【摘要】：目的探討煙草特有亞硝胺NNK和雜環(huán)胺AαC的遺傳毒性,對(duì)γH2AX焦點(diǎn)與微核分析結(jié)果進(jìn)行比較。方法以0、25、50、100、200和400μg/ml的NNK,0、2.5、5、10、20和40μg/ml的AαC分別染毒中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO細(xì)胞)24 h后,采用MTT試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞存活率,采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)NNK和AαC各劑量誘導(dǎo)的γH2AX焦點(diǎn)率和微核率,并比較γH2AX焦點(diǎn)率與微核率的差異。結(jié)果NNK各劑量的γH2AX焦點(diǎn)率分別為:(1.98±0.15)%、(2.28±0.04)%、(2.86±0.13)%、(3.14±0.09)%、(3.88±0.21)%和(4.34±0.20)%。與陰性對(duì)照相比,NNK劑量為25μg/ml時(shí),γH2AX焦點(diǎn)率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。AαC各劑量的γH2AX焦點(diǎn)率分別為:(3.81±0.15)%、(3.24±0.25)%、(3.47±0.21)%、(3.90±0.14)%、(6.12±0.14)%和(11.98±0.24)%。與陰性對(duì)照相比,AαC劑量為10μg/ml時(shí)γH2AX焦點(diǎn)率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。NNK各劑量的微核率分別為:(1.50±0.22)%、(1.76±0.44)%、(3.26±0.27)%、(4.01±0.88)%、(7.50±0.70)%和(14.67±1.08)%;與陰性對(duì)照相比,NNK劑量為50μg/ml時(shí)微核率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。AαC各劑量微核率分別為:(1.42±0.50)%、(1.47±0.43)%、(1.42±0.35)%、(1.88±0.15)%、(5.88±1.15)%和(10.67±1.82)%。與陰性對(duì)照相比,AαC劑量為20μg/ml時(shí)微核率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論一定劑量的NNK和AαC可以誘發(fā)體外遺傳毒性;與流式微核方法相比,流式γH2AX方法靈敏度更高。
[Abstract]:Objective to investigate the genotoxicity of tobacco specific nitrosamine NNK and heterocycloamines A 偽 C, and to compare the results of gamma H2AX focus with micronucleus analysis. Methods Chinese hamster ovarian cells (CHO cells) were exposed to NNK,0,2.5,5,10,20 of 0, 25, 50100200 and 400 渭 g / ml and A 偽 C of 40 渭 g / ml for 24 h, respectively. the survival rate of Chinese hamster ovarian cells was detected by MTT assay. The focal point rate and micronucleus rate of 緯 H2AX induced by NNK and A 偽 C were detected by flow cytometry, and the difference between focal point rate and micronucleus rate of 緯 H2AX was compared. Results the focal point rates of NNK were (1.98 鹵0. 15)%, (2. 28 鹵0. 04)%, (2. 86 鹵0. 13)%, (3. 14 鹵0. 09)%, (3. 88 鹵0. 21)% and (4. 34 鹵0. 20)%, respectively. Compared with the negative control, when the dose of NNK was 25 渭 g / ml, the focal point rate of 緯 H2AX was significantly different (P 0.05). The focal point rate of 緯 H2AX at each dose of A 偽 C was (3.81 鹵0.15)%, (3.24 鹵0.25)%, (3.47 鹵0.21)%, respectively. (3.90 鹵0.14)%, (6.12 鹵0.14)% and (11.98 鹵0.24)%. Compared with the negative control, there was significant difference in the focal point rate of 緯 H2AX when the dose of A 偽 C was 10 渭 g / ml (P 0.05). The micronucleus rate of each dose of NNK was (1.50 鹵0.22)%, (1.76 鹵0.44)% and (3.26 鹵0.27)%, respectively. (4.01 鹵0.88)%, (7.50 鹵0.70)% and (14.67 鹵1.08)%; Compared with the negative control, there was significant difference in micronucleus rate when the dose of NNK was 50 渭 g / ml (P 0.05). The micronucleus rate of each dose of A 偽 C was (1.42 鹵0.50)%, (1.47 鹵0.43)%, (1.42 鹵0.35)%, respectively. (1.88 鹵0.15)%, (5.88 鹵1.15)% and (10.67 鹵1.82)%. Compared with the negative control, there was significant difference in micronucleus rate when the dose of A 偽 C was 20 渭 g / ml (P 0.05). Conclusion certain doses of NNK and A 偽 C can induce genotoxicity in vitro, and the sensitivity of flow gamma H2AX method is higher than that of flow micronucleus method.
【作者單位】： 中國(guó)煙草總公司鄭州煙草研究院煙草化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所放射毒理與輻射衛(wèi)生防護(hù)研究室;上海煙草集團(tuán)北京卷煙廠;
【基金】：國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2012BAK01B03) 鄭州煙草研究院科技項(xiàng)目(322013CZ0600)
【分類(lèi)號(hào)】：R99

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本文編號(hào)：2486869