【摘要】：目的 近年來輸卵管感染的發(fā)病率居高不下,直接危害著人類的生殖健康,如何有效地及時(shí)治療并防止其后遺癥的發(fā)生是亟待解決的問題。天然免疫是機(jī)體抵御病原體感染的第一道防線,Toll樣受體是組成天然免疫的最重要的模式識(shí)別受體家族之一,是啟動(dòng)天然免疫反應(yīng)第一步的關(guān)鍵,其適度表達(dá)有利于病原體的清除,而表達(dá)過度或不足可能發(fā)生輸卵管炎癥病變。TLR2和TLR4在輸卵管組織中表達(dá),并且可與金黃色葡萄球菌的病原體相關(guān)模式分子結(jié)合,參與輸卵管炎的形成。傳統(tǒng)上認(rèn)為糖皮質(zhì)激素(GCs)可抑制免疫應(yīng)答、減弱機(jī)體抗感染能力,但GCs在臨床治療中的使用并未被普遍接受�？v然,目前抗生素能解決輸卵管感染的問題,但在很大程度上并不能改變炎癥對輸卵管組織的破壞。本研究擬通過比較低、中、高三組不同劑量地塞米松(DXM)、青霉素以及DXM+青霉素干預(yù)下,金黃色葡萄球菌致小鼠輸卵管炎組織中Toll樣受體2和4(TLR2、TLR4) mRNA的表達(dá)變化,了解DXM在輸卵管炎癥中的可能作用機(jī)制,并明確不同濃度DXM對炎癥反應(yīng)的調(diào)控,以期了解其對輸卵管炎癥愈后的影響,從而改善輸卵管炎癥的預(yù)后和生育結(jié)局。 方法 將35只小鼠隨機(jī)分成空白組、金黃色葡萄球菌組、1mg/kgDXM組、5mg/kgDXM組、10mg/kgDXM組、青霉素組、1mg/kgDXM+青霉素組共7組,每組5只；建立金黃色葡萄菌致小鼠輸卵管炎模型。空白組：不處理。金黃色葡萄球菌組：經(jīng)陰道-宮頸接種1×109/mL金黃色葡萄球菌懸液50ul,注入宮底。1mg/kgDXM組：接種方法同金葡菌組,3天后腹腔注射1mg/kgDXM,每天一次連續(xù)4天。5mg/kgDXM組：接種方法同金葡菌組,3天后腹腔注射5mg/kgDXM,每天一次連續(xù)4天。10mg/kgDXM組：接種方法同金葡菌組,3天后腹腔注射10mg/kgDXM,每天一次連續(xù)4天。青霉素組：接種方法同金葡菌組,3天后腹腔注射青霉素5萬單位,每天一次連續(xù)4天。1mg/kg DXM+青霉素組：接種方法同金葡菌組,3天后腹腔注射1mg/kgDXM和5萬單位青霉素,每天一次連續(xù)4天。通過組織病理學(xué)觀察輸卵管炎癥病變程度,Real-time PCR測定各組小鼠輸卵管組織中TLR2mRNA和TLR4mRNA的表達(dá)。病理學(xué)判斷輸卵管炎癥程度標(biāo)準(zhǔn)：“-”表示上皮細(xì)胞排列整齊,無明顯實(shí)質(zhì)性變性、壞死,纖毛豐富,管腔無狹窄,無結(jié)締組織增生、炎細(xì)胞浸潤；“+”表示上皮細(xì)胞呈立方狀或矮柱狀,纖毛增粗、部分消失,管腔少量粘連,結(jié)締組織少量增生,有少量炎細(xì)胞浸潤；“++”表示上皮細(xì)胞呈扁平狀,纖毛進(jìn)一步消失,管腔部分粘連,結(jié)締組織部分增生,有部分炎細(xì)胞浸潤；“+++”表示上皮細(xì)胞大量增生,管腔嚴(yán)重粘連,纖毛完全消失,結(jié)締組織顯著增生,大量炎細(xì)胞浸潤。結(jié)果 1.病理學(xué)觀察空白組：輸卵管管壁組織結(jié)構(gòu)清晰,管腔通暢,黏膜層可見排列整齊的上皮細(xì)胞,纖毛豐富。除DXM1+青霉素組外,其余實(shí)驗(yàn)組管腔不同程度的增厚、嚴(yán)重的有粘連,纖毛不同程度的脫落甚至消失,結(jié)締組織增生、炎細(xì)胞浸潤。本實(shí)驗(yàn)各組小鼠輸卵管病變程度表現(xiàn)為：10mg/kgDXM組5mg/kgDXM組1mg/kgDXM組金黃色葡萄球菌組青霉素組1mg/kgDXM+青霉素組。 2.RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)TLR2mRNA和TLR4mRNA在輸卵管炎組織中的表達(dá)有不同程度的升高。①TLR2mRNA的表達(dá)：金葡菌組表達(dá)顯著高于空白組(p0.05),1、5、10mg/kgDXM組和金葡菌組相比均達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),并隨著DXM劑量的減少,表達(dá)增高,1mg/kgDXM組表達(dá)最高。TLR2mRNA的表達(dá)量為：1mg/kgDXM組青霉素組5mg/kgDXM組金黃色葡萄球菌組10mg/kgDXM組1mg/kgDXM+青霉素組空白組。②TLR4mRNA的表達(dá)：金葡菌組表達(dá)略高于空白組,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。1mg/kgDXM組表達(dá)最高,1mg/kgDXM組、青霉素組與金黃色葡萄球菌組相比,均達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);1mg/kgDXM+青霉素組與金黃色葡萄球菌組相比無顯著差異(p0.05).TLR4mRNA表達(dá)量表現(xiàn)為1mg/kgDXM組5mg/kgDXM組1mg/kgDXM+青霉素組金黃色葡萄球菌組空白組10mg/kgDXM組青霉素組。結(jié)論 1、調(diào)節(jié)TLR2mRNA和TLR4mRNA的表達(dá)可能是DXM影響輸卵炎愈后的因素之一 2、青霉素聯(lián)合小劑量DXM能改善輸卵管炎癥的愈后。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R965

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本文編號(hào)：2373519