【摘要】：目的:抗菌藥耐藥已成為糖尿病足潰瘍感染結(jié)局最重要的決定因素之一。光動(dòng)力抗菌療法(Photodynamic antimicrobial chemotherapy,PACT)已經(jīng)被提出作為滅活細(xì)菌尤其耐藥菌的有效替代方法。本研究旨在探討通過(guò)光敏劑吲哚菁綠(Indocyanine green,ICG)聯(lián)合乙二胺四乙酸(Ethylenediamine tetraacetate,EDTA)介導(dǎo)光動(dòng)力抗菌療法協(xié)同抗菌藥對(duì)糖尿病足潰瘍常見(jiàn)致病菌金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌的體外協(xié)同殺菌作用及對(duì)其耐藥菌生物膜破壞作用。方法:選取糖尿病足感染常見(jiàn)病原菌金黃色葡萄球菌及銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)菌株、和耐藥金黃色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和銅綠假單胞菌(Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa,MRPA)為研究對(duì)象,分別與ICG和(或)EDTA一起孵育培養(yǎng),然后激光輻照處理。計(jì)數(shù)菌落形成單位(Colony forming units,CFU)以估計(jì)殺菌效果。MRSA、MRPA經(jīng)ICG聯(lián)合EDTA介導(dǎo)光動(dòng)力作用后,采用紙片擴(kuò)散法和微量肉湯稀釋法檢測(cè)MRSA和MRPA的抗菌藥物敏感性。微量肉湯稀釋法檢測(cè)MRSA和MRPA的最低生物膜抑制濃度(Minimum biofilm inhibitory concentration,MBIC)。激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)PACT協(xié)同抗菌藥處理后生物膜的形態(tài)結(jié)構(gòu),刃天青法檢測(cè)生物膜中細(xì)菌的代謝活性。結(jié)果:與ICG介導(dǎo)PACT相比,ICG聯(lián)合EDTA介導(dǎo)的PACT對(duì)金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌能明顯減少CFU數(shù)量,具有更加明顯的殺菌作用,而且銅綠假單胞菌比金黃色葡萄球菌對(duì)ICG聯(lián)合EDTA介導(dǎo)的PACT更加敏感。經(jīng)過(guò)PACT后,MRSA和MRPA對(duì)其藥敏實(shí)驗(yàn)藥物MIC顯著降低,MRSA和MRPA的MBIC分別降低到原來(lái)的四分之一。此外,PACT聯(lián)合抗菌藥處理能顯著地殺滅生物膜細(xì)菌、破壞生物膜結(jié)構(gòu)、降低生物膜細(xì)菌代謝活性。結(jié)論:光敏劑ICG聯(lián)合EDTA介導(dǎo)PACT能夠?qū)μ悄虿∽愀腥镜某Ｒ?jiàn)病原菌金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌產(chǎn)生顯著的滅活作用,而革蘭氏染色陰性細(xì)菌比革蘭氏染色陽(yáng)性細(xì)菌更敏感。ICG聯(lián)合EDTA介導(dǎo)的PACT聯(lián)合抗菌藥物可以協(xié)同增強(qiáng)耐藥菌的殺滅作用、常用抗菌藥物的敏感性和生物膜結(jié)構(gòu)的破壞作用。該結(jié)果有望為糖尿病足潰瘍耐藥菌感染患者提供一種替代治療方法。
【圖文】：

圖 1.1 四株細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線Fig. 1.1 Growth curve of four strains of bacteria.reviations: MRSA, methicillin-resistant Staphylococcus aureus; MRPmultidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa.圖 1.2 MRSA 和 MRPA 的生物膜生成Fig. 1.2 Biofilm production of MRSA and MRPA.

圖 1.1 四株細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線Fig. 1.1 Growth curve of four strains of bacteria.iations: MRSA, methicillin-resistant Staphylococcus aureusmultidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R96

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