【摘要】：黃嘌呤氧化還原酶抑制劑能有效抑制尿酸生成,對(duì)于治療高尿酸血癥具有顯著的效果。黃嘌呤氧化還原酶抑制劑的藥物代謝研究不僅能夠解釋其在體內(nèi)的轉(zhuǎn)化,也能夠被用來預(yù)測(cè)藥物的毒性。本論文對(duì)黃嘌呤氧化還原酶抑制劑進(jìn)行了藥效學(xué)和代謝組學(xué)研究,并通過ProTox-II數(shù)據(jù)平臺(tái)對(duì)藥物及其代謝產(chǎn)物進(jìn)行了毒性預(yù)測(cè),從藥物代謝角度對(duì)藥效及安全性進(jìn)行評(píng)價(jià),對(duì)藥物設(shè)計(jì)和藥物改造具有指導(dǎo)意義。本論文研究取得了如下成果:(1)LS087藥效學(xué)評(píng)價(jià)。以SPF級(jí)小鼠通過注射次黃嘌呤和氧嗪酸鉀建立高尿酸血癥模型,通過正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、非布索坦給藥組和LS087給藥組的血清尿素氮、肌酐、尿酸水平以及腎臟、肝臟HE、PAS、Masson染色病理結(jié)果數(shù)據(jù)對(duì)LS087進(jìn)行藥效學(xué)評(píng)價(jià)。結(jié)果表明非布索坦給藥組(P0.001)和LS087給藥組(P0.001)血清尿酸值較模型組顯著下降,非布索坦及LS087可以降低高尿酸血癥小鼠血清中尿酸水平,且效果相當(dāng)。非布索坦給藥組(P0.05)和LS087給藥組(P0.01)血清尿素氮濃度水平較模型組顯著下降,非布索坦及LS087均可降低高尿酸血癥小鼠血清中尿素氮水平,LS087效果稍差。模型組血肌酐較正常對(duì)照組顯著升高(P0.001),非布索坦及LS087給藥組與模型組相比均無(wú)顯著差異。從腎臟組織病理和生化指標(biāo)考察,非布索坦及LS087均具有降尿酸效果,且在一定程度上可以改善高尿酸血癥小鼠的腎小管功能。(2)非布索坦和LS087代謝產(chǎn)物鑒定。以10 mg/kg單次給藥方式分別給予大鼠口服非布索坦和LS087建立代謝產(chǎn)物鑒定模型,建立了一種快速、靈敏的分離測(cè)定大鼠血清和尿液中藥物及其代謝產(chǎn)物的UHPLC-Q-TOF/MS方法。同時(shí)建立了基于UHPLC-Q-TOF/MS方法下的藥物及其代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)處理流程。利用Biotransformation Mass Defects軟件對(duì)非布索坦的代謝物進(jìn)行預(yù)測(cè),并將所有可能的代謝產(chǎn)物分子式及精確分子量信息轉(zhuǎn)化為個(gè)人化合物數(shù)據(jù)庫(kù)(Personal Compound Database,PCD),采集所得的MS1數(shù)據(jù)可以快速匹配自建PCD中可能的代謝產(chǎn)物。利用分子結(jié)構(gòu)相關(guān)軟件(Molecular Structure Correlator,MSC)計(jì)算了MS/MS斷裂的可能性。通過標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)處理流程,鑒定出非布索坦給藥組大鼠血清中有4個(gè)I相和2個(gè)II相代謝產(chǎn)物,尿液中有7個(gè)I相和3個(gè)II相代謝產(chǎn)物。其中代謝物(M2,M5,M6,M7)目前尚未見報(bào)道。鑒定出LS087給藥組大鼠血清中有4個(gè)I相和4個(gè)II相代謝產(chǎn)物,尿液中有5個(gè)I相和5個(gè)II相代謝產(chǎn)物。LS087所有代謝物均尚未見報(bào)道。(3)非布索坦和LS087代謝產(chǎn)物毒性預(yù)測(cè)。通過ProTox-II網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)平臺(tái)對(duì)非布索坦、LS087及其代謝產(chǎn)物毒性進(jìn)行了預(yù)測(cè),發(fā)現(xiàn)非布索坦及其所有代謝產(chǎn)物均預(yù)測(cè)具有肝毒性,其結(jié)果提示應(yīng)對(duì)非布索坦及其代謝產(chǎn)物進(jìn)行更深入的毒理學(xué)考察,對(duì)改造非布索坦化學(xué)結(jié)構(gòu)及合成新型黃嘌呤氧化還原酶抑制劑的設(shè)計(jì)具有一定的指導(dǎo)意義。與非布索坦相比較,LS087及LS-M2,LS-M3,LS-M5,LS-M6,LS-M7,LS-M8預(yù)測(cè)不存在潛在肝毒性。雖然LS-M1、LS-M4、LS-M9和LS-M10預(yù)測(cè)仍具有潛在的肝毒性,但由于這四種代謝產(chǎn)物含量非常低,其總量不足1%,我們認(rèn)為L(zhǎng)S087對(duì)肝損害患者較非布索坦具有更低的風(fēng)險(xiǎn)。LS-M1和LS-M8預(yù)測(cè)具有潛在的致癌性,未來仍需開展進(jìn)一步的深入研究,以確認(rèn)LS087的藥物安全性。但由于LS-M1和LS-M8總量不足0.1%,因此與非布索坦相比,我們認(rèn)為L(zhǎng)S087可能是一種更安全、更有效的黃嘌呤氧化還原酶抑制劑。(4)非布索坦代謝機(jī)制研究。通過高尿酸血癥小鼠模型,以代謝組學(xué)的方法對(duì)非布索坦的代謝機(jī)理進(jìn)行研究。通過主成分及層次聚類分析,正常對(duì)照組、模型組和給藥組組內(nèi)聚類好,說明模型穩(wěn)定性好,組間可以完全分離,表明三組小鼠的血清代謝物譜發(fā)生了顯著變化。通過數(shù)據(jù)庫(kù)匹配,鑒定了16種與高尿酸血癥相關(guān)的潛在生物標(biāo)志物。代謝通路分析表明外源性次黃嘌呤進(jìn)入小鼠體內(nèi)后,嘌呤代謝被過度激活,使次黃嘌呤迅速往黃嘌呤轉(zhuǎn)化,但受到非布索坦干預(yù)后,抑制了XOR的活性,使次黃嘌呤往黃嘌呤轉(zhuǎn)化減弱,因此,模型對(duì)照組的次黃嘌呤顯著低于非布索坦給藥組,這一過程體現(xiàn)了非布索坦在次黃嘌呤往黃嘌呤轉(zhuǎn)化階段對(duì)XOR的顯著抑制作用。研究結(jié)果為非布索坦機(jī)理的闡明及黃嘌呤氧化還原酶抑制劑藥物研發(fā)提供了依據(jù)。
【圖文】：

2圖 1-2 高級(jí)靈長(zhǎng)類動(dòng)物和低級(jí)動(dòng)物體內(nèi)尿酸的生成和排泄過程[3]. 1-2 Uric acid production and removal in higher primates and lower animals尿酸損害血管內(nèi)皮細(xì)胞完整性能力的研究[17]相反，最近的一份報(bào)告尿酸水平極低，是由于 SLC22A12 編碼血管的功能喪失和腎近端小管 URAT1 突變，引起體內(nèi)內(nèi)皮功能障礙[18]。同樣有其他報(bào)道質(zhì)疑了尿

第一章 緒論糖食物和飲料，，增加肌苷和嘌呤的產(chǎn)生，過多攝入富含嘌呤的食物和飲料，代謝后產(chǎn)生過多的尿酸。此外，與外源性因素相比，高尿酸血癥更多是由于內(nèi)源性嘌呤代謝紊亂引起的。嘌呤在體內(nèi)直至到被排除體外要經(jīng)過復(fù)雜的代謝反應(yīng)[48]（見圖 1-3），每一步的轉(zhuǎn)化均需相應(yīng)的酶參與才能完成，不管是哪種酶出現(xiàn)異常均可引起體內(nèi)尿酸異常，這就是內(nèi)源性嘌呤代謝紊亂，如次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶(HPRT)缺乏癥、磷酸核糖焦磷酸（PRPP）合成酶亢進(jìn)癥、糖原貯積癥（UI、Ⅳ、Ⅶ型）等[50]。在白血病、淋巴瘤化療、放療過程中，由于大量的細(xì)胞破壞，可導(dǎo)致核酸代謝加速，進(jìn)而導(dǎo)致繼發(fā)性高尿酸血癥[51]。
【學(xué)位授予單位】：華南理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R96

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李林;朱小霞;戴宇翔;林寰東;戴若蓮;薛鸞;樊松;;中國(guó)高尿酸血癥相關(guān)疾病診療多學(xué)科專家共識(shí)[J];中華內(nèi)科雜志;2017年03期

2 李鑫德;李長(zhǎng)貴;;促進(jìn)尿酸分解藥物的療效與安全性評(píng)價(jià)[J];藥品評(píng)價(jià);2015年07期

3 杜娜;王顏剛;;抑制尿酸合成藥物的療效與安全性評(píng)價(jià)[J];藥品評(píng)價(jià);2015年07期

4 葉曉蘭;陳朝生;徐仁愛;張春紅;潘曉峰;張秀華;;HLA-B*5801攜帶情況及其與別嘌醇過敏反應(yīng)間的相關(guān)性[J];溫州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2015年02期

5 牛麗霞;李文靜;;高尿酸血癥與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系研究[J];中國(guó)煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2014年12期

6 李葵花;王喜福;李璐;谷俊改;高小濤;劉艷麗;姚偉娟;謝利德;;高尿酸血癥與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系研究進(jìn)展[J];中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志;2014年01期

7 ;高尿酸血癥和痛風(fēng)治療的中國(guó)專家共識(shí)[J];中華內(nèi)分泌代謝雜志;2013年11期

8 陳濤;李衛(wèi);王楊;胡泊;徐濤;劉冰;孫毅;;高尿酸血癥的患病情況及相關(guān)因素分析[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2012年13期

9 侯蕾蕾;賀圣文;張東方;;高尿酸血癥與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系的Meta分析[J];預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇;2012年02期

10 陸海峰;;愛西特治療慢性腎功能衰竭療效觀察[J];臨床醫(yī)學(xué);2010年08期

本文編號(hào)：2608555