本文選題：雌激素相關受體α + 反向激動劑��； 參考：《中國新藥雜志》2015年03期

【摘要】：目的:建立一種篩選評價雌激素相關受體α(estrogen-related receptorα,ERRα)調節(jié)劑的細胞模型,并用于計算機輔助設計、人工合成的化合物樣品的評價。方法:用p CMV-h ERRα,3×ERRE-Luc及pRL-TK共同轉染人胚腎細胞HEK-293,加入陽性藥XCT790或篩選化合物孵育,分別檢測HEK-293中螢火蟲熒光素酶及海腎熒光素酶的活性,建立基于受體-應答元件的ERRα調節(jié)劑細胞篩選模型,用Z'因子評價本模型的穩(wěn)定性,并測試了83個化合物對ERRα轉錄調節(jié)活性。用CCK-8檢測DLE2-24對乳腺癌細胞MCF-7的增殖抑制效應,用RT-PCR考察DLE2-24對MCF-7中ERRα靶基因SOD2及VEGF的mRNA水平的影響。結果:成功建立ERRα-ERRE-Luc基因瞬時共轉染模型,陽性藥XCT790的IC50為0.24μmol·L-1,Z'因子為0.68,信號/本底為20.7。應用本模型篩選出15個ERRα反向調節(jié)劑。其中,DLE2-24劑量依賴性地抑制MCF-7的增殖,顯著下調了ERRα下游靶基因SOD2及VEGF的mRNA水平。結論:本研究成功建立了一種高效、可靠的ERRα調節(jié)劑細胞篩選模型,適用于ERRα調節(jié)劑的發(fā)現(xiàn)與評價。
[Abstract]:Aim: to establish a cell model for screening and evaluating estrogen related receptor 偽 estrogen-related receptor 偽 er 偽) modulators, and to evaluate the synthetic compounds by computer aided design (CAD). Methods: human embryonic kidney cells HEK-293 were co-transfected with p CMV-h ERR 偽 3 脳 ERRE-Luc and pRL-TK and incubated with positive drug XCT790 or screening compounds. The activities of luciferase and luciferase in HEK-293 were detected respectively. A cell screening model of ERR 偽 modulator based on receptor-response element was established. The stability of the model was evaluated by using Z' factor, and the transcriptional regulatory activity of 83 compounds to ERR 偽 was tested. The inhibitory effect of DLE2-24 on MCF-7 proliferation in breast cancer cells was detected by CCK-8, and the effect of DLE2-24 on ERR 偽 target gene SOD2 and mRNA level of VEGF in MCF-7 was investigated by RT-PCR. Results: the transient cotransfection model of ERR 偽 -ERRE-Luc gene was successfully established. The IC50 of positive drug XCT790 was 0.24 渭 mol L -1 Z' factor was 0.68, and the signal / background was 20.7. Fifteen ERR 偽 reverse modulators were screened by this model. DLE2-24 inhibited the proliferation of MCF-7 in a dose-dependent manner and significantly down-regulated the mRNA levels of ERR 偽 downstream target gene SOD2 and VEGF. Conclusion: a high efficient and reliable cell screening model of ERR 偽 modulator was established in this study, which is suitable for the discovery and evaluation of ERR 偽 modulator.
【作者單位】： 復旦大學附屬華山醫(yī)院臨床藥學室;復旦大學附屬華山醫(yī)院北院臨床藥學室;上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院藥械科;齊魯工業(yè)大學化工與制藥系;
【基金】：國家自然科學基金(81302853,81202389) 教育部“高校博士點”基金(20110071120071)
【分類號】：R965.1

【參考文獻】

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本文編號：1911863