本文關(guān)鍵詞：不同基因轉(zhuǎn)染方法對(duì)小鼠內(nèi)耳毛細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較

  更多相關(guān)文章： 腺病毒載體 慢病毒載體 電穿孔法 基因轉(zhuǎn)染 內(nèi)耳毛細(xì)胞

【摘要】：目的對(duì)比不同的基因轉(zhuǎn)染方法對(duì)小鼠內(nèi)耳毛細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,以探尋簡(jiǎn)便、高效轉(zhuǎn)染耳蝸毛細(xì)胞的方法。方法分離111只新生昆明小鼠(P2)耳蝸螺旋韌帶及感染上皮,分別采用電穿孔法介導(dǎo)質(zhì)粒載體(pGPHI/GFP/Neo)、腺病毒載體(Ad5/CMV/GFP)和慢病毒載體(LV/CMV/GFP)3種方法轉(zhuǎn)染小鼠內(nèi)耳毛細(xì)胞,于轉(zhuǎn)染48小時(shí)后在熒光顯微鏡下觀察并比較三種方法基因轉(zhuǎn)染后小鼠內(nèi)耳毛細(xì)胞綠色熒光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的表達(dá)。結(jié)果電穿孔法介導(dǎo)質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染組和慢病毒載體轉(zhuǎn)染組GFP陽(yáng)性細(xì)胞極少;腺病毒載體轉(zhuǎn)染組效率最高,耳蝸中回外毛細(xì)胞GFP陽(yáng)性率為90.0%±4.1%,內(nèi)毛細(xì)胞GFP陽(yáng)性率為5%±0.4%。結(jié)論腺病毒載體能更有效地將外源基因?qū)攵伱?xì)胞內(nèi)表達(dá),是基因轉(zhuǎn)染耳蝸毛細(xì)胞的理想載體。
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 腺病毒載體 慢病毒載體 電穿孔法 基因轉(zhuǎn)染 內(nèi)耳毛細(xì)胞
【基金】：973及國(guó)家重大研究計(jì)劃(2011CB504506) 國(guó)家自然科學(xué)基金(81100709) 教育部博士點(diǎn)基金博導(dǎo)類計(jì)劃(20120071110077)聯(lián)合資助
【分類號(hào)】：R764
【正文快照】： 噪聲、耳毒性藥物、感染及老化等因素可以造成耳蝸毛細(xì)胞損傷死亡,毛細(xì)胞丟失是感音神經(jīng)性聾的主要原因。哺乳動(dòng)物耳蝸毛細(xì)胞不能自發(fā)再生,一旦毛細(xì)胞損傷死亡將造成永久性耳聾�；蜣D(zhuǎn)染技術(shù)是將目的基因轉(zhuǎn)入靶細(xì)胞的重要方法,通過基因轉(zhuǎn)染內(nèi)耳毛細(xì)胞預(yù)防毛細(xì)胞丟失、促進(jìn)損

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：960740