【摘要】：鑒于海洋環(huán)境相較于陸地環(huán)境的獨特性,來源于海洋微生物的天然產物受到了研究者的重視。海洋真菌為了適應復雜特殊的海洋環(huán)境,形成了獨特的生存和代謝機制,其天然產物結構多樣且活性顯著,是新藥開發(fā)的重要來源。本文系統(tǒng)地研究了從福建漳州東山灣的海泥樣品分離到的81株海洋真菌,完成了分子鑒定、小量發(fā)酵、抗菌活性和細胞毒活性篩選,選取活性最好的菌株WZW-F-30進行大量發(fā)酵,綜合運用正相硅膠柱層析、RP-18反相硅膠柱層析、LH-20凝膠柱層析、薄層層析和高效液相色譜等分離技術以及核磁共振波譜和質譜等分析手段研究了海洋真菌WZW-F-30的天然產物。通過海水PDA培養(yǎng)基和海水孟加拉紅培養(yǎng)基從20份海泥樣品分離純化的81株海洋真菌經過ITS分子鑒定得知它們分布在21個屬,主要是青霉屬、籃狀菌屬、曲霉屬和莖點霉屬等。對小量發(fā)酵粗提物進行的抗菌活性篩選和細胞毒活性篩選的結果顯示活性最好的菌株是WZW-F-30,該菌株屬于梔子莖點霉。從海洋真菌WZW-F-30的大量發(fā)酵粗提物中一共分離純化了 17個化合物,其中有5個新化合物�；钚宰粉櫛砻髦饕幕钚援a物是棒曲霉素和氯代龍膽霉醇,同時,新化合物WZW-04-036-01和WZW-04-103-01具有顯著的抗細菌活性,能夠抑制短小芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和恥垢分枝桿菌等細菌的生長,此外,新化合物WZW-04-103-01對Jeko-1、MDA-MB-231和A375等腫瘤細胞株具有一定的細胞毒活性。本文的結果表明,海洋真菌蘊藏著豐富的天然產物資源,是新藥開發(fā)的重要來源。
【圖文】：

２．１．１樣品來源逡逑本文的２０份海泥樣品由廈門大學海洋與地球學院柯才煥教授課題組提供，逡逑于２０１５年８月采樣于福建省漳州市東山灣附近海域（圖２．１），樣品ＤＳ０１Ａ１邋－逡逑ＤＳ０１Ａ５邋和樣品邋ＤＳ０１Ｂ１－ＤＳ０１Ｂ５邋來源于邋Ｎ邋２３。４７’７２７”邋Ｅ邋１１７。２９’０７９”，樣品逡逑ＤＳ０２Ａ１－ＤＳ０２Ａ５邋和樣品邋ＤＳ０２Ｂ１－ＤＳ０２Ｂ５邋來源于邋Ｎ２３°４７’５３４”Ｅ邋１１７。２９’０１３”》逡逑經度邋１１７２９邋ｘ邋■逡逑樣度２３４７逡逑圖２．１采樣地點逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２．１邋Ｓａｍｐｌｉｎｇ邋ｐｏｓｉｔｉｏｎ逡逑２．１．２常用培養(yǎng)基逡逑２．１．２．１真菌培養(yǎng)基逡逑海水ＰＤＡ培養(yǎng)基：稱�。玻埃板澹缛テゑR鈴薯，切成小塊，加水煮沸３０邋ｍｉｎ，逡逑用八層紗布過濾其濾液，再在濾液中加入２０邋ｇ葡萄糖和３０邋ｇ海鹽，加水定容至逡逑１Ｌ，邋１２１邋°Ｃ高壓蒸汽滅菌２０邋ｍｉｎ。逡逑海水孟加拉紅培養(yǎng)基：稱取３５邋ｇ孟加拉紅培養(yǎng)基干粉和３０邋ｇ海鹽，加水加逡逑熱煮沸溶解，定容至１Ｌ，邋１２１°Ｃ高壓蒸汽滅菌２０ｍｉｎ。孟加拉紅培養(yǎng)基購自北京逡逑奧博星生物技術有限責任公司，其成分為５邋ｇ蛋白胨、ｌｇ磷酸二氫鉀、０．１邋ｇ氯逡逑１１逡逑

逑分菌結果顯示，海水ＰＤＡ培養(yǎng)基和海水孟加拉紅培養(yǎng)基能夠有效分離海洋逡逑真菌（圖３．１），不同形態(tài)特征的菌落在平板上可明顯區(qū)分，以便于進一步純化。逡逑＿煖＿⑩逡逑圖３．１海洋真菌的分離平板逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋３．１邋Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ邋ｐｌａｔｅｓ邋ｏｆ邋ｍａｒｉｎｅ邋ｆｕｎｇｉ逡逑２６逡逑
【學位授予單位】：廈門大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R915

【參考文獻】

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1 趙成英;朱統(tǒng)漢;朱偉明;;2010～2013之海洋微生物新天然產物[J];有機化學;2013年06期

2 楊道茂,歐陽明安,劉建福,王麗娜;海洋真菌的分離研究[J];云南大學學報(自然科學版);2004年S2期

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本文編號：2606697