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奈達(dá)鉑聯(lián)合放射治療對(duì)人鼻咽癌5-8F細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-09-06 14:00

  本文關(guān)鍵詞:奈達(dá)鉑聯(lián)合放射治療對(duì)人鼻咽癌5-8F細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究


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【摘要】:目的: 通過體外實(shí)驗(yàn)研究奈達(dá)鉑單獨(dú)或聯(lián)合X-射線對(duì)人鼻咽癌5-8F細(xì)胞的細(xì)胞增殖動(dòng)力學(xué)影響以及作用機(jī)制,初步探討奈達(dá)鉑作為放射增敏藥物的可能性,為臨床上鼻咽癌放射增敏治療提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法: 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用MTT法檢測(cè)奈達(dá)鉑對(duì)人鼻咽癌5-8F細(xì)胞的細(xì)胞增殖動(dòng)力學(xué)影響,并求得IC10為后續(xù)試驗(yàn)提供適合藥物濃度;利用細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)首先得到低劑量奈達(dá)鉑對(duì)人鼻咽癌5-8F細(xì)胞的最佳照射時(shí)間(T),進(jìn)而根據(jù)合適藥物濃度和最佳照射時(shí)間再次進(jìn)行細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn),并根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)繪制細(xì)胞生存曲線,求得放射敏感性相關(guān)參數(shù),觀察奈達(dá)鉑的放射敏感性;應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)觀察低劑量奈達(dá)鉑單獨(dú)或聯(lián)合X-射線對(duì)人鼻咽癌5-8F細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響,運(yùn)用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)低劑量奈達(dá)鉑單獨(dú)或聯(lián)合X-射線對(duì)人鼻咽癌5-8F細(xì)胞凋亡蛋白Fas表達(dá)的影響,以探討其作用機(jī)制。 結(jié)果: 1.MTT法結(jié)果顯示:分別用不同濃度奈達(dá)鉑(1、2、4、8、16、32μg/ml)作用人鼻咽癌5-8F細(xì)胞24h后,細(xì)胞增殖被不同程度的抑制,增值抑制率分別為11.40%、30.63%、38.01%、65.68%、73.43%、81.92%,隨藥物濃度增加及藥物作用時(shí)間延長(zhǎng),奈達(dá)鉑對(duì)人鼻咽癌5-8F細(xì)胞增殖抑制作用增強(qiáng)。根據(jù)細(xì)胞增殖抑制率,應(yīng)用SPSS17.0軟件求得奈達(dá)鉑對(duì)人鼻咽癌5-8F細(xì)胞的IC50為5.640μg/ml,IC10為1.128μg/ml。 2.細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:最佳照射時(shí)間T為24小時(shí),根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用Sigmaplot12.0軟件繪制細(xì)胞生存曲線,求得放射敏感性相關(guān)參數(shù)(Do、Dq、N):單純放療組的參數(shù)分別為:1.453Gy、1.216Gy、2.289;1μg/ml奈達(dá)鉑+放療組分別為:DO值為0.947Gy、Dq值為0.701Gy、N值為2.087,根據(jù)公式計(jì)算放射增敏比(SER),1μg/ml奈達(dá)鉑+放療組放射增敏比(SER)SERD0、SERDq、SERSF2分別為1.537、1.690、2.068。 3.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示:(1)X-射線(OGy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)單純或聯(lián)合奈達(dá)鉑作用鼻咽癌5-8F細(xì)胞后,其細(xì)胞凋亡情況改變應(yīng)用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,奈達(dá)鉑+放療組細(xì)胞凋亡率較單純放療組顯著升高(P0.05),。(2)X-射線(OGy、2Gy、4Gy、6Gy)單純或聯(lián)合奈達(dá)鉑作用鼻咽癌5-8F細(xì)胞后,其細(xì)胞周期G2/M期分布改變應(yīng)用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,奈達(dá)鉑+放療組細(xì)胞凋亡率較單純放療組顯著升高(P0.05)。 4.細(xì)胞免疫化學(xué)染色結(jié)果顯示:X-射線(OGy、2Gy、4Gy、6Gy)單純或聯(lián)合奈達(dá)鉑作用鼻咽癌5-8F細(xì)胞后,其細(xì)胞Fas蛋白表達(dá)情況應(yīng)用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,奈達(dá)鉑+放療組細(xì)胞Fas蛋白陽性表達(dá)率較單純放療組顯著上調(diào)(P0.05)。 結(jié)論: 1.低劑量奈達(dá)鉑可提高人鼻咽癌5-8F細(xì)胞的放射敏感性,其機(jī)制可能與低劑量奈達(dá)鉑可上調(diào)細(xì)胞內(nèi)的Fas蛋白表達(dá),從而誘導(dǎo)人鼻咽癌5-8F細(xì)胞的凋亡,改變細(xì)胞周期分布有關(guān); 2.臨床治療中,奈達(dá)鉑有可能會(huì)成為治療鼻咽癌的放射增敏劑。
【關(guān)鍵詞】:奈達(dá)鉑 放療敏感性 人鼻咽癌5-8F細(xì)胞 Fas蛋白
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R739.63;R730.55
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-11
  • 1 前言11-15
  • 2 材料和方法15-22
  • 2.1 材料裝置15-16
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法16-22
  • 2.2.1 鼻咽癌細(xì)胞株5-8F的細(xì)胞培養(yǎng)及受試細(xì)胞準(zhǔn)備16
  • 2.2.2 藥物和試劑準(zhǔn)備16-17
  • 2.2.3 MTT比色法檢測(cè)5-8F細(xì)胞增殖抑制17
  • 2.2.4 最佳照射時(shí)間T的測(cè)定17-18
  • 2.2.5 克隆形成試驗(yàn)檢測(cè)放射敏感性18-19
  • 2.2.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期19-21
  • 2.2.7 免疫細(xì)胞化學(xué)21
  • 2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析21-22
  • 3 結(jié)果22-34
  • 3.1 MTT比色法檢測(cè)5-8F細(xì)胞增殖抑制率22-23
  • 3.2 最佳照射時(shí)間T的測(cè)定23-24
  • 3.3 克隆形成實(shí)驗(yàn)的結(jié)果24-26
  • 3.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的結(jié)果26-27
  • 3.4.1 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡26-27
  • 3.4.2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布27
  • 3.5 免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)Fas蛋白表達(dá)及結(jié)果27-34
  • 4 討論34-40
  • 4.1 奈達(dá)鉑(Nedapaltin)放射增敏可行性分析35-36
  • 4.2 奈達(dá)鉑(Nedapaltin)放射增敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析36-38
  • 4.2.1 奈達(dá)鉑合適藥物濃度選擇36
  • 4.2.2 最佳照射時(shí)間的選擇36-37
  • 4.2.3 奈達(dá)鉑放射增敏作用實(shí)驗(yàn)37
  • 4.2.4 奈達(dá)鉑放射增敏作用機(jī)制的初步探討37-38
  • 4.3 待探討問題38-40
  • 5 結(jié)論40-41
  • 參考文獻(xiàn)41-45
  • 綜述45-60
  • 參考文獻(xiàn)55-60
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷60-61
  • 致謝61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 林少俊;陳傳本;韓露;鄭葳;陳梅;潘建基;;鼻咽癌調(diào)強(qiáng)放射治療230例初步結(jié)果[J];福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2007年01期

2 常方方;高明;周云;;奧沙利鉑聯(lián)合順鉑對(duì)體外培養(yǎng)BGC-823細(xì)胞增殖及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表達(dá)的影響[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年02期

3 張t,

本文編號(hào):803527


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