本文關(guān)鍵詞：BTG1在喉鱗狀細(xì)胞癌中發(fā)生的作用及分子機制研究

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【摘要】：目的1分析喉鱗狀細(xì)胞癌組織和喉部正常組織中BTG1蛋白表達(dá)水平差異，研究BTG1蛋白在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中表達(dá)水平與喉癌生物學(xué)行為之間的關(guān)系。2研究BTG1基因高表達(dá)對喉癌細(xì)胞的生長增殖、凋亡的影響及其相關(guān)作用機制。探討在喉鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中BTG1的作用及機制，并為BTG1作為預(yù)測喉癌發(fā)生發(fā)展的新分子標(biāo)志物及基因治療的靶點提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。 方法1應(yīng)用免疫組織化學(xué)、Western blot實驗方法檢測70例喉鱗狀細(xì)胞癌組織及35例喉部正常組織中BTG1蛋白的表達(dá)情況。2構(gòu)建pEGFP-N1-BTG1真核表達(dá)質(zhì)粒，培養(yǎng)并轉(zhuǎn)染喉癌Hep-2細(xì)胞，分為實驗組（轉(zhuǎn)染BTG1的Hep-2細(xì)胞）和對照組（轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的Hep-2細(xì)胞）。上述兩組分別應(yīng)用實時熒光定量PCR和Western blot方法鑒定兩組細(xì)胞中BTG1mRNA和BTG1蛋白的表達(dá)水平；MTT實驗檢測轉(zhuǎn)染細(xì)胞的生長增殖能力；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞細(xì)胞周期分布；磷脂酰絲氨酸外翻分析（Annexin V-FITC/PI）實驗測定細(xì)胞早晚期凋亡的情況；Western blot法測定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的細(xì)胞周期調(diào)控蛋白CyclinD1、抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)水平。 結(jié)果1BTG1與喉癌生物學(xué)行為的關(guān)系：喉癌患者中BTG1蛋白表達(dá)的陽性率明顯低于正常組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。在70例喉鱗狀細(xì)胞癌組織中，BTG1蛋白的表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤所在部位無關(guān)（P＞0.05）；BTG1蛋白的表達(dá)水平與腫瘤局部浸潤深度、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期、組織學(xué)分級呈負(fù)相關(guān)，不同期別間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。2喉癌Hep-2細(xì)胞中實驗組與對照組相比：實驗組細(xì)胞BTG1mRNA與蛋白的表達(dá)水平均顯著提高（0.908±0.086和0.921±0.091vs0.212±0.017和0.308±0.047，P＜0.05）；實驗組細(xì)胞生長速度減慢，細(xì)胞增殖能力降低（P＜0.05）；實驗組細(xì)胞中CyclinD1蛋白表達(dá)水平降低（0.436±0.023vs0.916±0.092，P＜0.05），細(xì)胞周期的G0/G1期細(xì)胞比例升高（85.1±5.2%vs63.8±3.1%，P＜0.05），S期細(xì)胞比例降低（8.3±1.1%vs23.1±1.5%，，P＜0.05）；實驗組細(xì)胞磷脂酰絲氨酸外翻增加，細(xì)胞早期凋亡顯著（10.3±1.1%vs2.8±0.3%，P＜0.05），細(xì)胞中抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)水平降低（0.167±0.009vs0.834±0.084，P＜0.05）。 結(jié)論1喉癌組織比正常組織BTG1蛋白的表達(dá)陽性率明顯降低，其表達(dá)水平與腫瘤局部浸潤深度、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、組織學(xué)分級呈負(fù)相關(guān)，提示BTG1在喉鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生和發(fā)展中可能起著重要的生物學(xué)作用。2BTG1高表達(dá)能明顯抑制喉癌Hep-2細(xì)胞的增殖、誘導(dǎo)凋亡， BTG1反向調(diào)節(jié)細(xì)胞周期蛋白CyclinD1、抗凋亡蛋白Bcl-2進(jìn)而能調(diào)控細(xì)胞周期阻滯、促進(jìn)細(xì)胞凋亡可能是其具體的發(fā)生機制之一。
【關(guān)鍵詞】：喉癌 BTG1 增殖 凋亡 細(xì)胞周期
【學(xué)位授予單位】：河北聯(lián)合大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R739.65
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文縮略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 研究部分13-45
• 1.1 BTG1 蛋白在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及與其臨床特征的關(guān)系13-23
• 1.1.1 材料與方法13-18
• 1.1.2 結(jié)果18-20
• 1.1.3 討論20-23
• 1.2 BTG1 對喉癌 Hep-2 細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其機制的研究23-41
• 1.2.1 材料與方法23-31
• 1.2.2 結(jié)果31-37
• 1.2.3 討論37-41
• 1.3 結(jié)論41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 第3章 綜述 BTG1 與腫瘤關(guān)系的研究45-53
• 3.1 BTG1 的發(fā)現(xiàn)45
• 3.2 BTG1 與 BTG/TOB45-46
• 3.3 BTG1 與腫瘤46
• 3.4 BTG1 的生物學(xué)特性46-50
• 3.4.1 BTG1 促進(jìn)細(xì)胞分化46-47
• 3.4.2 BTG1 抑制腫瘤細(xì)胞增殖及調(diào)控細(xì)胞周期47-48
• 3.4.3 BTG1 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡48
• 3.4.4 BTG1 抑制腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移48-50
• 3.5 前景與展望50
• 參考文獻(xiàn)50-53
• 附錄 喉癌分期53-55
• 致謝55-56
• 導(dǎo)師簡介56-57
• 作者簡介57-58
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集58

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 左敏夏 ,利剛,楊曉東,蘇學(xué)勁;直腸癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移標(biāo)志物的比較研究[J];大腸肛門病外科雜志;2005年02期

本文編號：860694