【摘要】：背景： 臨床上高脂血癥患者常用阿托伐他汀與阿昔莫司聯(lián)合治療。兩藥均為口服給藥，其療效與胃腸道吸收程度密切相關(guān)。研究資料業(yè)已表明P-gp外排作用會(huì)明顯影響口服藥物的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)吸收，故明確P-gp對(duì)兩藥攝取的影響極為關(guān)鍵。阿托伐他汀是P-gp的底物已有報(bào)道，然而阿昔莫司以何種形式跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)及其吸收是否受P-gp外排影響卻知之甚少。倘若阿昔莫司與阿托伐他汀合用在P-gp水平的競(jìng)爭(zhēng)，擬或抑制，導(dǎo)致攝取轉(zhuǎn)運(yùn)的改變，則可能因發(fā)生兩者間藥代動(dòng)力學(xué)相互作用而改變療效。因此，有必要研究阿昔莫司的攝取轉(zhuǎn)運(yùn)與P-gp的關(guān)聯(lián)，進(jìn)一步從體內(nèi)試驗(yàn)探究MDR1Exon26多態(tài)性對(duì)阿托伐他汀與阿昔莫司聯(lián)用的影響，為闡明二者聯(lián)用是否會(huì)產(chǎn)生基于P-gp介導(dǎo)的藥代動(dòng)力學(xué)方面的相互作用提供試驗(yàn)依據(jù)。 目的： 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立Caco-2細(xì)胞單層模型，以驗(yàn)證阿托伐他汀與P-gp的關(guān)聯(lián)、明確阿昔莫司的攝取轉(zhuǎn)運(yùn)方式及其機(jī)制，在此基礎(chǔ)上分析合用阿托伐他汀與阿昔莫司后是否對(duì)彼此攝取有影響。再通過(guò)臨床試驗(yàn)進(jìn)一步明確阿托伐他汀與阿昔莫司聯(lián)用時(shí)，MDR1Exon26多態(tài)性對(duì)人體藥代動(dòng)力學(xué)特征的影響。 方法： 1．建立Caco-2單層細(xì)胞模型，并考察其完整性及緊密性； 2．考察時(shí)間、藥物濃度及PH值對(duì)Caco-2細(xì)胞攝取阿托伐他汀、阿昔莫司的影響，通過(guò)藥物在Caco-2細(xì)胞模型中的轉(zhuǎn)運(yùn)試驗(yàn)，研究阿托伐他汀、阿昔莫司的轉(zhuǎn)運(yùn)是否由P-gp介導(dǎo)； 3．17名受試者單次口服阿托伐他汀20mg與阿昔莫司500mg，采集0-72h系列血樣，分別利用LC-MS-MS、HPLC法測(cè)定阿托伐他汀、阿昔莫司的血藥濃度，應(yīng)用DAS2.1軟件計(jì)算其藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)； 4．采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)的方法對(duì)17名受試者的空白全血進(jìn)行MDR1Exon26基因分型，根據(jù)不同基因型，，采用單因素方差分析，比較CC、CT、TT組間藥代動(dòng)力學(xué)特征之間的差異。 結(jié)果： 1.于鏡下觀察Caco-2細(xì)胞生長(zhǎng)良好，邊界清晰；跨膜電阻隨著培養(yǎng)時(shí)間增加亦隨之增大，于22天后其值在500-600Ω·cm2；第3天未檢測(cè)到堿性磷酸酶，第15、21天已具有堿性磷酸酶活性，最后活力比(AP/BL)達(dá)4.3倍，出現(xiàn)了明顯的極化現(xiàn)象，綜上三個(gè)指標(biāo)提示該模型可用于下一步的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)試驗(yàn)。 2.阿托伐他汀、阿昔莫司的攝取與時(shí)間、藥物濃度有關(guān)，而Hanks培養(yǎng)液的PH值對(duì)其無(wú)影響。在Caco-2細(xì)胞模型中，阿托伐他汀吸收表觀滲透系數(shù)PappAP-BL為2.58×10-7cm·sec-，P-gp抑制劑維拉帕米與之合用后，PappAP-BL值明顯升高，其表觀滲透率PDR由2.65下降到1.19，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；阿昔莫司的PDR為1.27，在加入不同濃度維拉帕米組（20、40、60M）后，對(duì)其PappAP-BL、PDR均無(wú)明顯影響，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。提示阿托伐他汀是P-gp的底物，阿昔莫司的攝取轉(zhuǎn)運(yùn)沒(méi)有P-gp介導(dǎo)。 3.阿托伐他汀的藥代動(dòng)力學(xué)特征如下：AUC0-t、AUC0-∞、Cmax其值分別為47.86±18.48g/L·h、49.11±18.55g/L·h、9.11±4.55g/L，tmax為0.52±0.27h，反映藥物吸收迅速完全；Vz/F為7130.26±4118.04L提示該藥分布廣泛；t1/2為10.29±2.08h、CLz/F為473.24±208.53L/h，提示藥物消除慢，在體內(nèi)有效血藥濃度維持時(shí)間長(zhǎng)。阿昔莫司吸收迅速完全：AUC0-t為21.89±5.46mg/L·h，AUC0-∞為22.14±5.52mg/L·h，Cmax為6.16±1.76mg/L，tmax為1.54±0.55h；主要分布在細(xì)胞外液，Vz/F為51.93±15.42L；該藥在體內(nèi)消除很快，其t1/2為1.50±0.12h，CLz/F為24.04±6.50L/h。 4.17名受試者M(jìn)DR1Exon26基因分型結(jié)果顯示：野生型3435CC有5名，突變型雜合子3435CT、突變型純合子3435TT均有6名。 5. MDR1基因多態(tài)性對(duì)阿托伐他汀的藥代動(dòng)力學(xué)吸收特征有影響，其中MDR1CC、CT、TT組阿托伐他汀AUC0-∞分別為60.83、47.5、37.4g/L·h；AUC0-t分別為61.918、48.56、38.99g/L·h，且CC與TT組間比較其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05）。 6.根據(jù)TT、CT、CC不同基因型組對(duì)阿昔莫司主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)進(jìn)行對(duì)比分析，由單因素方差分析比較得出阿昔莫司主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)AUC0-t、AUC0-∞、Cmax、Vz/F、t1/2、CLz/F在各處理組間差異影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P0.05）；通過(guò)多樣本比較秩和檢驗(yàn)得出tmax在TT、CC、與CT個(gè)體各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論： 藥物轉(zhuǎn)運(yùn)試驗(yàn)證實(shí)了阿托伐他汀是P-gp的底物，明確了阿昔莫司的攝取轉(zhuǎn)運(yùn)以被動(dòng)擴(kuò)散形式為主，且阿昔莫司不是P-gp的底物。體內(nèi)試驗(yàn)提示兩藥合用時(shí)MDR1Exon26基因多態(tài)性對(duì)阿托伐他汀的吸收特征產(chǎn)生了影響，而對(duì)阿昔莫司無(wú)影響，以上結(jié)果表明二者聯(lián)用不會(huì)發(fā)生由P-gp介導(dǎo)的藥物相互作用。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R969.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 關(guān)溯,趙立子,陳杰,陳孝,黃民;Caco-2細(xì)胞模型的建立及意義[J];山東醫(yī)藥;2005年26期

2 仝其廣;胡大一;;他汀類藥物的安全性問(wèn)題[J];中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志;2007年09期

本文編號(hào)：2522810