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蛇毒金屬蛋白酶抑制劑重組蛋白抗腫瘤血管生成作用及其機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2018-03-26 00:03

  本文選題:蛇毒 切入點(diǎn):基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑 出處:《中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)》2017年03期


【摘要】:目的研究蛇毒金屬蛋白酶抑制劑重組蛋白(recombinant snake venom metalloproteinase inhibitor,r SVMPI)對(duì)血管生成的影響及其分子機(jī)制。方法應(yīng)用雞胚絨毛尿囊膜(chicken chorioallantoic membrane,CAM)血管生成模型觀察SVMPI重組蛋白對(duì)血管生成的影響;采用Alamar Blue分析方法檢測(cè)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical veins endothelial cells,HUVECs)增殖能力、Annexin V-FITC雙標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡、劃痕標(biāo)記法檢測(cè)細(xì)胞體外遷移能力、Boyden小室分析方法檢測(cè)細(xì)胞體外趨化能力及管腔形成法檢測(cè)體外血管新生能力;通過(guò)real-time PCR及Western blot檢測(cè)重組蛋白處理后的HUVECs KDR、FGFR-1表達(dá)。結(jié)果r SVMPI減少雞胚尿囊膜新生血管密度指數(shù),減弱由VEGF誘導(dǎo)的HUVECs趨化能力,抑制HUVECs體外新生小管的形成,降低HUVECs細(xì)胞KDR和FGFR-1的表達(dá)水平。結(jié)論r SVMPI可能通過(guò)阻斷VEGF-KDR或b FGF-FGFR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,發(fā)揮抑制血管生成的作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of recombinant snake venom metalloproteinase inhibitor (SVMPI) on angiogenesis and its molecular mechanism. Methods the angiogenesis model of chicken chorioallantoic membrane was used to observe the effect of SVMPI recombinant protein on angiogenesis. Alamar Blue assay was used to detect the proliferation of human umbilical veins endothelial cells (HUVECs) and Annexin V-FITC double labeling flow cytometry (FCM) was used to detect the apoptosis of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). In vitro migration ability was detected by scratch labeling method. Boyden chamber analysis method was used to detect the chemotaxis of cells in vitro and angiogenesis in vitro by lumen formation method. The expression of HUVECs KDRN FGFR-1 was detected by real-time PCR and Western blot. Results r SVMPI reduced the angiogenesis density index of chicken embryo allantoic membrane, decreased HUVECs chemotaxis induced by VEGF, and inhibited the formation of new tubules of HUVECs in vitro. Conclusion r SVMPI may inhibit angiogenesis by blocking VEGF-KDR or b FGF-FGFR signal transduction pathway.
【作者單位】: 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院皮膚科;福建醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)研究中心消化道惡性腫瘤教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;福建省腫瘤醫(yī)院病理科;
【基金】:福建省衛(wèi)生系統(tǒng)中青年骨干人才培養(yǎng)項(xiàng)目(No 2014-ZQNJC-17)
【分類號(hào)】:R96

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