本文關(guān)鍵詞：靶向folr1的脫氧核酶DrzE增加鼻咽癌移植瘤對(duì)紫杉醇敏感性的研究

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【摘要】：目的：研究靶向folrl的脫氧核酶DrzE在動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染后是否可以增加鼻咽癌裸鼠移植瘤體對(duì)紫杉醇的敏感性,并檢測(cè)脫氧核酶使用前后鼻咽癌瘤體folrl的表達(dá)差異。 方法：培養(yǎng)鼻咽癌細(xì)胞系CNE-1及其紫杉醇耐藥細(xì)胞CNE-1/taxol,消化后調(diào)整細(xì)胞懸液濃度至1×107/ml。將細(xì)胞懸液注射至4只裸鼠皮下,待其成瘤直徑達(dá)8mm后把瘤體切成小塊,于另外36只裸鼠皮下移植小瘤塊成瘤。瘤體直徑再次達(dá)到5mm后,將其中32只裸鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、紫杉醇組、紫杉醇-脫氧核酶組、脫氧核酶組。分別用藥后,觀察靶向folrl的“10-23”型脫氧核酶DrzE.紫杉醇單獨(dú)應(yīng)用和兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)鼻咽癌移植瘤體的抑制情況,并研究DrzE能否增加瘤體對(duì)紫杉醇的敏感性。用藥前后檢測(cè)各組瘤體folrl的表達(dá)變化。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)以均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差(M±SD)表示,統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用F檢驗(yàn)及兩樣本t檢驗(yàn),P0.05認(rèn)為差異有顯著性。 結(jié)果：1、細(xì)胞懸液接種法使裸鼠皮下成瘤,有潛伏期,耗時(shí)長(zhǎng),平均約45天成瘤,成瘤率低,約56%。新鮮組織塊接種法無(wú)明顯潛伏期,約14天成瘤,成瘤率為100%。2、CNE-1瘤體較CNE-1/taxol瘤體生長(zhǎng)速度快,給藥前瘤體體積為80.13±24.50mm3,CNE-1/taxol瘤體體積為59.10±18.72mm3,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。3、單用紫杉醇對(duì)鼻咽癌CNE-1移植瘤體的生長(zhǎng)有抑制作用,而對(duì)CNE-1/taxol耐藥瘤體無(wú)抑制作用；單用脫氧核酶DrzE對(duì)親本及耐藥瘤體均有抑制作用,且對(duì)耐藥瘤體的抑制作用顯著與親本瘤體；紫杉醇和脫氧核酶聯(lián)合運(yùn)用可相對(duì)于前兩者,更能顯著抑制移植瘤體的增長(zhǎng)。4、PCR法檢測(cè)folrl表達(dá)的結(jié)果：給藥前CNE-1/taxol移植瘤細(xì)胞中folrl的表達(dá)量為CNE-1表達(dá)量的12.47±0.49倍,給藥后紫杉醇-脫氧核酶組、單用脫氧核酶組CNE-1及CNE-1/taxol移植瘤體folr1表達(dá)量均較對(duì)照組下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。溶解曲線中β-actin.folrl均各只有一個(gè)波峰,提示產(chǎn)物特異性強(qiáng),無(wú)雜質(zhì)干擾。 結(jié)論：1、鼻咽癌親本移植瘤體較耐藥瘤體生長(zhǎng)快；2、靶向folrl的脫氧核酶DrzE在裸鼠移植瘤體內(nèi)轉(zhuǎn)染成功后可降低腫瘤細(xì)胞增殖的速度；3、靶向folr1的脫氧核酶DrzE可增加鼻咽癌耐藥移植瘤體對(duì)紫杉醇的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：folr1 鼻咽癌 裸鼠成瘤 脫氧核酶 紫杉醇 耐藥
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R739.63
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 目錄8-10
• 1 前言10-12
• 2 材料與方法12-21
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料12-14
• 2.1.1 細(xì)胞株12
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)備12
• 2.1.3 主要試劑及耗材12-13
• 2.1.4 主要溶液的配置13-14
• 2.1.5 動(dòng)物14
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法14-20
• 2.2.1 人鼻咽癌細(xì)胞系CNE-1及其紫杉醇耐藥系CNE-1/taxol的培養(yǎng)14-15
• 2.2.2 荷瘤裸鼠模型的建立15-16
• 2.2.3 脫氧核酶的準(zhǔn)備16
• 2.2.4 隨機(jī)分組及給藥治療16-17
• 2.2.5 移植瘤裸鼠實(shí)驗(yàn)指標(biāo)觀察及標(biāo)本采集17
• 2.2.6 荷瘤裸鼠實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)計(jì)算17
• 2.2.7 RT-PCR檢測(cè)給藥前后folr1的表達(dá)變化17-20
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理20-21
• 3 結(jié)果21-27
• 3.1 細(xì)胞懸液接種法裸鼠皮下移植瘤生長(zhǎng)情況21
• 3.2 新鮮瘤塊移植法裸鼠皮下移植瘤的生長(zhǎng)情況21-22
• 3.3 各組裸鼠皮下鼻咽癌瘤體的生長(zhǎng)情況22-24
• 3.4 藥物處理前后folr1表達(dá)的變化：RT-PCR法24-27
• 4 討論27-31
• 4.1 裸鼠成瘤對(duì)鼻咽癌腫瘤耐藥研究的重要性27
• 4.2 鼻咽癌CNE-1細(xì)胞株裸鼠成瘤的特點(diǎn)27-28
• 4.2.1 細(xì)胞懸液成瘤與新鮮瘤塊成瘤比較27-28
• 4.2.2 鼻咽癌移植瘤體生長(zhǎng)速度比較28
• 4.3 用藥后各組移植瘤體抑制率對(duì)比28-30
• 4.3.1 紫杉醇對(duì)CNE-1/taxol無(wú)明顯抑制作用28-29
• 4.3.2 單用靶向folrl的DrzE對(duì)CNE-1/taxol瘤體的抑制作用較大29
• 4.3.3 靶向folr1的脫氧核酶可增加鼻咽癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇的敏感性29-30
• 4.4 DrzE在鼻咽癌移植瘤中的轉(zhuǎn)染率較高,效果較好30-31
• 5 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-36
• 綜述36-44
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 攻讀學(xué)位期間主要的研究成果44-45
• 致謝45

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 鄧?yán)?劉慶云;劉芳;孫秀華;張陽(yáng);;β-tubulinⅢ在進(jìn)展期胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J];大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年03期

2 孫潔;李志革;;微管解聚蛋白Stathmin與腫瘤相關(guān)性的研究進(jìn)展[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2010年07期

3 譚朝暉;謝麗華;胡紅松;黃妙娟;陳曉紅;楊兵;;葉酸受體α表達(dá)量與大腸癌分化程度的相關(guān)性[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2011年06期

4 張磊;鄭少波;陳玢\~;趙朋朋;劉春曉;;腎細(xì)胞癌及膀胱癌患者血清可溶性α-FR測(cè)定及臨床意義[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2014年05期

5 王俊;張軍;;葉酸在Barrett食管及其相關(guān)腺癌中的作用[J];實(shí)用腫瘤雜志;2014年05期

6 張宏征;謝民強(qiáng);李仲漢;郭靈;;葉酸受體在鼻咽癌組織及細(xì)胞中的表達(dá)與意義[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2009年06期

7 費(fèi)學(xué)寧;張勇;張寶蓮;;葉酸受體亞型高效介導(dǎo)的靶向腫瘤成像和治療[J];中國(guó)科學(xué)基金;2014年01期

8 李炎;劉小海;趙大春;姚勇;王任直;;垂體腺瘤中FRα的表達(dá)與臨床意義[J];西南國(guó)防醫(yī)藥;2014年05期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 劉飛;食管癌差異表達(dá)蛋白的分離鑒定及功能研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

2 孟召偉;核因子κB在未分化甲狀腺癌化療耐藥機(jī)制和治療中的作用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年

3 漆敏;土槿皮乙酸誘導(dǎo)小鼠真皮成纖維L929細(xì)胞有絲分裂災(zāi)變及衰老作用機(jī)制研究[D];沈陽(yáng)藥科大學(xué);2013年

4 馬艷紅;鼻咽癌紫杉醇耐藥中FOLR1相互作用蛋白的篩選及機(jī)制的初步探索[D];中南大學(xué);2013年

5 陳帥君;葉酸受體介導(dǎo)的載順鉑磁性納米pH敏感靶向給藥系統(tǒng)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

6 陳漢;長(zhǎng)循環(huán)靶向性載藥膠束的構(gòu)建及其細(xì)胞水平評(píng)價(jià)[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

7 李炎;垂體腺瘤中Ki-67及葉酸受體α（FRα）的表達(dá)與相關(guān)臨床指標(biāo)關(guān)系研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

8 胡祥龍;腫瘤微環(huán)境響應(yīng)性聚合物藥物載體的構(gòu)筑和納米結(jié)構(gòu)調(diào)控[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2013年

9 于躍;葉酸受體陽(yáng)性的循環(huán)腫瘤細(xì)胞可作為新的肺癌輔助診斷標(biāo)志物[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 張國(guó)藝;基于聚磷酸酯的紫杉醇前藥的合成、表征及性能研究[D];蘇州大學(xué);2013年

2 李亭亭;新型腫瘤靶向磁共振成像造影劑的合成與表征[D];浙江大學(xué);2014年

3 吳雙;季戊四醇類和三羥甲基丙烷類陽(yáng)離子脂質(zhì)體的合成及其基因轉(zhuǎn)染效率評(píng)價(jià)[D];湖南師范大學(xué);2014年

4 杜金童;Class Ⅲ β-tubulin、Sox2和Survivin的表達(dá)對(duì)紫杉類或鉑類聯(lián)合化療治療卵巢癌的臨床影響[D];山東大學(xué);2014年

5 康慧杰;葉酸受體α對(duì)宮頸癌細(xì)胞ERK信號(hào)通路的調(diào)節(jié)作用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2014年

6 張曉金;子宮頸癌細(xì)胞紫杉醇耐藥性的研究與RG3影響NEP基因啟動(dòng)子活性的研究[D];山東大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：888165