【摘要】：共聚物聚乙二醇-聚(己內(nèi)酯)(mPEG-PCL)可以在水中自組裝成為膠束,由于其生物相容性和可降解性,被廣泛應(yīng)用到藥物遞送系統(tǒng)的研究中。PCL疏水鏈段是無(wú)定形態(tài)和結(jié)晶形態(tài)共存,作為聚合物膠束的疏水內(nèi)核可以達(dá)到比較客觀的載藥量。為了研究不同疏水段鏈長(zhǎng)度以及比例對(duì)載藥膠束遞送系統(tǒng)的影響,合成了四個(gè)相對(duì)分子質(zhì)量不同的高分子聚合物,分別為mPEG5000-PCL1000,mPEG5000-PCL3000,mPEG5000-PCL5000,mPEG5000-PCL8000。制備了聚合物膠束并研究其理化性質(zhì)�？疾炝溯d阿霉素藥物膠束的體外抗腫瘤活性。制備三維肝癌腫瘤球模型和裸鼠原位肝腫瘤模型,考察了材料的腫瘤穿透性。mPEG-PCL共聚物是以聚己內(nèi)酯單甲醚作為引發(fā)劑,辛酸亞錫為催化劑通過(guò)陰離子聚合的方法合成的。聚合產(chǎn)物的分子量可以通過(guò)單體和引發(fā)劑的比例進(jìn)行控制,采用核磁共振(1H NMR)和凝膠滲透色譜(GPC)表征合成目標(biāo)共聚物分子量和分子組成;通過(guò)溶劑揮發(fā)法制備四種聚合物膠束,考察了不同疏水嵌段長(zhǎng)度對(duì)膠束粒徑的影響;采用透射電鏡(TEM)表征了膠束的形貌特征;以阿霉素(DOX)為藥物,透析法制備載藥膠束,通過(guò)體外藥物釋放試驗(yàn)?zāi)M阿霉素即時(shí)釋放的特性;CCK8法考察mPEG-PCL膠束對(duì)人靜脈內(nèi)皮HUVEC細(xì)胞和肝癌Hep G2細(xì)胞的毒性;還考察了載阿霉素藥物mPEG-PCL膠束對(duì)肝癌Hep G2細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用;構(gòu)建了肝癌Hep G2細(xì)胞腫瘤球模型,通過(guò)激光共聚焦顯微鏡觀察四種載藥膠束在腫瘤球內(nèi)和單層細(xì)胞的分布,觀察到單層細(xì)胞對(duì)藥物的攝取情況,通過(guò)比較腫瘤球內(nèi)DOX熒光強(qiáng)度定性的模擬了藥物在腫瘤中滲透的情況。將肝癌Hep G2細(xì)胞接種于BALB/c裸鼠皮下,形成皮下移植瘤后再移植到裸鼠肝內(nèi),尾靜脈注射載熒光膠束,通過(guò)小動(dòng)物活體成像觀察藥物的分布。結(jié)果表明mPEG-PCL成功合成,所合成的聚合物分子量與設(shè)計(jì)分子量相符;激光動(dòng)態(tài)光散射(DLS)測(cè)定四種膠束粒徑均小于100nm,隨著共聚物疏水鏈的增加粒徑逐漸增大。電鏡照片可以清晰的看出空白膠束呈圓球形,且大小分布均勻。PCL疏水鏈段越長(zhǎng)的共聚物降解越緩慢,增加抗腫瘤藥物穩(wěn)定性,在體內(nèi)可以實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)循環(huán);細(xì)胞存活率都在90%以上,表明材料生物相容性好。四種載藥膠束對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)均有明顯抑制作用,IC50與釋放曲線吻合。比較加入載藥膠束4h后單層細(xì)胞和三維腫瘤球的熒光強(qiáng)度,膠束被細(xì)胞內(nèi)吞然后釋放藥物發(fā)揮作用,載體將藥物運(yùn)載至腫瘤細(xì)胞并且一部分已經(jīng)釋放入核。相比較單層細(xì)胞,腫瘤球同一種化療藥物敏感性差,與人體內(nèi)環(huán)境下藥物的治療情況相似。相同的培養(yǎng)時(shí)間和藥物濃度,mPEG5000-PCL5000更容易穿透腫瘤球模型。說(shuō)明尺寸為80-100nm的粒子有更好的腫瘤球穿透性。裸鼠肝癌原位移植模型構(gòu)建成功率高,尾靜脈注射載近紅外染料卟啉的mPEG5000-PCL5000和mPEG5000-PCL8000聚合物膠束后用小動(dòng)物成像系統(tǒng)掃描熒光,體內(nèi)體外腫瘤穿透試驗(yàn)顯示載藥mPEG5000-PCL5000聚合物膠束有較好的透過(guò)實(shí)體腫瘤的效果。因此,高分子聚合物通過(guò)控制合適的親疏水鏈長(zhǎng)和比例,可作為疏水性抗癌藥物的良好載體,控制載體粒徑的大小的有利于穿透腫瘤模型,為后續(xù)納米膠束設(shè)計(jì)提供一定依據(jù)。
【圖文】：

第一部分 兩親性膠束聚合物 mPEG-PCL 的合成及其理化性質(zhì)研究2 實(shí)驗(yàn)方法2.1 不同疏水鏈段 mPEG-PCL 兩嵌段共聚物的合成我們通過(guò)陰離子聚合的方法合成疏水鏈段比例不同的 mPEG-PCL，得到四個(gè)兩親性分子，即 mPEG5000-PCL1000，mPEG5000-PCL3000， mPEG5000-PCL5000 和mPEG5000-PCL8000。

第一部分 兩親性膠束聚合物 mPEG-PCL 的合成及其理化性質(zhì)研究收值，，從而得到一系列熒光吸收強(qiáng)度值。依照阿霉素的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算每個(gè)時(shí)間點(diǎn)下載藥膠束釋放的阿霉素的濃度，從而換算出整體的累積釋放量，每個(gè)釋放的樣品都有三個(gè)平行樣實(shí)驗(yàn)。最后數(shù)據(jù)平均化處理得到了時(shí)間與累積釋放量的關(guān)系圖。3 結(jié)果3.1 不同疏水鏈段 mPEG-PCL 兩嵌段共聚物的合成
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R943

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2528318