本文選題：胰島素抵抗 + 活性氧自由基��； 參考：《中國臨床藥理學(xué)雜志》2015年20期

【摘要】：目的探討褪黑素(MT)對亞油酸(LA)引起Hep G2細(xì)胞胰島素信號缺陷的修復(fù)作用及其機制。方法將培養(yǎng)的Hep G2細(xì)胞分為對照組(BSA組)、亞油酸組(LA組)、亞油酸+褪黑素組(LA+MT組)、亞油酸+維生素C組(LA+Vit C組)。BSA組予以10%牛血清白蛋白處理24 h;LA組予以0.5 mmol·L-1亞油酸處理24 h,LA+MT組予以10μmol·L-1褪黑素和0.5 mmol·L-1亞油酸處理24 h;LA+Vit C組予以1 mmol·L-1維生素C和0.5 mmol·L-1亞油酸處理24 h。用熒光比色法測定各組細(xì)胞胞內(nèi)氧自由基水平,用Western印跡法檢測胰島素刺激后胞內(nèi)胰島素信號蛋白磷酸化水平,包括蛋白激酶B、叉頭轉(zhuǎn)錄因子以及c-Jun氨基末端激酶。結(jié)果 LA組的氧自由基含量明顯高于BSA組(P0.05);LA+MT組的氧自由基含量明顯低于LA組(P0.05);LA+MT組與BSA組相比,氧自由基含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。LA+Vit C組與LA組相比,氧自由基的含量減少,但仍高于LA+MT組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。LA組與BSA組相比,蛋白激酶B、叉頭轉(zhuǎn)錄因子磷酸化水平減少,而c-Jun氨基末端激酶磷酸化水平升高;LA+MT組與LA組相比,蛋白激酶B、叉頭轉(zhuǎn)錄因子磷酸化水平顯著升高,c-Jun氨基末端激酶磷酸化水平明顯降低,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論亞油酸可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)氧自由基增加,褪黑素能夠清除亞油酸產(chǎn)生的過量氧自由基,減少c-Jun氨基末端激酶的活化,修復(fù)胰島素下游信號損傷。
[Abstract]:Objective to investigate the effect and mechanism of melatonin (MT) on insulin signal defect in Hep G2 cells induced by linoleic acid (LA).Methods the cultured Hep G2 cells were divided into three groups: control group, linoleic acid group, linoleic acid group, linoleic acid melatonin group, LA MT group, linoleic acid vitamin C group, LA Vit C group and BSA group treated with 10% bovine serum albumin for 24 hours.The LA MT group was treated with 10 渭 mol L-1 melatonin and 0.5 mmol L-1 linoleic acid for 24 h. The LA Vit C group was treated with 1 mmol L-1 vitamin C and 0.5 mmol L-1 linoleic acid for 24 h.The intracellular oxygen free radicals were measured by fluorescence colorimetry, and the phosphorylation of insulin signaling proteins, including protein kinase B, fork head transcription factor and c-Jun amino terminal kinase, were detected by Western blotting.Results the content of oxygen free radical in LA group was significantly higher than that in BSA group (P 0.05). The content of oxygen free radical in LA group was significantly lower than that in LA group and BSA group. There was no significant difference in oxygen free radical content between LA group and BSA group. Compared with LA group, the content of oxygen free radical in LA Vit C group was lower than that in LA group.But the level of phosphorylation of protein kinase B and fork head transcription factor in LA MT group was lower than that in BSA group, while the phosphorylation level of c-Jun amino terminal kinase in LA MT group was higher than that in LA MT group.The phosphorylation level of protein kinase B and fork head transcription factor increased significantly, and the phosphorylation level of c-Jun amino terminal kinase decreased significantly. The difference between the two groups was statistically significant (P 0.05).Conclusion linoleic acid can increase the intracellular oxygen free radicals. Melatonin can scavenge the excessive oxygen free radicals produced by linoleic acid, reduce the activation of c-Jun amino terminal kinases, and repair the downstream signal damage of insulin.
【作者單位】： 河南科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;天津市東麗區(qū)中醫(yī)院外科;
【基金】：河南科技大學(xué)創(chuàng)新能力培育基金資助項目(2012ZCX024)
【分類號】：R96

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