【摘要】：肺癌是全世界最常見的腫瘤,在中國的發(fā)病率和死亡率也居腫瘤相關死亡的首位。盡管肺癌的早期診斷和治療方面取得了一定進展,但大多數(shù)患者確診時已經處于中晚期,所以化療仍然是主要的治療手段。因此闡明腫瘤的發(fā)病機制,為治療提供新靶點和新策略尤為重要。格列苯脲是一種傳統(tǒng)的抗糖尿病藥物,有研究報道了其對某些腫瘤的抗癌作用,但其對非小細胞肺癌的作用和機制仍不明確�；酋ｋ迨荏w1(SUR1)是格列苯脲的受體,是ATP敏感鉀通道(K_(ATP))的調節(jié)亞單位。在胰島β細胞中,格列苯脲與SUR1結合以后,關閉K_(ATP)通道,促進胰島素釋放。目前,關于SUR1在腫瘤中的表達和作用機制仍不明確。本研究中,我們發(fā)現(xiàn)格列苯脲抑制非小細胞肺癌細胞的生長、引起細胞周期阻滯于G1期,并抑制p70S6K的活性。敲降SUR1可抑制細胞生長及下調p70S6K的活性,與格列苯脲的作用一致;而過表達SUR1作用相反,表現(xiàn)為促進細胞生長和上調p70S6K的活性。進一步研究發(fā)現(xiàn),過表達p70S6K,可以部分取消格列苯脲對細胞生長的抑制作用,反之,敲降p70S6K的表達可以增強格列苯脲的作用。進一步研究發(fā)現(xiàn)SUR1與p70S6K蛋白間存在直接結合,格列苯脲可以促進二者的結合;格列苯脲同時引起m TOR復合物1的解聚,可能是其抑制p70S6K活性的作用機制。我們在裸鼠異種移植瘤模型上,研究發(fā)現(xiàn)格列苯脲處理或穩(wěn)定敲降SUR1的表達均抑制A549腫瘤的生長且下調p70S6K信號通路。最后,我們利用Oncomine數(shù)據(jù)庫和Kaplan生存期數(shù)據(jù)庫,分析發(fā)現(xiàn)SUR1在肺癌患者腫瘤組織中的表達增高,低表達肺癌患者的生存期較長。本研究發(fā)現(xiàn)了格列苯脲抑制非小細胞肺癌的作用,以及靶向SUR1,通過直接結合及抑制m TORC1的作用下調p70S6K信號通路的分子機制。這些發(fā)現(xiàn)為靶向SUR1和使用抗糖尿病藥物格列苯脲進行非小細胞肺癌治療提供了理論依據(jù)和實驗證據(jù)。
【圖文】：

22圖 1、格列苯脲抑制非小細胞肺癌細胞的生長。Figure 1.Glibenclamide inhibits the growth of non-small cell lung carcinoma cells.A、非小細胞肺癌細胞株 A549，H460，H157 接種于 96 孔板，給予不同濃度格列苯脲處理3 天，用 SRB 法檢測細胞的存活率，計算藥物的抑制率。B、上述細胞株接種于 12 孔板，給予不同濃度的格列苯脲處理 14 天，期間每 3 天更換一次含格列苯脲的新鮮培養(yǎng)基，，結晶

24圖 2、格列苯脲抑制 p70S6K 信號通路。Figure 2. Glibenclamide inhibits p70S6K signaling pathway.A、非小細胞肺癌細胞株（A549、H1299）接種于 6 cm 的培養(yǎng)皿中，24 h 后格列苯脲處理不同時間（0、5、15、30、60 min），提取細胞總蛋白，west關蛋白表達水平的變化。B、非小細胞肺癌細胞株（A549、H1299、H460、cm 的培養(yǎng)皿中，18 h 后去血清處理，23 h 后再復血清處理 1 h，期間給予苯脲處理不同時間（0、5、15、30、60 min），提取細胞總蛋白，western b白表達水平的變化。
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R96

【參考文獻】

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1 段鵬;全超;黃文婷;楊克敵;;PI3K-Akt/LKB1-AMPK-mTOR-p70S6K/4EBP1信號通路參與調節(jié)睪丸發(fā)育和精子發(fā)生的研究進展[J];中華男科學雜志;2016年11期

本文編號：2639169