本文關鍵詞： 雌激素 β雌二醇 生長板 軟骨細胞 大鼠 C型利鈉肽 胰島素樣生長因子 利鈉肽受體B　出處：《上海交通大學學報(醫(yī)學版)》2017年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的·探討不同濃度的17β雌二醇(17βE2)對大鼠生長板軟骨細胞C型利鈉肽(CNP)、利鈉肽受體B(NPR-B)及胰島素樣生長因子1(IGF1)的調控作用,及其對軟骨細胞增殖的影響。方法·Wistar大鼠8只,于出生后14 d處死,分離脛骨上段骺軟骨板,取得軟骨細胞并培養(yǎng)48 h后,于培養(yǎng)液中加入17βE2,并使其終濃度分別為10~(-4)、10~(-6)、10~(-8)、10~(-10)和10~(-12) mol/L,同時設空白對照組。繼續(xù)培養(yǎng)48 h。之后利用CCK8法測定軟骨細胞增殖能力,應用ELISA法測定培養(yǎng)液中CNP和IGF1的濃度,并利用實時定量PCR檢測軟骨細胞CNP、NPR-B及IGF1 mRNA的相對水平。結果·不同濃度的17βE2對生長板軟骨細胞增殖有顯著影響。當17βE2的濃度為10~(-8) mol/L時,其對軟骨細胞的促增殖效應最強;當濃度進一步增至10~(-4) mol/L時,則抑制其增殖。隨著17βE2濃度的增加,細胞培養(yǎng)液中CNP的濃度以及軟骨細胞中CNP mRNA相對水平均出現(xiàn)明顯差異,以10~(-8) mol/L組CNP的濃度和mRNA水平最高,10~(-4) mol/L組為最低。IGF1同樣在10~(-8) mol/L組的濃度和mRNA表達水平達到最高,但最低值分別出現(xiàn)在10~(-10) mol/L組和10~(-12) mol/L組。軟骨細胞增殖水平與CNP的mRNA及蛋白濃度均呈正相關(均P=0.000),但與IGF1的mRNA及蛋白濃度水平無明顯相關性(均P0.05)。結論·17βE2對大鼠生長板軟骨細胞增殖調控具有劑量-效應關系,呈現(xiàn)出高濃度抑制、一定濃度范圍內(10~(-10)~10~(-8) mol/L)促進的作用;該作用與其調節(jié)生長板軟骨細胞表達CNP水平呈正相關。
[Abstract]:Objective: to investigate the effects of 17 尾 estradiol 17 尾 E2 (17 尾 E 2) on the growth plate chondrocytes C-type natriuretic peptide (CNP), natriuretic peptide receptor (BnPR-B1) and insulin-like growth factor 1IGF1 (IGF1) in chondrocytes of rats. Methods: the proliferation of chondrocytes was observed in 8 Wistar rats. The epiphyseal chondrocytes were isolated from the epiphyseal plate of the upper tibia on the 14th day after birth, and the chondrocytes were obtained and cultured for 48 h. 17 尾 E _ 2 was added to the culture medium and the final concentrations were 10 ~ (10) ~ (-4) ~ 10 ~ (-6) ~ 10 ~ (-10) ~ 10 ~ (-10) mol 路L ~ (-1) and 10 ~ 10 ~ (-12) mol 路L ~ (-1), respectively, and a blank control group was set up. The proliferation of chondrocytes was determined by CCK8 assay and the concentration of CNP and IGF1 in culture medium was determined by ELISA method. The relative levels of CNPnPR-B and IGF1 mRNA in chondrocytes were measured by real-time quantitative PCR. Results: the proliferation of chondrocytes was significantly affected by 17 尾 E2 at different concentrations. When the concentration of 17 尾 E2 was 10 ~ 8 mol/L, the effect of 17 尾 E _ 2 on the proliferation of chondrocytes was the strongest. With the increase of 17 尾 E 2 concentration, the concentration of CNP in cell culture medium and the relative level of CNP mRNA in chondrocytes were significantly different. The highest concentration of CNP and the highest level of mRNA were found in the mol/L group. The lowest. IGF1 level and mRNA expression level in the mol/L group were also the highest in the mol/L group, and the expression of mRNA was the highest in the mol/L group, and the expression of mRNA was the highest in the mol/L group, and the expression of mRNA was the highest in the mol/L group. However, the lowest values were found in the mol/L group and the mol/L group, respectively. There was a positive correlation between the proliferation of chondrocytes and the mRNA and protein concentrations of CNP (all P < 0.000), but no significant correlation with the mRNA and protein concentrations of IGF1 (P 0.05). Conclusion\\\. The proliferation regulation of long plate chondrocytes has a dose-effect relationship. The inhibitory effect of high concentration and the effect of 10 ~ 10 ~ 10 ~ (-8) mol 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) on the expression of CNP in chondrocytes of growth plate were positively correlated.
【作者單位】： 上海健康醫(yī)學院臨床醫(yī)學院;上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院兒內科;
【基金】：上海高校選拔培養(yǎng)優(yōu)秀青年教師科研專項基金(ZZjkxy13003) 金磊兒科中青年內分泌醫(yī)師成長科研基金(PEGRF201002008)~~
【分類號】：R965

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本文編號：1547223