【摘要】：目的:建立人肺腺癌A549細胞紫外氧化損傷的模型,通過依達拉奉對該紫外氧化損傷模型的處理,探討依達拉奉對人肺腺癌A549細胞抗氧化損傷的作用。方法:1.將不同照射劑量的紫外線UVC分組(UVC0組:0J/m2,UVC1組:10J/m2,UVC2組:20J/m2,UVC3組:40J/m2,UVC4組:80J/m2),分別照射人肺腺癌A549細胞,用MTT法測定各組的細胞存活率,從而確定A549細胞紫外氧化損傷模型的紫外線照射劑量。2.將不同濃度的依達拉奉溶液組(Eda0組:0μmol/l,Eda1組:10μmol/l,Eda2組:20μmol/l,Eda3組:40μmol/l,Eda4組:80μmol/l),分別對經紫外照射損傷的A549細胞的培養(yǎng),通過MTT法測定各組細胞的增殖率,以確定最佳的依達拉奉濃度。3.將確定的紫外損傷劑量和依達拉奉的最佳濃度進行細胞實驗,檢測A549細胞的氧化損傷程度。將實驗細胞分組:空白對照組(空白組),紫外損傷組(UVC組),紫外損傷+依達拉奉組(UVC+Eda組),采用紫外-可見分光光度計測定細胞中的氧化指標丙二醛(MDA)的含量、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)的活性、超氧化物歧化酶(SOD)的活性。4.用彗星實驗檢測加入最佳濃度的依達拉奉對不同劑量紫外氧化損傷的A549細胞DNA的影響,分為A組(不同劑量UVC組)和B組(不同劑量UVC+依達拉奉組)。結果:1.隨著紫外線照射劑量的增加,各組細胞的存活率均呈下降的趨勢,經MTT試驗,確定進行紫外線照射的劑量為40J/m2。2.不同濃度的依達拉奉對經紫外線照射損傷的A549細胞增殖率均有改善,Eda3組細胞的增殖率最大,確定最佳依達拉奉濃度為40μmol/l。3.肺腺癌A549細胞抗氧化指標測定:UVC組與UVC+Eda組的MDA含量均高于空白組,而UVC組與UVC+Eda組的SOD活性及GSH-PX活性均低于空白組;UVC+Eda組的MDA含量低于UVC組,UVC+Eda組的SOD活性及GSH-PX活性均高于UVC組,其差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。表明依達拉奉對A549細胞的抗氧化指標具有明顯的改善作用。4.紫外線照射會造成細胞DNA的損傷,照射劑量越大,DNA的損傷越大,當紫外線照射劑量≤40J/m2時,B組的DNA損傷率低于A組,其差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:成功建立A549細胞紫外線氧化損傷模型;依達拉奉對紫外線引起的人肺腺癌A549細胞氧化損傷具有顯著的抗氧化作用。
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R96

【參考文獻】

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1 賈舒;尹琳;;尿激酶聯(lián)合依達拉奉治療新發(fā)腦梗死臨床觀察[J];中國實用神經疾病雜志;2011年12期

2 曹文英;谷雄榮;唐惠祥;李湘橙;;依達拉奉聯(lián)合低分子肝素治療急性進展性腦梗死86例臨床觀察[J];中國當代醫(yī)藥;2011年11期

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1 牛丕業(yè);熱休克蛋白70在紫外線致DNA損傷修復中的作用[D];華中科技大學;2006年

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本文編號：2528369