【摘要】：鑒于海洋環(huán)境相較于陸地環(huán)境的獨(dú)特性,來(lái)源于海洋微生物的天然產(chǎn)物受到了研究者的重視。海洋真菌為了適應(yīng)復(fù)雜特殊的海洋環(huán)境,形成了獨(dú)特的生存和代謝機(jī)制,其天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)多樣且活性顯著,是新藥開(kāi)發(fā)的重要來(lái)源。本文系統(tǒng)地研究了從福建漳州東山灣的海泥樣品分離到的81株海洋真菌,完成了分子鑒定、小量發(fā)酵、抗菌活性和細(xì)胞毒活性篩選,選取活性最好的菌株WZW-F-30進(jìn)行大量發(fā)酵,綜合運(yùn)用正相硅膠柱層析、RP-18反相硅膠柱層析、LH-20凝膠柱層析、薄層層析和高效液相色譜等分離技術(shù)以及核磁共振波譜和質(zhì)譜等分析手段研究了海洋真菌WZW-F-30的天然產(chǎn)物。通過(guò)海水PDA培養(yǎng)基和海水孟加拉紅培養(yǎng)基從20份海泥樣品分離純化的81株海洋真菌經(jīng)過(guò)ITS分子鑒定得知它們分布在21個(gè)屬,主要是青霉屬、籃狀菌屬、曲霉屬和莖點(diǎn)霉屬等。對(duì)小量發(fā)酵粗提物進(jìn)行的抗菌活性篩選和細(xì)胞毒活性篩選的結(jié)果顯示活性最好的菌株是WZW-F-30,該菌株屬于梔子莖點(diǎn)霉。從海洋真菌WZW-F-30的大量發(fā)酵粗提物中一共分離純化了 17個(gè)化合物,其中有5個(gè)新化合物�；钚宰粉櫛砻髦饕幕钚援a(chǎn)物是棒曲霉素和氯代龍膽霉醇,同時(shí),新化合物WZW-04-036-01和WZW-04-103-01具有顯著的抗細(xì)菌活性,能夠抑制短小芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和恥垢分枝桿菌等細(xì)菌的生長(zhǎng),此外,新化合物WZW-04-103-01對(duì)Jeko-1、MDA-MB-231和A375等腫瘤細(xì)胞株具有一定的細(xì)胞毒活性。本文的結(jié)果表明,海洋真菌蘊(yùn)藏著豐富的天然產(chǎn)物資源,是新藥開(kāi)發(fā)的重要來(lái)源。
【圖文】：

２．１．１樣品來(lái)源逡逑本文的２０份海泥樣品由廈門(mén)大學(xué)海洋與地球?qū)W院柯才煥教授課題組提供，逡逑于２０１５年８月采樣于福建省漳州市東山灣附近海域（圖２．１），樣品ＤＳ０１Ａ１邋－逡逑ＤＳ０１Ａ５邋和樣品邋ＤＳ０１Ｂ１－ＤＳ０１Ｂ５邋來(lái)源于邋Ｎ邋２３。４７’７２７”邋Ｅ邋１１７。２９’０７９”，樣品逡逑ＤＳ０２Ａ１－ＤＳ０２Ａ５邋和樣品邋ＤＳ０２Ｂ１－ＤＳ０２Ｂ５邋來(lái)源于邋Ｎ２３°４７’５３４”Ｅ邋１１７。２９’０１３”》逡逑經(jīng)度邋１１７２９邋ｘ邋■逡逑樣度２３４７逡逑圖２．１采樣地點(diǎn)逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２．１邋Ｓａｍｐｌｉｎｇ邋ｐｏｓｉｔｉｏｎ逡逑２．１．２常用培養(yǎng)基逡逑２．１．２．１真菌培養(yǎng)基逡逑海水ＰＤＡ培養(yǎng)基：稱(chēng)取２００邋ｇ去皮馬鈴薯，切成小塊，加水煮沸３０邋ｍｉｎ，逡逑用八層紗布過(guò)濾其濾液，再在濾液中加入２０邋ｇ葡萄糖和３０邋ｇ海鹽，加水定容至逡逑１Ｌ，邋１２１邋°Ｃ高壓蒸汽滅菌２０邋ｍｉｎ。逡逑海水孟加拉紅培養(yǎng)基：稱(chēng)取３５邋ｇ孟加拉紅培養(yǎng)基干粉和３０邋ｇ海鹽，加水加逡逑熱煮沸溶解，定容至１Ｌ，邋１２１°Ｃ高壓蒸汽滅菌２０ｍｉｎ。孟加拉紅培養(yǎng)基購(gòu)自北京逡逑奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司，其成分為５邋ｇ蛋白胨、ｌｇ磷酸二氫鉀、０．１邋ｇ氯逡逑１１逡逑

逑分菌結(jié)果顯示，海水ＰＤＡ培養(yǎng)基和海水孟加拉紅培養(yǎng)基能夠有效分離海洋逡逑真菌（圖３．１），不同形態(tài)特征的菌落在平板上可明顯區(qū)分，以便于進(jìn)一步純化。逡逑＿煖＿⑩逡逑圖３．１海洋真菌的分離平板逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋３．１邋Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ邋ｐｌａｔｅｓ邋ｏｆ邋ｍａｒｉｎｅ邋ｆｕｎｇｉ逡逑２６逡逑
【學(xué)位授予單位】：廈門(mén)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R915

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 趙成英;朱統(tǒng)漢;朱偉明;;2010～2013之海洋微生物新天然產(chǎn)物[J];有機(jī)化學(xué);2013年06期

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本文編號(hào)：2606697