本文關(guān)鍵詞：Notch信號通路在人角膜內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)及參與調(diào)控EnMT的初步研究

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【摘要】：目的：檢測Notch信號通路受/配體、下游靶基因Hes1在正常人角膜內(nèi)皮細(xì)胞（hCECs）的表達(dá)情況，并初步探索其參與調(diào)控角膜內(nèi)皮細(xì)胞間質(zhì)化（EnMT）的可能性，尋找調(diào)控角膜內(nèi)皮細(xì)胞分化的新途徑。 方法：取正常人角膜供體材料，分離角膜后彈力層及內(nèi)皮細(xì)胞層，予以4％多聚甲醛固定，通過wholemount免疫熒光染色檢測Notch信號通路受/配體、下游靶基因Hes1在正常人角膜內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)情況；分組培養(yǎng)人角膜內(nèi)皮細(xì)胞，設(shè)置實(shí)驗(yàn)組（加入DAPT10uM）以及空白對照組（不加入DAPT），通過免疫熒光法及RT-PCR檢測Notch下游靶基因Hes1與α-SMA在體外培養(yǎng)細(xì)胞中的表達(dá)情況，探索其表達(dá)及通路激活過程與角膜內(nèi)皮細(xì)胞分化之間的關(guān)系。 結(jié)果： （1）免疫熒光染色證實(shí)除Jagged1外，Notch信號通路受/配體在正常人角膜內(nèi)皮層表達(dá)均呈陽性，但分布的情況不一；Notch信號靶基因Hes1在細(xì)胞胞漿表達(dá)。 （2）體外培養(yǎng)人角膜內(nèi)皮細(xì)胞中，DAPT（+）組細(xì)胞形態(tài)趨于六邊形，免疫熒光染色檢測α-SMA（-）；DAPT（-）組細(xì)胞呈成纖維細(xì)胞樣外觀，，免疫熒光染色檢測α-SMA（+）。 （3）免疫熒光染色檢測到DAPT（+）組細(xì)胞中Hes1主要在細(xì)胞胞漿表達(dá)，DAPT（-）組細(xì)胞中Hes1在細(xì)胞胞漿及胞核表達(dá)；RT-PCR檢測Hes1擴(kuò)增條帶，DAPT（+）組Hes1條帶較DAPT（-）組弱。 結(jié)論: （1）Notch信號通路存在于正常人角膜內(nèi)皮細(xì)胞層中，且處于未激活狀態(tài)； （2）體外培養(yǎng)人角膜內(nèi)皮細(xì)胞時(shí)，Notch信號通路被激活； （3）Notch信號通路激活可能參與促進(jìn)人角膜內(nèi)皮細(xì)胞EnMT過程。
【關(guān)鍵詞】：Notch信號通路 角膜內(nèi)皮細(xì)胞 分化
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R772.2
【目錄】：

• 主要縮略語英漢對照表4-5
• 中文摘要5-6
• Abstract6-8
• 前言8-10
• 材料儀器10-12
• 實(shí)驗(yàn)方法12-17
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-21
• 討論21-23
• 結(jié)論23-24
• 參考文獻(xiàn)24-28
• 綜述28-37
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 致謝37

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1 張冬;于占革;;Notch信號通路與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2013年22期

2 孟曉;宋穎;劉云鵬;楊向紅;;大鼠骨髓源內(nèi)皮祖細(xì)胞分化過程N(yùn)otch信號通路活化及欖香烯干預(yù)機(jī)制的探討[J];中華腫瘤防治雜志;2012年07期

3 王t

本文編號：923522