本文關(guān)鍵詞：硫醇轉(zhuǎn)移酶在高糖誘導(dǎo)大鼠糖尿病性白內(nèi)障形成中的作用

  更多相關(guān)文章： 硫醇轉(zhuǎn)移酶 糖尿病性白內(nèi)障 高糖 抗氧化酶

【摘要】：目的:硫醇轉(zhuǎn)移酶(Thioltransferase,TTase)是晶狀體內(nèi)重要的氧化還原酶,通過還原細(xì)胞內(nèi)氧化損傷產(chǎn)生的硫醇化蛋白,來調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)巰基的穩(wěn)態(tài),維持細(xì)胞內(nèi)部氧化還原平衡。糖尿病的高血糖狀態(tài),能通過多種途徑誘發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng),導(dǎo)致糖尿病性白內(nèi)障發(fā)生。為進一步探究糖尿病性白內(nèi)障與TTase作用之間的關(guān)系,闡明TTase在糖尿病性白內(nèi)障發(fā)生發(fā)展中的作用機制,本研究采用離體糖尿病性白內(nèi)障模型,觀察高糖對晶狀體氧化損傷修復(fù)系統(tǒng)的影響,分析相關(guān)氧化還原系統(tǒng)指標(biāo)變化,探討TTase對晶狀體氧化還原系統(tǒng)可能的保護作用。方法:1.用不同濃度葡萄糖(5.5mmol/L,35.5mmol/L,65.5mmol/L,95.5mmol/L葡萄糖)及相應(yīng)的甘露醇等滲對照在體外培養(yǎng)大鼠晶狀體7d,建立糖尿病性白內(nèi)障離體動物模型,動態(tài)觀察晶狀體的混濁情況。測定晶狀體中TTase、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性,氧化型谷胱甘肽(GSSG)與總谷胱甘肽(T-GSH)的比值。2.根據(jù)不同濃度葡萄糖培養(yǎng)的實驗結(jié)果,選用35.5mmol/L葡萄糖作為高糖孵育離體大鼠晶狀體,分別于1d、3d、5d和7d測定各組的ttase活性和gssg/t-gsh比值,通過qrt-pcr檢測各組晶狀體的ttasemrna相對含量。并于第7d行晶狀體he和免疫組化方法觀察ttase表達(dá)情況。結(jié)果:1.高糖組晶狀體較早出現(xiàn)霧狀混濁,在第1d就出現(xiàn)有部分晶狀體出現(xiàn)霧狀混濁,對照組保持相對透明(p0.05);在高糖刺激下,高糖組gssg/t-gsh比值均較正常對照組增加,其組間互相比較無顯著性差異,相應(yīng)等滲對照組和正常對照組比較差異無顯著性;高糖組的sod和cat較正常對照組降低(p0.05),不同葡萄糖濃度處理組間差異無顯著性。ttase活性增加較正常對照組增加,并在含35.5mmol/l葡萄糖的高糖組中最高(1.743±0.20mu/mgprotein,p0.01)。2.he和免疫組化染色結(jié)果顯示,高糖組與正常對照組比較,晶狀體纖維細(xì)胞呈腫脹、變性、空泡樣變,有較明顯的差別,正常對照組、等滲對照組的差異不明顯;高糖組gssg/t-gsh比例明顯隨時間增加,1d、3d、5d和7d比值分別為24.89±2.8%、35.99±2.49%、32.81±6.04%和30.99±4.17%,為正常對照的2.21、3.89、2.38和2.74倍(p0.01);在1d、3d、5d和7d時ttase的活性分別為1.25±0.31mu/mgprotein、1.49±0.23mu/mgprotein、1.61±0.20mu/mgprotein和1.91±0.28mu/mgprotein,呈逐漸增長趨勢,分別為正常對照組的1.58、2.28、2.21和2.21倍,且與正常對照組比較均有顯著性差異(p0.01)。qrt-pcr檢測ttasemrna相對含量顯示,35.5mmol/l高糖組在1d時的表達(dá)為正常對照組的2.44倍(p0.05),之后3d、5d、7d的表達(dá)驟然上升后略有下降,分別為正常對照組的6.58、6.78和3.88倍(p0.05)。相對應(yīng)的等滲對照組與正常組間比較未見顯著性差異結(jié)論:1.高糖環(huán)境可以激活晶狀體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng),使晶狀體發(fā)生抗氧化應(yīng)激反應(yīng),大量消耗gsh,致gssg含量相應(yīng)增加,gssg/t-gsh比例增高,cat和sod部分失活,晶狀體抗氧化能力下降。而ttase表達(dá)適應(yīng)性增加、酶活性增高,提示ttase可能參與了對抗高糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激,發(fā)揮著抵抗氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)晶狀體的氧化還原穩(wěn)態(tài)的保護作用。2.由高糖引起的糖尿病性白內(nèi)障,其在形態(tài)學(xué)上的變化與TTase蛋白表達(dá)之間尚未發(fā)現(xiàn)有直接關(guān)聯(lián),但TTase活性于早期就有大幅增加,相應(yīng)時間里反映晶狀體內(nèi)抗氧化狀態(tài)的GSSG/T-GSH增高。通過qRT-PCR檢測各組晶狀體的TTase mRNA相對含量也證實了這一點,提示TTase可能在糖尿病性白內(nèi)障發(fā)生的早期就起到重要的保護作用,從而延緩白內(nèi)障的發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：硫醇轉(zhuǎn)移酶 糖尿病性白內(nèi)障 高糖 抗氧化酶
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R776.1;R587.2
【目錄】：

• 縮略語表4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 文獻回顧13-25
• 1 材料25-28
• 1.1 實驗動物25
• 1.2 主要試劑25-26
• 1.3 儀器設(shè)備26-27
• 1.4 主要溶液配制27-28
• 2 方法28-39
• 2.1 大鼠離體糖尿病性白內(nèi)障模型的建立28-29
• 2.2 高糖孵育離體晶狀體混濁程度的動態(tài)觀察29
• 2.3 高糖孵育晶狀體標(biāo)本的采集29-30
• 2.4 晶狀體病理組織和免疫組織化學(xué)觀察30-31
• 2.5 晶狀體相關(guān)生化指標(biāo)的測定31-38
• 2.6 統(tǒng)計學(xué)處理38-39
• 3 結(jié)果39-47
• 3.1 不同濃度高糖孵育晶狀體混濁的變化39-40
• 3.2 晶狀體病理組織和免疫組織學(xué)觀察40-41
• 3.3 晶狀體相關(guān)生化指標(biāo)的測定41-47
• 4 討論47-51
• 小結(jié)51-52
• 參考文獻52-59
• 附錄59-62
• 個人簡歷和研究成果62-63
• 致謝63-64

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1 丁穎;巨朝娟;常英霞;劉繼敏;宋耕;;糖尿病性白內(nèi)障超聲乳化吸出人工晶狀體植入術(shù)療效觀察[J];河北醫(yī)藥;2007年07期

2 王敏;;糖尿病性白內(nèi)障198例圍術(shù)期護理[J];齊魯護理雜志;2011年17期

3 蔡敏玲;;糖尿病性白內(nèi)障患者的手術(shù)護理[J];微創(chuàng)醫(yī)學(xué);2012年06期

4 張曉林;糖尿病性白內(nèi)障人工晶狀體植入術(shù)[J];眼科新進展;1999年06期

5 夏小平,張曉,夏海濤;糖尿病性白內(nèi)障發(fā)病的有關(guān)因素研究[J];江西醫(yī)藥;2000年04期

6 蔣雪羚;真性糖尿病性白內(nèi)障一例報告[J];中國糖尿病雜志;2000年02期

7 徐海燕;真性糖尿病性白內(nèi)障1例報道[J];臨床薈萃;2001年09期

8 曹征,夏小平;糖尿病性白內(nèi)障發(fā)病的有關(guān)因素研究[J];臨床眼科雜志;2002年01期

9 姜青麗,王芳,郭玲;對糖尿病性白內(nèi)障患者實施健康教育的體會[J];齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2002年11期

10 廖長琦,李民初;青年糖尿病性白內(nèi)障1例[J];四川醫(yī)學(xué);2002年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 安四蘭;;糖尿病性白內(nèi)障手術(shù)的術(shù)前術(shù)后護理[A];全國五官科護理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會議論文匯編[C];2006年

2 李靜華;;個性化健康教育在糖尿病性白內(nèi)障患者中的應(yīng)用[A];中華護理學(xué)會2009全國五官科護理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會議論文匯編[C];2009年

3 楊躍華;;手術(shù)治療糖尿病性白內(nèi)障患者的膳食指導(dǎo)[A];中國營養(yǎng)學(xué)會第六屆臨床營養(yǎng)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];1997年

4 董淑珍;;糖尿病性白內(nèi)障與微量元素[A];中國營養(yǎng)學(xué)會第八屆微量元素營養(yǎng)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2003年

5 李漫麗;戚卉;吳雅臻;崔妤;李沭巖;;葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78在糖尿病性白內(nèi)障發(fā)病機制中的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2007年

6 王冰凌;張國華;;消翳自擬方治療糖尿病性白內(nèi)障的經(jīng)驗總結(jié)[A];內(nèi)分泌代謝病中西醫(yī)結(jié)合研究——臨床與基礎(chǔ)[C];2010年

7 王宇鷹;;糖尿病性白內(nèi)障患者的健康教育[A];全國第五屆糖尿病護理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會議論文匯編[C];2007年

8 李樹杰;畢宏生;崔彥;王慧;;綠茶防治糖尿病性白內(nèi)障的效果及機制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2007年

9 施瓊;嚴(yán)宏;;肌肽與阿司匹林滴眼液聯(lián)合對早期糖尿病性白內(nèi)障的抑制作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2007年

10 柴飛燕;嚴(yán)宏;;谷胱甘肽乙酯和肌肽對延緩糖尿病性白內(nèi)障的動物和細(xì)胞生物學(xué)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2007年

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1 吳 銘　;年老更應(yīng)防眼病[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

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1 羅怡;晚期糖基化終末產(chǎn)物在糖尿病性白內(nèi)障中的作用及其分子機制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

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2 于罡;硫醇轉(zhuǎn)移酶在高糖誘導(dǎo)大鼠糖尿病性白內(nèi)障形成中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

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9 張健;一氧化氮對老年性白內(nèi)障糖尿病性白內(nèi)障的影響及意義[D];山東大學(xué);2006年

10 李樹杰;STZ誘導(dǎo)的大鼠糖尿病性白內(nèi)障的發(fā)病機制及綠茶的防治效果研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2007年

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本文編號：974034