本文關(guān)鍵詞：靶向folr1的脫氧核酶DrzE增加鼻咽癌移植瘤對紫杉醇敏感性的研究

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【摘要】：目的：研究靶向folrl的脫氧核酶DrzE在動物體內(nèi)轉(zhuǎn)染后是否可以增加鼻咽癌裸鼠移植瘤體對紫杉醇的敏感性,并檢測脫氧核酶使用前后鼻咽癌瘤體folrl的表達差異。 方法：培養(yǎng)鼻咽癌細胞系CNE-1及其紫杉醇耐藥細胞CNE-1/taxol,消化后調(diào)整細胞懸液濃度至1×107/ml。將細胞懸液注射至4只裸鼠皮下,待其成瘤直徑達8mm后把瘤體切成小塊,于另外36只裸鼠皮下移植小瘤塊成瘤。瘤體直徑再次達到5mm后,將其中32只裸鼠隨機分為對照組、紫杉醇組、紫杉醇-脫氧核酶組、脫氧核酶組。分別用藥后,觀察靶向folrl的“10-23”型脫氧核酶DrzE.紫杉醇單獨應用和兩者聯(lián)合應用對鼻咽癌移植瘤體的抑制情況,并研究DrzE能否增加瘤體對紫杉醇的敏感性。用藥前后檢測各組瘤體folrl的表達變化。統(tǒng)計學處理：數(shù)據(jù)以均數(shù)和標準差(M±SD)表示,統(tǒng)計學方法采用F檢驗及兩樣本t檢驗,P0.05認為差異有顯著性。 結(jié)果：1、細胞懸液接種法使裸鼠皮下成瘤,有潛伏期,耗時長,平均約45天成瘤,成瘤率低,約56%。新鮮組織塊接種法無明顯潛伏期,約14天成瘤,成瘤率為100%。2、CNE-1瘤體較CNE-1/taxol瘤體生長速度快,給藥前瘤體體積為80.13±24.50mm3,CNE-1/taxol瘤體體積為59.10±18.72mm3,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。3、單用紫杉醇對鼻咽癌CNE-1移植瘤體的生長有抑制作用,而對CNE-1/taxol耐藥瘤體無抑制作用；單用脫氧核酶DrzE對親本及耐藥瘤體均有抑制作用,且對耐藥瘤體的抑制作用顯著與親本瘤體；紫杉醇和脫氧核酶聯(lián)合運用可相對于前兩者,更能顯著抑制移植瘤體的增長。4、PCR法檢測folrl表達的結(jié)果：給藥前CNE-1/taxol移植瘤細胞中folrl的表達量為CNE-1表達量的12.47±0.49倍,給藥后紫杉醇-脫氧核酶組、單用脫氧核酶組CNE-1及CNE-1/taxol移植瘤體folr1表達量均較對照組下降,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。溶解曲線中β-actin.folrl均各只有一個波峰,提示產(chǎn)物特異性強,無雜質(zhì)干擾。 結(jié)論：1、鼻咽癌親本移植瘤體較耐藥瘤體生長快；2、靶向folrl的脫氧核酶DrzE在裸鼠移植瘤體內(nèi)轉(zhuǎn)染成功后可降低腫瘤細胞增殖的速度；3、靶向folr1的脫氧核酶DrzE可增加鼻咽癌耐藥移植瘤體對紫杉醇的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：folr1 鼻咽癌 裸鼠成瘤 脫氧核酶 紫杉醇 耐藥
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R739.63
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 目錄8-10
• 1 前言10-12
• 2 材料與方法12-21
• 2.1 實驗材料12-14
• 2.1.1 細胞株12
• 2.1.2 主要實驗儀器、設備12
• 2.1.3 主要試劑及耗材12-13
• 2.1.4 主要溶液的配置13-14
• 2.1.5 動物14
• 2.2 實驗方法14-20
• 2.2.1 人鼻咽癌細胞系CNE-1及其紫杉醇耐藥系CNE-1/taxol的培養(yǎng)14-15
• 2.2.2 荷瘤裸鼠模型的建立15-16
• 2.2.3 脫氧核酶的準備16
• 2.2.4 隨機分組及給藥治療16-17
• 2.2.5 移植瘤裸鼠實驗指標觀察及標本采集17
• 2.2.6 荷瘤裸鼠實驗數(shù)據(jù)計算17
• 2.2.7 RT-PCR檢測給藥前后folr1的表達變化17-20
• 2.3 統(tǒng)計學處理20-21
• 3 結(jié)果21-27
• 3.1 細胞懸液接種法裸鼠皮下移植瘤生長情況21
• 3.2 新鮮瘤塊移植法裸鼠皮下移植瘤的生長情況21-22
• 3.3 各組裸鼠皮下鼻咽癌瘤體的生長情況22-24
• 3.4 藥物處理前后folr1表達的變化：RT-PCR法24-27
• 4 討論27-31
• 4.1 裸鼠成瘤對鼻咽癌腫瘤耐藥研究的重要性27
• 4.2 鼻咽癌CNE-1細胞株裸鼠成瘤的特點27-28
• 4.2.1 細胞懸液成瘤與新鮮瘤塊成瘤比較27-28
• 4.2.2 鼻咽癌移植瘤體生長速度比較28
• 4.3 用藥后各組移植瘤體抑制率對比28-30
• 4.3.1 紫杉醇對CNE-1/taxol無明顯抑制作用28-29
• 4.3.2 單用靶向folrl的DrzE對CNE-1/taxol瘤體的抑制作用較大29
• 4.3.3 靶向folr1的脫氧核酶可增加鼻咽癌細胞對紫杉醇的敏感性29-30
• 4.4 DrzE在鼻咽癌移植瘤中的轉(zhuǎn)染率較高,效果較好30-31
• 5 結(jié)論31-32
• 參考文獻32-36
• 綜述36-44
• 參考文獻40-44
• 攻讀學位期間主要的研究成果44-45
• 致謝45

【共引文獻】

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本文編號：888165