本文關鍵詞：喉癌線粒體DNA D-loop區(qū)突變的檢測和分析

  更多相關文章： 喉癌 線粒體DNA D-loop 多態(tài)性

【摘要】：目的： 線粒體(mitochondria)是迄今發(fā)現(xiàn)的唯一不依賴核基因組進行復制、轉錄和翻譯的細胞器。近年來，線粒體DNA（mtDNA）的改變與人類腫瘤發(fā)生的關系備受關注，越來越多的研究證明mtDNA的突變與腫瘤的發(fā)生關系密切，尤以D-loop區(qū)的突變率最高。mtDNA D-loop區(qū)位于16024～576bp之間，占全部mtDNA的6％左右，主要負責調(diào)控mtDNA的轉錄和復制。本研究中我們通過檢測與分析喉癌組織中mtDNAD-loop區(qū)突變情況，進而闡述mtDNA D-loop區(qū)的突變與喉癌發(fā)生的關系。 方法： 以吉林大學第二醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科手術治療的40名喉癌患者為研究對象，年齡在45歲-75歲之間，其中男性28例，女性12例，術中切取病人的腫瘤組織及相應的癌旁組織，總計80例標本，置于負80度冰柜凍存?zhèn)溆�，通過提取組織標本的DNA，利用PCR擴增、產(chǎn)物純化和直接測序等技術，，運用美國NCBI數(shù)據(jù)庫的基因序列分析軟件，將腫瘤組織mtDNA D-loop區(qū)序列和癌旁組織的序列與目前公認的劍橋標準序列進行比對(BLAST)，找出mtDNA D-loop區(qū)的高發(fā)突變位點及高頻率的多態(tài)性改變，總結并分析mtDNA D-loop區(qū)突變與喉癌發(fā)生的關系。 結果： 在40例喉癌患者中，有18例發(fā)生突變，突變率是45％，突變多集中在HVⅠ區(qū)，突變的類型主要表現(xiàn)為單個堿基的替換或單個堿基的插入和缺失，發(fā)現(xiàn)20個微衛(wèi)星不穩(wěn)定現(xiàn)象，主要集中在D310區(qū)，共發(fā)現(xiàn)多態(tài)性改變102個，單個標本最多發(fā)現(xiàn)多態(tài)性改變位點8個。 結論： 喉癌組織mtDNA突變率明顯高于正常組織，喉癌mtDNA D-loop區(qū)具有高度的多態(tài)性和突變性，對mtDNA D-loop區(qū)突變的檢測有望應用于腫瘤的早期診斷。
【關鍵詞】：喉癌 線粒體DNA D-loop 多態(tài)性
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R739.65
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 第1章 引言11-13
• 第2章 文獻綜述13-19
• 2.1 綜述一線粒體 DNA 及 D-LOOP 區(qū)的概述13-15
• 2.2 綜述二線粒體 DNA D-LOOP 區(qū)突變與腫瘤的關系的研究進展15-17
• 2.3 綜述三線粒體 DNA D-LOOP 區(qū)突變對腫瘤細胞表型的影響17-19
• 第3章 資料與方法19-27
• 3.1 材料19-20
• 3.1.1 喉癌組織及癌旁組織標本19
• 3.1.2 試劑及來源19
• 3.1.3 實驗所需的主要儀器及設備19-20
• 3.2 實驗方法20-22
• 3.2.1 喉癌組織線粒體 DNA 的提取20-21
• 3.2.2 引物的設計與合成21
• 3.2.3 PCR 反應21
• 3.2.4 PCR 產(chǎn)物的電泳21
• 3.2.5 基因測序21-22
• 3.3 結果22-27
• 3.3.1 mtDNA PCR 產(chǎn)物擴增結果22
• 3.3.2 測序結果及分析22-27
• 第4章 討論27-30
• 第5章 結論30-31
• 參考文獻31-36
• 作者簡介及在學期間所取得的科研成果36-37
• 致謝37

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳道楨,薛文群,楊幼易,耿金花,陸以農(nóng),陸肖瑋,王峻峰,印永祥,孟西娜;宮頸癌線粒體DNA D-Loop區(qū)基因突變的研究[J];腫瘤;2005年04期

本文編號：926143