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紅平菇菌絲體多糖的提

發(fā)布時(shí)間:2018-02-23 06:21

  本文關(guān)鍵詞: 紅平菇多糖 化學(xué)結(jié)構(gòu) 糖尿病 氧化應(yīng)激 提取 出處:《山東農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文 論文類型:學(xué)位論文


【摘要】:糖尿病(Diabetes mellitus,DM)是一種全球性的內(nèi)分泌代謝疾病,表現(xiàn)在因胰島素分泌不足而引起的糖、脂肪、蛋白質(zhì)等代謝紊亂及體內(nèi)酸堿失衡,以血糖水平升高為主要特征。另外,糖尿病還經(jīng)常伴隨著諸如糖尿病腎病(Diabetic nephropathy,DN)、糖尿病肝病(Diabetic hepatopathy,DH)和糖尿病胰腺疾病(Diabetic-pancreatic disease,DPD)等并發(fā)癥的發(fā)生,致殘、致死率高。目前,臨床中糖尿病的治療方法包括注射胰島素和口服降血糖藥物,但這些方法在長期使用中會產(chǎn)生毒副作用,因此,尋找天然的、無毒的降血糖藥物是非常必要的。紅平菇(Pleurotus djamor),又名桃紅側(cè)耳、紅側(cè)耳等,是一種食用、藥用兼有觀賞價(jià)值的珍稀蕈菌。但是目前關(guān)于紅平菇的研究較少,未見菌絲體多糖(Mycelia polysaccharides,MPS)的提取及抗糖尿病藥理活性的報(bào)道。本課題以紅平菇為出發(fā)菌株,進(jìn)行紅平菇深層液體發(fā)酵獲得菌絲體。通過單因素實(shí)驗(yàn)(Single-factor test,SFT)和響應(yīng)面分析(Response surface methodology,RSM)等方法確定了紅平菇酸提MPS(Acidic-extractable MPS,Ac-MPS)、堿提MPS(Alkalic-extractable MPS,Al-MPS)和酶提MPS(Enzymatic-extractable MPS,En-MPS)的最佳提取條件,并對三種紅平菇MPS的結(jié)構(gòu)和抗糖尿病及其并發(fā)癥的生理活性進(jìn)行研究,以期為從天然資源中開發(fā)和研究新物質(zhì)提供參考,為臨床糖尿病的藥物治療提供新的線索。目前主要獲得以下研究成果。(1)紅平菇MPS的提取優(yōu)化:參考現(xiàn)有的提取技術(shù),優(yōu)化紅平菇MPS的提取工藝。結(jié)果表明①Ac-MPS的最佳提取條件是加水倍數(shù)37.25,提取時(shí)間42.95min,HCl濃度0.20M,提取溫度83.98oC,此條件下得率為1.97%;②Al-MPS的最佳提取條件是加水倍數(shù)41.56,提取時(shí)間88.91min,Na OH濃度0.36M,提取溫度74.90oC,此條件下得率為2.36%;③En-MPS的最佳提取條件是pH值7.36,加水倍數(shù)56.78,提取時(shí)間44.77min,提取溫度35.36oC,此條件下得率為3.61%。上述提取過程中方差分析、滿意度分析、準(zhǔn)確度分析及異常值分析均表面模型可適用于Ac-、Al-和En-MPS工藝條件的參數(shù)優(yōu)化。(2)紅平菇MPS的結(jié)構(gòu)測定:①氣相色譜圖表明,Ac-MPS和Al-MPS均含有阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖,但單糖含量存在差異;En-MPS含有鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖;②液相色譜分析顯示,Ac-、Al-和En-MPS的重均分子量(Weight-average molecular weights,Mw)分別為2.33×104Da、5.26×104Da和1.97×104Da,其它分子量參數(shù)大小順序?yàn)锳l-MPSAc-MPSEn-MPS,多分散系數(shù)d大小順序?yàn)锳l-MPSAc-MPSEn-MPS,表明En-MPS多糖較均一;③紅外光譜結(jié)果顯示,Ac-MPS是α-型糖苷鍵連接的呋喃糖,Al-MPS是β-型糖苷鍵連接的呋喃糖,En-MPS是β-型糖苷鍵連接的吡喃糖。(3)紅平菇MPS對糖尿病小鼠氧化應(yīng)激的影響:Ac-、Al-和En-MPS均能顯著抑制鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)誘導(dǎo)的糖尿病小鼠肝臟、腎臟和胰腺中的超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、過氧化氫酶(Catalase,CAT)和總抗氧化能力(Total antioxidant capability,T-AOC)活性的降低及脂質(zhì)過氧化物(Lipid peroxide,LPO)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量的升高,表明Ac-、Al-和En-MPS具有較強(qiáng)抵制氧化應(yīng)激的活性。并且結(jié)果表明,與Ac-MPS和Al-MPS相比,En-MPS表現(xiàn)出更強(qiáng)的活性。(4)紅平菇MPS對糖尿病小鼠脂代謝的影響:Ac-、Al-和En-MPS能顯著抑制糖尿病小鼠血清中甘油三酯(Triacylglycerols,TG)、總膽固醇(Total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白膽固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、極低密度脂蛋白膽固醇(Very low-density lipoprotein cholesterol,VLDL-C)和動脈粥樣硬化指數(shù)(Atherogenic index,AI)水平的升高和高密度脂蛋白膽固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平的降低,表明紅平菇MPS能夠改善小鼠的脂代謝紊亂情況。(5)紅平菇MPS對糖尿病小鼠器官的修復(fù)作用:Ac-、Al-和En-MPS可顯著降低小鼠血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Alanine transaminase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate transaminase,AST)、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(Creatinine,CRE)的水平,可顯著抑制STZ誘導(dǎo)的器官指數(shù)的升高;小鼠肝臟、腎臟和胰腺的外觀及組織病理學(xué)切片也隨著紅平菇MPS的干預(yù)而逐漸趨于正常。并且En-MPS的作用效果要強(qiáng)于Ac-MPS和Al-MPS,說明En-MPS有保護(hù)肝臟、腎臟和胰腺免受高血糖的影響。上述結(jié)果表明Ac-、Al-和En-MPS能改善STZ誘導(dǎo)糖尿病小鼠的糖代謝和脂代謝,減輕氧化應(yīng)激對機(jī)體的損傷,防治糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展。說明紅平菇MPS藥性緩和、無毒副作用,可開發(fā)其并應(yīng)用于保健食品,具有廣闊的市場前景。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R915;R587.1

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本文編號:1526336

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