本文選題：去甲腎上腺素　切入點(diǎn)：巨噬細(xì)胞　出處：《中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志》2017年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的觀察去甲腎上腺素(NE)預(yù)處理人單核/巨噬細(xì)胞U937細(xì)胞白細(xì)胞介素6(IL-6)的表達(dá),探討其致動(dòng)脈粥樣硬化可能的作用機(jī)制。方法 NE 0.01~10μmol·L~(-1)與U937細(xì)胞共培養(yǎng)24 h后,RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞IL-6 mRNA水平;共培養(yǎng)6,9,12,24和48 h后,ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液上清中IL-6蛋白水平;共培養(yǎng)24 h后,熒光探針法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的生成。預(yù)先加入ROS抑制劑N-乙酰半胱氨酸(NAC)、NADPH氧化酶抑制劑二亞苯基碘(DPI)或線粒體復(fù)合物Ⅱ抑制劑噻吩甲酰三氟丙酮(TIFA)孵育1 h后,再加入NE 0.01~10μmol·L~(-1)繼續(xù)培養(yǎng)24 h,ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液上清中IL-6蛋白水平。結(jié)果巨噬細(xì)胞IL-6 mRNA表達(dá)和蛋白水平隨NE 0.01~10μmol·L~(-1)濃度增加和孵育時(shí)間延長而升高,NE 1.0μmol·L~(-1)刺激24 h,IL-6 mRNA表達(dá)和蛋白水平分別為細(xì)胞對(duì)照組的2.62和4.47倍(P0.01);NE 0.01,0.1,1.0和10.0μmol·L~(-1)組ROS的生成分別為對(duì)照組的1.87,2.56,2.91和5.36倍(P0.01)。NAC 10 mmol·L~(-1)和DPI 10μmol·L~(-1)均一定程度地抑制IL-6蛋白的表達(dá)(P0.01),而TIFA無影響。結(jié)論 NE可誘導(dǎo)人巨噬細(xì)胞IL-6的表達(dá),并可能通過NADPH氧化酶介導(dǎo)的ROS通路而促進(jìn)炎癥反應(yīng),促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。
[Abstract]:Objective to observe the expression of interleukin 6 (IL 6) in U937 cells pretreated with noradrenaline (NE). Methods the levels of IL-6 mRNA were detected by RT-PCR after co-cultured with U937 cells for 24 h, and the levels of IL-6 protein in supernatant of cultured cells were detected by Elisa after co-culture for 24 h and 48 h after co-culture, and after co-culture for 24 h, the levels of IL-6 protein in the supernatant of U937 cells were detected by Elisa. Fluorescence probe assay was used to detect the formation of reactive oxygen species (Ros) in cells. After 1 h incubation with ROS inhibitor N-acetylcysteine, NADPH oxidase inhibitor, diphenyl iodide (DPI), or mitochondrial complex inhibitor, thiophenyl trifluoroacetone, TIFA (1 h). The expression and protein level of IL-6 mRNA in the supernatant of macrophages were determined by Elisa. Results the expression of IL-6 mRNA and the protein level of macrophages increased with the increase of NE 0.01 10 渭 mol 路L ~ (-1) concentration and the incubation time increased. NE 1.0 渭 mol 路L ~ (-1)) stimulated the expression of IL-6 mRNA and the expression of IL-6 mRNA at 24 h. The protein levels were 2.62 and 4.47 times of P0.01ANE0.01P0.01P0.01 and 10.0 渭 mol 路L ~ (-1) in the control group, respectively. The ROS production in the control group was 1.87 渭 mol 路L ~ (-1) and 5.36 times that of the control group respectively (P 0.01U. NAC 10 mmol 路L -1) and DPI (10 渭 mol 路L ~ (-1)) could inhibit the expression of IL-6 protein to some extent, but TIFA had no effect. Conclusion NE can induce the expression of IL-6 protein to a certain extent, but TIFA has no effect. Leading to the expression of IL-6 in human macrophages, ROS pathway mediated by NADPH oxidase may promote inflammatory response and promote the occurrence and development of atherosclerosis.
【作者單位】： 南京中醫(yī)藥大學(xué)連云港附屬醫(yī)院連云港市中醫(yī)院;濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院;
【基金】：江蘇省藥學(xué)會(huì)-奧賽康醫(yī)院藥學(xué)基金(201517) 連云港市科技發(fā)展計(jì)劃(ZD1508) 江蘇省青年醫(yī)學(xué)人才(QNRC2016507)~~
【分類號(hào)】：R96

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1644556