為430nm,光譜掃描范圍為200~600nm。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,載體材料對(duì)Cur的含量測(cè)定無(wú)干擾,線性范圍為1.0~5.0μg·m L-1(R2=0.9992),日內(nèi)精密度和日間精密度的RSD均小于2%,重復(fù)性良好,加樣回收率均在98%~101%之間,RSD均小于2%。該方法操作簡(jiǎn)便、快速,專(zhuān)屬性和精密度良好,結(jié)果準(zhǔn)確,可用于Cur-TFPs中Cur的含量測(cè)定。2 Cur-TFPs處方工藝條件的考察采用改良的薄膜水化法,制備姜黃素TPGS/F127/P123混合膠束(Cur-TFPs),在單因素考察的前提下,選取包封率、載藥量和沉降率為因變量,姜黃素投藥量、TPGS用量和F127/P123(mg/mg)比例為自變量,進(jìn)行3因素7水平均勻設(shè)計(jì),對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多項(xiàng)式線性方程擬合,繪制響應(yīng)面和等高線圖,并對(duì)優(yōu)化后的處方進(jìn)行驗(yàn)證。得出最優(yōu)處方,姜黃素量為14.0mg,TPGS為150.0mg,F127/P123(mg/mg)比例為68:32。三批驗(yàn)證處方的溶解度為(3.47±0.14)mg·m L-1,包封率為(87.15±4.39)%,載藥量為(4.70±0.17)%,48小時(shí)內(nèi)沉降率為(0.33±0.11)%。結(jié)果顯示,姜黃素TPGS/F127/P123混合膠束(Cur-TFPs)處方工藝經(jīng)過(guò)均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)化后,溶解度得到很大程度的提高,包封率和載藥量亦得到提高。采用改良的薄膜水化法,制備Cur-TFPs,并考察其理化性質(zhì)。Cur-TFPs呈圓球形,分散均勻,Size平均值在10~100nm范圍內(nèi),Zeta電位絕對(duì)值平均值接近于0mv,溶解度均值為3.16mg·m L-1。F127/P123和TPGS/F127/P123空白納米混合膠束溶液的膠束臨界濃度(critical micelle concentration,CMC)分別為4μg·m L-1和100μg·m L-1。Cur丙二醇溶液8h累積釋放率為82.25%,基本上釋放完全,而Cur-TFPs 8h累積釋率為20.30%,120h累積釋放率79.95%。結(jié)果表明,Cur-TFPs中Cur的溶解度得到了很大程度的提高,且釋放結(jié)果顯示該納米混合膠束具有明顯的緩釋作用。4 Fa-P123的合成及表征取適量葉酸(folic acid,Fa),加DMSO溶解,N,N'-羰基二咪唑(N,N'-Carbonyldiimidazole,CDI)為酯化縮合劑。在N2環(huán)境下,加入P123,反應(yīng)完成后,透析除去未反應(yīng)的Fa,將透析液冷凍干燥,即得靶向材料Fa-P123。以UV-vis和紅外光譜法(IR)鑒定其結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明,Fa-P123合成物在256nm、283nm與365nm的波長(zhǎng)附近處有最大吸收,且256nm與365mn波長(zhǎng)處的吸光度比值為2.86。IR的兩個(gè)吸收帶分別為1251.33cm-1和1107.10cm-1,提示此合成物具有酯的兩個(gè)特征峰為γc-o-c和γc=o,推斷成功合成了Fa-P123。5 Fa-Cur-TFPs的制備及其理化性質(zhì)的考察采用改良的薄膜水化法,制備葉酸修飾的載姜黃素的TPGS/F127/P123納米混合膠束(Fa-Cur-TFPs),并考察其理化性質(zhì)。結(jié)果表明,Fa-Cur-TFPs呈圓球形,分散均勻,Size平均值在10~100nm范圍內(nèi),Zeta電位絕對(duì)值平均值接近于0mv,TPGS/F127/P123/Fa和3 Cur-TFPs的制備及其理化性質(zhì)的考察TPGS/F127/P123/Fa-P123空白納米混合膠束溶液的CMC值分別為40μg·m L-1和400μg·m L-1,略大于F127/P123和TPGS/F127/P123空白納米混合膠束溶液的CMC值。Cur丙二醇溶液8h累積釋放率為86.65%,基本上釋放完全,而Fa-Cur-TFPs 8h累積釋放率為18.69%,120h累積釋放率為86.34%。與Cur丙二醇溶液相比,該靶向納米混合膠束同樣具有明顯的緩釋作用。6姜黃素納米混合膠束制劑對(duì)He La細(xì)胞和Hep G2細(xì)胞的抑制作用采用MTT法考察了姜黃素原料藥、姜黃素納米混合膠束制劑Cur-TFPs和Fa-Cur-TFPs對(duì)He La細(xì)胞和Hep G2細(xì)胞的抑制作用。結(jié)果表明,與原料藥Cur相比,Cur-TFPs和Fa-Cur-TFPs對(duì)腫瘤細(xì)胞均呈現(xiàn)出顯著的抑制作用(P0.01),與Cur-TFPs比較,Fa-Cur-TFPs對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用也具有顯著性差異(P0.05)。綜上所述,本研究采用改良的薄膜水化法,制備了Cur-TFPs和Fa-Cur-TFPs。所制備的姜黃素納米混合膠束,性質(zhì)穩(wěn)定、大大提高了制劑中姜黃素的溶解度,以及制劑具有明顯的緩釋作用。而且對(duì)腫瘤細(xì)胞有顯著的抑制作用,尤其是Fa-Cur-TFPs抑制作用更強(qiáng)。本研究為新劑型最終應(yīng)用到臨床,提高癌癥的治療效果,提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)與理論基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：河北北方學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R943;R96

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 高晉生;李囿松;劉麗坤;汪欣文;;姜黃素對(duì)人腎癌Caki-2細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡的影響及其機(jī)制[J];遼寧中醫(yī)雜志;2015年09期

2 江燕妮;邵紅偉;譚宇蕙;杜標(biāo)炎;胡妮;張廣獻(xiàn);;姜黃素誘導(dǎo)腎癌786-O細(xì)胞G2/M期阻滯及其分子機(jī)制的研究[J];中藥新藥與臨床藥理;2015年04期

3 金子;蔡穎;張曄;劉云鵬;曲秀娟;徐玲;侯科佐;;姜黃素對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞PI3-K/Akt和MEK/ERK信號(hào)通路的影響[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2015年12期

4 張銳;劉世清;;姜黃素保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨抑制骨關(guān)節(jié)炎的作用和機(jī)制[J];中國(guó)組織工程研究;2015年02期

5 陸波;謝延風(fēng);石全紅;但煒;詹彥;潘涼澤;胡鐵弋;;姜黃素通過(guò)抑制外傷性癲癇鼠腦組織中mTORC1的表達(dá)發(fā)揮抗癲癇效應(yīng)[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2015年05期

6 李厚忠;張羽飛;;姜黃素對(duì)阿爾茨海默病模型小鼠抗氧化系統(tǒng)的影響[J];中醫(yī)藥學(xué)報(bào);2014年05期

7 許可;李昱;;姜黃素對(duì)阿爾茨海默病患者神經(jīng)保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J];臨床與病理雜志;2014年01期

8 金祥秋;靳蕊霞;孫洞簫;;姜黃素對(duì)腺嘌呤誘發(fā)的腎間質(zhì)纖維化大鼠血及尿FN、TGF-β_1、Col-Ⅳ水平的影響[J];山東醫(yī)藥;2014年02期

9 何麗琳;沈永祥;周中銀;徐禹;劉梓良;;姜黃素下調(diào)HIF-1α/MMP-9通路抑制人胃癌裸鼠移植瘤生長(zhǎng)[J];腫瘤防治研究;2013年08期

10 付文成;彭文;王浩;王云滿;劉育軍;;姜黃素對(duì)醛固酮誘導(dǎo)腎間質(zhì)纖維化的保護(hù)作用[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2013年02期

，

本文編號(hào)：2639666