【摘要】：共聚物聚乙二醇-聚(己內酯)(mPEG-PCL)可以在水中自組裝成為膠束,由于其生物相容性和可降解性,被廣泛應用到藥物遞送系統(tǒng)的研究中。PCL疏水鏈段是無定形態(tài)和結晶形態(tài)共存,作為聚合物膠束的疏水內核可以達到比較客觀的載藥量。為了研究不同疏水段鏈長度以及比例對載藥膠束遞送系統(tǒng)的影響,合成了四個相對分子質量不同的高分子聚合物,分別為mPEG5000-PCL1000,mPEG5000-PCL3000,mPEG5000-PCL5000,mPEG5000-PCL8000。制備了聚合物膠束并研究其理化性質。考察了載阿霉素藥物膠束的體外抗腫瘤活性。制備三維肝癌腫瘤球模型和裸鼠原位肝腫瘤模型,考察了材料的腫瘤穿透性。mPEG-PCL共聚物是以聚己內酯單甲醚作為引發(fā)劑,辛酸亞錫為催化劑通過陰離子聚合的方法合成的。聚合產物的分子量可以通過單體和引發(fā)劑的比例進行控制,采用核磁共振(1H NMR)和凝膠滲透色譜(GPC)表征合成目標共聚物分子量和分子組成;通過溶劑揮發(fā)法制備四種聚合物膠束,考察了不同疏水嵌段長度對膠束粒徑的影響;采用透射電鏡(TEM)表征了膠束的形貌特征;以阿霉素(DOX)為藥物,透析法制備載藥膠束,通過體外藥物釋放試驗模擬阿霉素即時釋放的特性;CCK8法考察mPEG-PCL膠束對人靜脈內皮HUVEC細胞和肝癌Hep G2細胞的毒性;還考察了載阿霉素藥物mPEG-PCL膠束對肝癌Hep G2細胞的生長抑制作用;構建了肝癌Hep G2細胞腫瘤球模型,通過激光共聚焦顯微鏡觀察四種載藥膠束在腫瘤球內和單層細胞的分布,觀察到單層細胞對藥物的攝取情況,通過比較腫瘤球內DOX熒光強度定性的模擬了藥物在腫瘤中滲透的情況。將肝癌Hep G2細胞接種于BALB/c裸鼠皮下,形成皮下移植瘤后再移植到裸鼠肝內,尾靜脈注射載熒光膠束,通過小動物活體成像觀察藥物的分布。結果表明mPEG-PCL成功合成,所合成的聚合物分子量與設計分子量相符;激光動態(tài)光散射(DLS)測定四種膠束粒徑均小于100nm,隨著共聚物疏水鏈的增加粒徑逐漸增大。電鏡照片可以清晰的看出空白膠束呈圓球形,且大小分布均勻。PCL疏水鏈段越長的共聚物降解越緩慢,增加抗腫瘤藥物穩(wěn)定性,在體內可以實現(xiàn)長循環(huán);細胞存活率都在90%以上,表明材料生物相容性好。四種載藥膠束對癌細胞生長均有明顯抑制作用,IC50與釋放曲線吻合。比較加入載藥膠束4h后單層細胞和三維腫瘤球的熒光強度,膠束被細胞內吞然后釋放藥物發(fā)揮作用,載體將藥物運載至腫瘤細胞并且一部分已經釋放入核。相比較單層細胞,腫瘤球同一種化療藥物敏感性差,與人體內環(huán)境下藥物的治療情況相似。相同的培養(yǎng)時間和藥物濃度,mPEG5000-PCL5000更容易穿透腫瘤球模型。說明尺寸為80-100nm的粒子有更好的腫瘤球穿透性。裸鼠肝癌原位移植模型構建成功率高,尾靜脈注射載近紅外染料卟啉的mPEG5000-PCL5000和mPEG5000-PCL8000聚合物膠束后用小動物成像系統(tǒng)掃描熒光,體內體外腫瘤穿透試驗顯示載藥mPEG5000-PCL5000聚合物膠束有較好的透過實體腫瘤的效果。因此,高分子聚合物通過控制合適的親疏水鏈長和比例,可作為疏水性抗癌藥物的良好載體,控制載體粒徑的大小的有利于穿透腫瘤模型,為后續(xù)納米膠束設計提供一定依據。
【圖文】：

第一部分 兩親性膠束聚合物 mPEG-PCL 的合成及其理化性質研究2 實驗方法2.1 不同疏水鏈段 mPEG-PCL 兩嵌段共聚物的合成我們通過陰離子聚合的方法合成疏水鏈段比例不同的 mPEG-PCL，得到四個兩親性分子，即 mPEG5000-PCL1000，mPEG5000-PCL3000， mPEG5000-PCL5000 和mPEG5000-PCL8000。

第一部分 兩親性膠束聚合物 mPEG-PCL 的合成及其理化性質研究收值，，從而得到一系列熒光吸收強度值。依照阿霉素的標準曲線，計算每個時間點下載藥膠束釋放的阿霉素的濃度，從而換算出整體的累積釋放量，每個釋放的樣品都有三個平行樣實驗。最后數(shù)據平均化處理得到了時間與累積釋放量的關系圖。3 結果3.1 不同疏水鏈段 mPEG-PCL 兩嵌段共聚物的合成
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R943

【參考文獻】

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本文編號：2528318