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維生素C與過氧化氫對老年豚鼠耳蝸外毛細胞大電導鈣激活鉀通道電流的影響

發(fā)布時間:2017-09-25 00:05

  本文關鍵詞:維生素C與過氧化氫對老年豚鼠耳蝸外毛細胞大電導鈣激活鉀通道電流的影響


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【摘要】:目的研究過氧化氫(H2O2)及維生素C對老年豚鼠耳蝸外毛細胞大電導鈣激活鉀通道(large conductance Ca2+-activated potassium channels,BKCa channels)電流的影響及其機制。方法采用急性酶分離方法分離25只老年豚鼠耳蝸外毛細胞,以膜片鉗全細胞記錄方式觀察BKCa通道電流(5只豚鼠);記錄到穩(wěn)定、正常的BKCa通道電流后,向新鮮分離貼壁外毛細胞的2ml浴槽的浴液中加入H2O2稀釋液40μl,使浴液中H2O2濃度為4μmol/L,觀察H2O2對BKCa通道電流的影響(5只豚鼠);再分組加入維生素C溶液10、20、40μl(各組5只豚鼠),使浴液中維生素C終濃度分別為25、50、100μg/ml,觀察H2O2和維生素C聯(lián)合作用對BKCa通道電流的影響。結果 1膜片鉗全細胞記錄模式下,記錄到一串幅值較大、快速激活、幾乎不失活的電流,激活電壓大于-40~-30mV,電流隨膜電位的增加而增強,并表現(xiàn)出外向整流的特性;加入BKCa通道特異性阻斷劑伊比利亞毒素(iberiotoxin,IbTX)100nmol/L后,通道活動完全阻斷,證實為BKCa通道電流。2加入H2O2后,用藥3分鐘內,當VT為+50mV時,BKCa通道峰值電流密度最大值從22.09±0.27pA/pF升至43.53±1.09pA/pF,增幅97.06%。H2O24μmol/L+25、50、100μg/ml維生素C時,BKCa通道電流表現(xiàn)濃度依賴性抑制,電流幅值和峰值電流密度隨著維生素C濃度增加而減小,I-V曲線下降,洗脫后仍不能恢復至加藥前正常水平。結論老年豚鼠耳蝸外毛細胞存在氧自由基/BKCa途徑,而維生素C可減輕氧自由基對外毛細胞BKCa通道的影響。
【作者單位】: 瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科;宜賓市第一人民耳鼻咽喉科;
【關鍵詞】大電導鈣激活鉀通道 外毛細胞 氧自由基 維生素C 過氧化氫
【基金】:四川省衛(wèi)生廳科學研究項目(130358)資助
【分類號】:R764
【正文快照】: △四川省衛(wèi)生廳科學研究項目(130358)資助1瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科(瀘州646000);2宜賓市第一人民耳鼻咽喉科of vitamin C to electric current of BKCa channels.Results 1In the whole-cell mode of patch-clamp,the rapidactivation and non-deactivation elec

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