本文關(guān)鍵詞：TRPV1離子通道與中藥辛味藥性的關(guān)系研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》 2015年

新型ABCA1、SR-BI/CLA-1表達(dá)上調(diào)劑的抗動(dòng)脈粥樣硬化活性及其作用靶標(biāo)發(fā)現(xiàn)研究

王瀟  

【摘要】：心血管疾病在發(fā)達(dá)國(guó)家和大多數(shù)發(fā)展中國(guó)家是危害人類健康的主要?dú)⑹?而動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis, AS)是多種嚴(yán)重心血管疾病的病理基礎(chǔ)。AS的病理生理過(guò)程主要是血管內(nèi)皮細(xì)胞的受損以及巨噬細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞在血管壁的沉積形成泡沫細(xì)胞,從而使動(dòng)脈血管壁不斷加厚,最終引起動(dòng)脈粥樣硬化。ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體Al (ATP-binding cassette transporter A1, ABCA1)和清道夫受體B型I(scavenger receptor class B type I, SR-BI)是介導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的關(guān)鍵蛋白,在機(jī)體清除多余脂質(zhì)的過(guò)程中發(fā)揮著重要功能。人的高密度脂蛋白受體被稱作CLA-1。 ABCA1和SR-BI/CLA-1被認(rèn)為是預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化的潛在靶標(biāo)。實(shí)驗(yàn)室前期在已有的ABCA1、CLA-1表達(dá)上調(diào)劑篩選模型上得到了活性化合物吳茱萸次堿(Rutaecarpine, RUT),進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)RUT在體內(nèi)能通過(guò)上調(diào)ABCA1、SR-BI起到抗AS的作用。RUT是瞬時(shí)受體電位香草醛亞家族1(Transient Receptor Potentialcation channel subfamily V member 1,TRPV1)的激動(dòng)劑。近些年有研究表明,TRPV1與動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓等心血管疾病有著密切的關(guān)系。Ma等的研究結(jié)果表明,激活TRPV1能夠上調(diào)ABCA1的表達(dá),減緩AS的發(fā)生發(fā)展。因此,TRPV1可能是位于ABCA1、SR-BI/CLA-1上游的作用靶標(biāo)。鑒于ABCA1、SR-BI/CLA-1在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展以及治療中的重要作用,我們進(jìn)行了ABCA1、SR-BI/CLA-1表達(dá)上調(diào)劑的抗動(dòng)脈粥樣硬化活性研究,及其上游作用靶標(biāo)發(fā)現(xiàn)的機(jī)制研究。1. ABCA1、CLA-1表達(dá)上調(diào)劑的發(fā)現(xiàn)本論文首先以實(shí)驗(yàn)室前期構(gòu)建的ABCA1和CLA-1表達(dá)上調(diào)劑篩選模型為基礎(chǔ),進(jìn)行了大規(guī)模的化合物篩選,以期發(fā)現(xiàn)能夠提高ABCA1、CLA-1表達(dá)水平的活性化合物。應(yīng)用此模型對(duì)化合物庫(kù)中的化合物進(jìn)行了篩選,發(fā)現(xiàn)了活性化合物E0869；針對(duì)合成的RUT衍生物進(jìn)行了篩選,獲得了活性化合物R20。2.E0869體外抗動(dòng)脈粥樣硬化活性研究Western blot和RT-PCR實(shí)驗(yàn)表明,活性化合物E0869能上調(diào)肝細(xì)胞HepG2中ABCA1、CLA-1以及ABCG1的mRNA以及蛋白水平,但不影響FAS、SREBP-1c的表達(dá)。E0869能上調(diào)巨噬細(xì)胞RAW264.7中ABCA1、SR-BI以及ABCG1的iRNA以及蛋白水平,但不影響CD36的表達(dá)。巨噬細(xì)胞泡沫化實(shí)驗(yàn)表明,E0869能使泡沫化巨噬細(xì)胞RAW264.7胞內(nèi)脂滴量明顯減少,膽固醇流出實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,E0869能增加其膽固醇的流出。3.R20的抗動(dòng)脈粥樣硬化活性研究及其作用靶標(biāo)研究Western blot和RT-PCR實(shí)驗(yàn)表明,R20能上調(diào)肝細(xì)胞HepG2中ABCA1、CLA-1以及ABCG1的mRNA以及蛋白水平,但不影響FAS、SREBP-1c的表達(dá)。巨噬細(xì)胞泡沫化實(shí)驗(yàn)表明,R20能使泡沫化巨噬細(xì)胞RAW264.7胞內(nèi)脂滴量明顯減少,膽固醇流出實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,R20能增加其膽固醇的流出。R20是本實(shí)驗(yàn)室合成的RUT的衍生物,RUT是TRPV1的激動(dòng)劑,文獻(xiàn)表明激活TRPV1能夠上調(diào)ABCAl的表達(dá),與動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓等心血管疾病有著密切的關(guān)系。所以,R20有可能是通過(guò)激活TRPV1來(lái)上調(diào)ABCA1的表達(dá),從而發(fā)揮其抗AS的作用。為了進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證,我們構(gòu)建了人TRPV1激動(dòng)劑篩選模型,以進(jìn)行進(jìn)一步的篩選和檢測(cè)。通過(guò)檢測(cè)我們發(fā)現(xiàn)R20在人TRPV1激動(dòng)劑篩選模型上表現(xiàn)出了良好的活性。同時(shí),我們對(duì)R20進(jìn)行了初步的體內(nèi)活性研究,apoE-/-小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,R20還能夠顯著降低小鼠血清中TC、TG以及LDL-C的含量,對(duì)HDL-C的含量有一定的升高作用。此外,R20能夠顯著上調(diào)小鼠肝臟中ABCA1、SR-BI、ABCG1以及LDLR的蛋白及mRNA水平,但對(duì)FAS、SREBP-1c的表達(dá)有一定的抑制作用；R20還能顯著減輕肝臟中的脂質(zhì)堆積。綜上所述,本論文通過(guò)ABCA1、CLA-1表達(dá)上調(diào)劑篩選模型進(jìn)行篩選,獲得了兩個(gè)活性化合物E0869和R20,我們進(jìn)一步對(duì)E0869、R20在細(xì)胞水平確證了其藥效學(xué)活性。為了尋找ABCA1、CLA-1表達(dá)上調(diào)劑作用靶標(biāo),我們構(gòu)建了人TRPV1激動(dòng)劑篩選模型,通過(guò)檢測(cè)我們發(fā)現(xiàn)R20具有良好的激動(dòng)活性。同時(shí),我們對(duì)活性較好的R20進(jìn)行了初步的體內(nèi)活性研究。本論文工作為尋找新型抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物或其先導(dǎo)化合物奠定了基礎(chǔ),具有重要的理論和實(shí)踐意義。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R54
【目錄】：

下載全文 更多同類文獻(xiàn)

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購(gòu)買知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 隋峰;霍海如;姜廷良;杜新亮;;TRPV1通道蛋白介導(dǎo)的生理病理機(jī)制[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2008年01期

2 于新宇;柳青;;瞬時(shí)受體電位香草酸亞型1在心血管系統(tǒng)中的調(diào)節(jié)作用[J];心血管病學(xué)進(jìn)展;2012年02期

3 Yoshinari Uehara;Keijiro Saku;;High-density lipoprotein and atherosclerosis: Roles of lipid transporters[J];World Journal of Cardiology;2014年10期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 崔立寶;于小華;蔣崇輝;唐雅玲;歐陽(yáng)新平;何平平;呂運(yùn)成;姚峰;張敏;唐朝克;;普羅布考通過(guò)調(diào)控ABCA1、SR-BⅠ、ABCG5、ABCG8表達(dá)及抗炎作用抑制高膽固醇血癥兔動(dòng)脈粥樣硬化（英文）[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2015年09期

2 盧圣鋒;尹海燕;唐勇;張承舜;于美玲;羅玲;余曙光;;瞬時(shí)感受器電位及其與艾灸溫?zé)嵝?yīng)機(jī)制研究結(jié)合的思考[J];針刺研究;2012年02期

3 隋峰;姜廷良;;從機(jī)體TRP寒熱感受環(huán)節(jié)挖掘中藥四氣的現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵[J];中國(guó)中藥雜志;2012年16期

4 王星;張燕玲;王耘;任真真;鮑紅娟;喬延江;;TRPV1離子通道與中藥辛味藥性的關(guān)系研究[J];中國(guó)中藥雜志;2014年13期

5 王佳琪;王陽(yáng);徐海明;吳金義;;老年冠心病患者同型半胱氨酸水平與血脂相關(guān)性[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2015年05期

6 邱晴;都健;;瞬時(shí)受體電位香草酸亞型1與代謝綜合征[J];醫(yī)學(xué)綜述;2015年06期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 桑鵬;基于表面靜電勢(shì)參數(shù)的定量結(jié)構(gòu)—性質(zhì)/活性關(guān)系研究[D];浙江大學(xué);2010年

2 張?jiān)诜?PAR4在背根神經(jīng)節(jié)感覺(jué)神經(jīng)元的表達(dá)及與TRPV1的共存[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2012年

3 王家平;不同灸法對(duì)足三里穴位局部溫度及Trp家族基因表達(dá)的影響[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2012年

4 曾冠男;兩種亞型胃食管反流病焦慮、抑郁狀態(tài)的比較及其與生活質(zhì)量的相關(guān)性研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

5 曾羽;高鹽對(duì)大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響及藥物干預(yù)[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2014年

6 王佳琪;冠心病患者同型半胱氨酸與血脂的相關(guān)性分析及相關(guān)藥物療效評(píng)價(jià)[D];吉林大學(xué);2015年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 Donna H WANG;;The vanilloid receptor and hypertension[J];Acta Pharmacologica Sinica;2005年03期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 查顯庭;卜平;;單味中藥抗動(dòng)脈粥樣硬化的實(shí)驗(yàn)研究[J];長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2009年03期

2 李秀才;抗動(dòng)脈粥樣硬化中藥的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代診斷與治療;1997年04期

3 林琦,陸金國(guó);丹參抗動(dòng)脈粥樣硬化的研究進(jìn)展[J];山西中醫(yī);2002年04期

4 陳可冀;中藥抗動(dòng)脈粥樣硬化研究進(jìn)展[J];浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志;1994年01期

5 李秀才;抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物研究進(jìn)展[J];臨床薈萃;1996年17期

6 閆芳,王敏;中藥抗動(dòng)脈粥樣硬化研究進(jìn)展[J];臨沂醫(yī)學(xué)�？茖W(xué)校學(xué)報(bào);2002年03期

7 薛文雋,吳國(guó)忠;中藥抗動(dòng)脈粥樣硬化的藥理學(xué)研究進(jìn)展[J];上海中醫(yī)藥雜志;2003年06期

8 齊敏;;黃連抗動(dòng)脈粥樣硬化研究進(jìn)展[J];牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年01期

9 ;抗動(dòng)脈粥樣硬化新藥尼坎納汀[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊(cè);1996年02期

10 黃偉毅,陳素云,邱幸生;抗動(dòng)脈粥樣硬化的中醫(yī)藥研究進(jìn)展[J];中醫(yī)藥研究;1998年05期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 魏萬(wàn)林;;抗動(dòng)脈粥樣硬化治療進(jìn)展[A];第四屆全國(guó)老年醫(yī)學(xué)進(jìn)展學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2004年

2 孔德新;管琳;周千翔;;丹益蓮抗動(dòng)脈粥樣硬化的臨床療效[A];第三屆中國(guó)藥理學(xué)會(huì)補(bǔ)益藥藥理專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

3 許艷妮;楊媛;高潔;鮑羿;王麗;徐揚(yáng);劉祺;杜郁;鄭智慧;巫曄翔;姜威;余利巖;洪斌;司書(shū)毅;;微生物來(lái)源抗動(dòng)脈粥樣硬化候選藥物篩選及活性研究[A];第十二屆全國(guó)抗生素學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

4 諸駿仁;;調(diào)脂抗動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病分會(huì)第八次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議匯編[C];2004年

5 諸駿仁;;調(diào)脂抗動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議專題報(bào)告匯編[C];2009年

6 周京紅;汪海;;激活NNMR抗動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)的免疫學(xué)途徑[A];第九屆全國(guó)心血管藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

7 劉暢;王瀟;劉鵬;馮婷婷;李永臻;許艷妮;司書(shū)毅;;化合物IMB840抗動(dòng)脈粥樣硬化活性研究[A];第十二屆全國(guó)脂質(zhì)與脂蛋白學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2014年

8 廖端芳;楊云波;袁皓瑜;李元建;;Ezetimibe抗動(dòng)脈粥樣硬化的非腸道機(jī)制[A];第九屆全國(guó)心血管藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

9 王瀟;劉暢;劉鵬;許艷妮;司書(shū)毅;;應(yīng)用人ABCA1表達(dá)上調(diào)劑高通量篩選模型篩選新型抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物先導(dǎo)化合物[A];第十二屆全國(guó)脂質(zhì)與脂蛋白學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2014年

10 牛琳琳;朱明軍;;調(diào)脂膠囊抗動(dòng)脈粥樣硬化作用機(jī)理研究[A];2011年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)心病分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨北京中醫(yī)藥學(xué)會(huì)心血管病專業(yè)委員會(huì)年會(huì)論文集[C];2011年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 本報(bào)記者 慕欣;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2011年

2 本報(bào)記者 慕欣;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 周京紅;激活NNMR抗動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)機(jī)制的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年

2 徐金瑞;黑大豆種皮花色苷抗動(dòng)脈粥樣硬化及其抗氧化機(jī)制研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

3 甄奕;CD40LsiRNA阻斷CD40/CD40L受體配體軸抗動(dòng)脈粥樣硬化的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王瀟;新型ABCA1、SR-BI/CLA-1表達(dá)上調(diào)劑的抗動(dòng)脈粥樣硬化活性及其作用靶標(biāo)發(fā)現(xiàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

2 劉學(xué)源;雙參田七散抗動(dòng)脈粥樣硬化的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2010年

3 傅智麗;雙參田七散抗動(dòng)脈粥樣硬化的量效研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2011年

4 吳庚潤(rùn);苜蓿降血脂膠囊抗動(dòng)脈粥樣硬化實(shí)驗(yàn)研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2009年

5 張延菲;益母草堿（SCM198）抗動(dòng)脈粥樣硬化活性及其作用機(jī)制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

6 魏冬梅;通腦心脈靈抗動(dòng)脈粥樣硬化的實(shí)驗(yàn)研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2007年

7 張美玲;脈絡(luò)康平顆�？箘�(dòng)脈粥樣硬化的實(shí)驗(yàn)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2009年

8 劉占濤;海洋活性物質(zhì)2，，3-吲哚醌抗動(dòng)脈粥樣硬化藥效學(xué)研究[D];青島大學(xué);2007年

9 鐵春苗;依折麥布抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用及其機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2015年

10 李建周;中藥L008抗動(dòng)脈粥樣硬化的實(shí)驗(yàn)研究[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2010年

  本文關(guān)鍵詞：TRPV1離子通道與中藥辛味藥性的關(guān)系研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：190862