本文關(guān)鍵詞：止血帶休克后主動(dòng)脈RAS穩(wěn)態(tài)失衡在血管低反應(yīng)性及損傷中的作用

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【摘要】：目的腎素血管緊張素系統(tǒng)(renin angiotensin systems,RAS)內(nèi)在穩(wěn)態(tài)失衡在多種疾病及損傷中發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)主要研究止血帶休克(tourniquet shock,TS)后RAS穩(wěn)態(tài)失衡在血管低反應(yīng)性及損傷中的作用,為揭示血管低反應(yīng)發(fā)生機(jī)制及治療策略提供新的思路。方法1 TS模型的制備:8月齡C57B6的雄性小鼠,止血帶套扎雙后肢阻斷血流,2h后解套扎進(jìn)行再灌注。實(shí)驗(yàn)第一部分分7組,對(duì)照組及6個(gè)模型組,模型組分別于再灌注10min、1h、2h、4h、6h、12h后處死,對(duì)照組不進(jìn)行套扎與再灌注,其余操作同模型組。實(shí)驗(yàn)第二部分分5組,即野生對(duì)照組(WT)、野生-休克組(WT-TS)、野生-休克-給藥組(WT-TS-DIZE)、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2(Angiotensin converting enzyme 2,ACE2)的基因敲除對(duì)照組(KO)、基因敲除-休克組(KO-TS),給藥組于實(shí)驗(yàn)前以10mg/kg/d的劑量給予ACE2的激動(dòng)劑——二乙酰胺三氮脒(Diminazene Diaceturate,DIZE)進(jìn)行皮下注射給藥,共計(jì)28天,WT-TS、WT-TS-DIZE、KO-TS各組缺血2h再灌注4h后處死小鼠,WT、KO各組不進(jìn)行套扎與再灌注,其余操作同模型組。2損傷指標(biāo)的測(cè)定:多普勒血流儀測(cè)定肢體血流障礙,頸動(dòng)脈插管法測(cè)定血壓值,離體血管張力測(cè)定儀測(cè)定主動(dòng)脈血管收縮反應(yīng)性,HE染色結(jié)合透射電鏡評(píng)價(jià)血管形態(tài)學(xué)損傷。3 RAS成分測(cè)定:蛋白免疫印跡法(western blot,WB)檢測(cè)血管組織中血管緊張素II 1型受體(AT1)、血管緊張素(1-7)受體(Mas)、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)、ACE2蛋白的表達(dá)。采用酶聯(lián)免疫吸附法(Enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)血清中血管緊張素II(AngiotensinⅡ,Ang II)/血管緊張素(1-7)(Angiotensin 1-7,Ang(1-7))含量。結(jié)果實(shí)驗(yàn)第一部分結(jié)果顯示,與對(duì)照組小鼠相比,模型組小鼠肢體血流量隨著再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸減少;血壓在再灌注10min時(shí)間點(diǎn)先升高隨后逐漸降低;主動(dòng)脈血管對(duì)去甲腎上腺素(Noradrenalin,NE)的反應(yīng)性在再灌注10min時(shí)間點(diǎn)升高隨后下降、再灌注4h時(shí)間點(diǎn)的血管反應(yīng)性最低;形態(tài)學(xué)損傷評(píng)分逐漸增高;主動(dòng)脈血管AT1受體與ACE2蛋白表達(dá)下降;Mas受體與ACE蛋白表達(dá)升高;血清中AngⅡ的含量升高,Ang(1-7)的含量降低。實(shí)驗(yàn)第二部分結(jié)果顯示,與WT-TS組相比,WT-TS-DIZE組主動(dòng)脈對(duì)NE的反應(yīng)性明顯升高,血管損傷程度明顯減輕,AT1受體、ACE2表達(dá)升高,Mas受體表達(dá)降低,ACE表達(dá)基本無(wú)變化,血清Ang II生成減少,Ang(1-7)生成增多;與WT相比,KO組主動(dòng)脈血管對(duì)NE反應(yīng)性升高,形態(tài)學(xué)損傷程度不明顯,主動(dòng)脈血管AT1、MAS、ACE蛋白表達(dá)均增高,ACE2無(wú)表達(dá),血清Ang II生成增多,Ang(1-7)基本無(wú)變化;與WT-TS相比,KO-TS組主動(dòng)脈對(duì)NE的反應(yīng)性明顯下降,形態(tài)學(xué)損傷程度增高不明顯,主動(dòng)脈血管AT1與ACE表達(dá)增高不明顯,Mas增高明顯(P0.05),ACE2無(wú)表達(dá),血清AngII、Ang(1-7)變化不明顯。結(jié)論1止血帶休克后RAS系統(tǒng)激活,隨著再灌注時(shí)間的延長(zhǎng),血管低反應(yīng)性及損傷程度均增加,主動(dòng)脈ACE/Ang II/AT1軸與ACE2/Ang(1-7)/Mas軸表達(dá)失衡,且兩軸隨再灌時(shí)間延長(zhǎng)差異性表達(dá)愈加明顯,提示RAS穩(wěn)態(tài)失衡與血管低反應(yīng)性的發(fā)生及損傷可能有關(guān)。2以ACE2為靶點(diǎn)改善RAS穩(wěn)態(tài)失衡有可能提高主動(dòng)脈血管的反應(yīng)性、減輕血管損傷,對(duì)臨床上休克晚期血管低反應(yīng)性的治療提供了新思路。
【關(guān)鍵詞】：止血帶休克 腎素血管緊張素系統(tǒng) 血管低反應(yīng)性
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R96
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文縮略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 止血帶休克后主動(dòng)脈血管反應(yīng)性及RAS成分的變化13-44
• 1.1 材料與方法13-25
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料13-16
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法16-25
• 1.1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析25
• 1.2 結(jié)果25-32
• 1.2.1 多普勒血流值測(cè)定結(jié)果25-26
• 1.2.2 頸動(dòng)脈血壓測(cè)定結(jié)果26-27
• 1.2.3 血管反應(yīng)性測(cè)定結(jié)果27-28
• 1.2.4 血管損傷形態(tài)學(xué)變化28-30
• 1.2.5 RAS成分測(cè)定結(jié)果30-32
• 1.3 討論32-38
• 1.3.1 止血帶休克模型血流動(dòng)力學(xué)和組織學(xué)損傷特點(diǎn)33-36
• 1.3.2 止血帶休克后RAS的表達(dá)變化36-38
• 1.4 小結(jié)38-39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 第2章 ACE2蛋白上調(diào)或缺失對(duì)血管低反應(yīng)性的影響44-57
• 2.1 材料與方法44-45
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料44
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法44
• 2.1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析44-45
• 2.2 結(jié)果45-51
• 2.2.1 血管反應(yīng)性測(cè)定結(jié)果45-46
• 2.2.2 血管損傷形態(tài)學(xué)變化46-48
• 2.2.3 蛋白免疫印跡測(cè)定結(jié)果48-50
• 2.2.4 AngII、Ang(1-7)測(cè)定結(jié)果50-51
• 2.3 討論51-54
• 2.3.1 ACE/ACE2表達(dá)失衡與血管低反應(yīng)性的關(guān)系52-53
• 2.3.2 ACE/ACE2表達(dá)失衡對(duì)血管AT1/Mas受體表達(dá)的影響53
• 2.3.3 DIZE給藥對(duì)血管的保護(hù)作用53-54
• 2.4 小結(jié)54
• 參考文獻(xiàn)54-57
• 第3章 綜述 休克后血管低反應(yīng)性與腎素-血管緊張素系統(tǒng)的關(guān)系57-68
• 3.1 休克后血管低反應(yīng)性發(fā)生機(jī)制概述57-59
• 3.1.1 NO過(guò)量產(chǎn)生及其繼發(fā)性產(chǎn)物的生成57-58
• 3.1.2 受體失敏或下調(diào)58-59
• 3.1.3 血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)的膜離子通道改變（膜超極化）59
• 3.1.4 鈣超載及鈣失敏59
• 3.2 腎素-血管緊張素系統(tǒng)簡(jiǎn)述59-60
• 3.3 RAS穩(wěn)態(tài)失衡在血管低反應(yīng)性中的作用60-63
• 3.3.1 通過(guò)氧化應(yīng)激機(jī)制損傷內(nèi)皮功能60-61
• 3.3.2 通過(guò)炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)血管反應(yīng)性61-63
• 3.3.3 降低血管緊張素II受體敏感性63
• 3.4 結(jié)語(yǔ)與展望63
• 參考文獻(xiàn)63-68
• 結(jié)論68-69
• 致謝69-70
• 導(dǎo)師簡(jiǎn)介70-71
• 作者簡(jiǎn)介71-72
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集72

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 冉海紅;張然;;腎素-血管緊張素系統(tǒng)通過(guò)氧化應(yīng)激機(jī)制參與血管反應(yīng)性的調(diào)節(jié)[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2011年02期

2 Hiromichi Suzuki;Tomohiro Kikuta;Tsutomu Inoue;Ukihiro Hamada;;Time to re-evaluate effects of renin-angiotensin system inhibitors on renal and cardiovascular outcomes in diabetic nephropathy[J];World Journal of Nephrology;2015年01期

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本文編號(hào)：1019015