【摘要】：目的構(gòu)建系統(tǒng)的斑馬魚血管內(nèi)脂代謝的研究方法。方法利用油紅O染色、熒光探針標(biāo)記、直接血脂檢測等方法研究斑馬魚胚胎、幼魚、成魚等不同發(fā)育時期血管內(nèi)的脂質(zhì)代謝,以及不同飲食對斑馬魚血脂的影響。結(jié)果油紅可將斑馬魚胚胎血管內(nèi)的脂質(zhì)染色,熒光探針可熒光標(biāo)記斑馬魚胚胎血管內(nèi)的膽固醇。喂食蛋黃液可升高斑馬魚幼魚的血脂水平,油紅O染色可反映這種血脂的變化。高膽固醇飲食可升高斑馬魚幼魚血管內(nèi)膽固醇水平,熒光探針可標(biāo)記幼魚血管內(nèi)膽固醇的變化。血脂檢測顯示高脂飲食的斑馬魚血清總膽固醇和甘油三酯均高于普通飲食的斑馬魚。結(jié)論本研究利用油紅O染色、熒光探針標(biāo)記及血脂檢測等技術(shù)構(gòu)建了斑馬魚不同發(fā)育階段血管內(nèi)脂代謝的研究方法。
【圖文】：

圖1．斑馬魚胚胎油紅O染色及542/563C11熒光標(biāo)記結(jié)果A為受精后4天casper品系斑馬魚胚胎;B為受精后4天fli1:EGFP品系斑馬魚全身血管分布;C、D為受精后4天斑馬魚油紅O染色結(jié)果，C軀干部放大后為D，箭頭所示為血管內(nèi)被染色的脂質(zhì);E、F為542/563C11標(biāo)記受精后4天斑馬魚血管內(nèi)膽固醇，E軀干部放大后為F，箭頭所示為血管內(nèi)被熒光標(biāo)記的膽固醇。A、B、C、E放大30倍，D、F放大100倍。Figure1．TheoilredOstainingandfluorescentprobelabelingforzebrafishembryo圖2．油紅O染色觀察高脂飲食后斑馬魚幼魚血脂水平的變化A、B為未進食的受精后7天斑馬魚幼魚油紅O染色結(jié)果;C、D為受精后6天幼魚在蛋黃液中飼養(yǎng)24h后油紅O染色結(jié)果;E、F為受精后5天幼魚在蛋黃液中飼養(yǎng)48h后油紅O染色結(jié)果;G、H為受精后5天幼魚在蛋黃液中飼養(yǎng)72h后油紅O染色結(jié)果;I為各組IOD值比較。a為P＜0．001，與24h組比較。箭頭所示為幼魚血管內(nèi)被油紅O染色的脂質(zhì)。A、C、E、G放大30倍，B、D、F、H放大100倍。Figure2．EffectofhighfatdietonzebrafishintravascularlipidsviaoilredOstaining400ISSN1007-3949ChinJArterioscler，Vol25，No4，2017

圖1．斑馬魚胚胎油紅O染色及542/563C11熒光標(biāo)記結(jié)果A為受精后4天casper品系斑馬魚胚胎;B為受精后4天fli1:EGFP品系斑馬魚全身血管分布;C、D為受精后4天斑馬魚油紅O染色結(jié)果，C軀干部放大后為D，箭頭所示為血管內(nèi)被染色的脂質(zhì);E、F為542/563C11標(biāo)記受精后4天斑馬魚血管內(nèi)膽固醇，E軀干部放大后為F，箭頭所示為血管內(nèi)被熒光標(biāo)記的膽固醇。A、B、C、E放大30倍，，D、F放大100倍。Figure1．TheoilredOstainingandfluorescentprobelabelingforzebrafishembryo圖2．油紅O染色觀察高脂飲食后斑馬魚幼魚血脂水平的變化A、B為未進食的受精后7天斑馬魚幼魚油紅O染色結(jié)果;C、D為受精后6天幼魚在蛋黃液中飼養(yǎng)24h后油紅O染色結(jié)果;E、F為受精后5天幼魚在蛋黃液中飼養(yǎng)48h后油紅O染色結(jié)果;G、H為受精后5天幼魚在蛋黃液中飼養(yǎng)72h后油紅O染色結(jié)果;I為各組IOD值比較。a為P＜0．001，與24h組比較。箭頭所示為幼魚血管內(nèi)被油紅O染色的脂質(zhì)。A、C、E、G放大30倍，B、D、F、H放大100倍。Figure2．EffectofhighfatdietonzebrafishintravascularlipidsviaoilredOstaining400ISSN1007-3949ChinJArterioscler，Vol25，No4，2017
【作者單位】： 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助(81500331) 上海市進一步加快中醫(yī)藥事業(yè)發(fā)展三年行動計劃(2014年-2016年)資助(ZY3-CCCX-3-3002)
【分類號】：R96

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本文編號：2522276