【摘要】：目的:研制牛血清白蛋白(BSA)殘余量的檢測(cè)試劑盒,降低檢測(cè)成本。方法:采用ELISA法檢測(cè)BSA殘余量,確定該檢測(cè)方法的實(shí)驗(yàn)條件,并對(duì)該方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。同時(shí)對(duì)試劑盒的穩(wěn)定性進(jìn)行初步研究。結(jié)果:確定了ELISA檢測(cè)方法的實(shí)驗(yàn)條件,并進(jìn)行了專屬性、重復(fù)性、線性、檢測(cè)范圍等研究。初步穩(wěn)定性研究顯示,添加了穩(wěn)定劑Procline300的BSA標(biāo)準(zhǔn)品可保存1個(gè)月。結(jié)論:建立了ELISA檢測(cè)BSA殘余量的方法,該方法具有重復(fù)性好,穩(wěn)定性高,專屬性強(qiáng)等特點(diǎn)。
【圖文】：

檢測(cè)其 OD 值。1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表 2：BSA 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)品及待標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)品 OD 值 方程 R2及濃度0ng/ml0.095y = 0.0231x + 0.053R2= 0.99375ng/ml0.13510ng/ml0.26420ng/ml0.52140ng/ml0.98550ng/ml1.151 47.53ng/ml50ng/ml1.221 50.56ng/ml50ng/ml1.185 49.00ng/ml

靜置應(yīng)不少于 20s。每次洗滌均需拍干。。（10）顯色：每孔加入 TMB 顯色液 50ul，置室溫（20-25 攝氏度）反應(yīng)15min。（11）終止：加終止液 50ul/孔，，輕柔震蕩 5 s 混勻。（12）讀板：記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果并保存，在 10min 內(nèi)用多功能酶標(biāo)儀于 450nm測(cè)其 OD 值。2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表 12：檢測(cè)范圍實(shí)驗(yàn)結(jié)果 濃度 0ng/ml 3.125ng/ml 6.25ng/ml 12.5ng/ml 25ng/ml 50ng/ml 100ng/ml 值 0.102 0.156 0.189 0.397 0.762 1.281 1.562根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行線性方程擬合（1）當(dāng)采用 0-50ng/ml 時(shí) R2 為 0.9927，符合 ELISA 檢測(cè)的技術(shù)要求，故法的檢測(cè)限將采用 0-50ng/ml
【學(xué)位授予單位】：湖北科技學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R945

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本文編號(hào)：2606508