發(fā)布時間：2017-09-06 14:00

  本文關(guān)鍵詞：奈達鉑聯(lián)合放射治療對人鼻咽癌5-8F細胞作用的實驗研究

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【摘要】：目的： 通過體外實驗研究奈達鉑單獨或聯(lián)合X-射線對人鼻咽癌5-8F細胞的細胞增殖動力學影響以及作用機制,初步探討奈達鉑作為放射增敏藥物的可能性,為臨床上鼻咽癌放射增敏治療提供實驗基礎(chǔ)。 方法： 本實驗應用MTT法檢測奈達鉑對人鼻咽癌5-8F細胞的細胞增殖動力學影響,并求得IC10為后續(xù)試驗提供適合藥物濃度；利用細胞克隆形成實驗首先得到低劑量奈達鉑對人鼻咽癌5-8F細胞的最佳照射時間(T),進而根據(jù)合適藥物濃度和最佳照射時間再次進行細胞克隆形成實驗,并根據(jù)實驗數(shù)據(jù)繪制細胞生存曲線,求得放射敏感性相關(guān)參數(shù),觀察奈達鉑的放射敏感性；應用流式細胞術(shù)觀察低劑量奈達鉑單獨或聯(lián)合X-射線對人鼻咽癌5-8F細胞周期及細胞凋亡的影響,運用免疫細胞化學法檢測低劑量奈達鉑單獨或聯(lián)合X-射線對人鼻咽癌5-8F細胞凋亡蛋白Fas表達的影響,以探討其作用機制。 結(jié)果： 1.MTT法結(jié)果顯示：分別用不同濃度奈達鉑(1、2、4、8、16、32μg/ml)作用人鼻咽癌5-8F細胞24h后,細胞增殖被不同程度的抑制,增值抑制率分別為11.40%、30.63%、38.01%、65.68%、73.43%、81.92%,隨藥物濃度增加及藥物作用時間延長,奈達鉑對人鼻咽癌5-8F細胞增殖抑制作用增強。根據(jù)細胞增殖抑制率,應用SPSS17.0軟件求得奈達鉑對人鼻咽癌5-8F細胞的IC50為5.640μg/ml,IC10為1.128μg/ml。 2.細胞克隆形成實驗結(jié)果顯示：最佳照射時間T為24小時,根據(jù)實驗數(shù)據(jù)應用Sigmaplot12.0軟件繪制細胞生存曲線,求得放射敏感性相關(guān)參數(shù)(Do、Dq、N):單純放療組的參數(shù)分別為：1.453Gy、1.216Gy、2.289;1μg/ml奈達鉑+放療組分別為：DO值為0.947Gy、Dq值為0.701Gy、N值為2.087,根據(jù)公式計算放射增敏比(SER),1μg/ml奈達鉑+放療組放射增敏比(SER)SERD0、SERDq、SERSF2分別為1.537、1.690、2.068。 3.流式細胞術(shù)檢測結(jié)果顯示：(1)X-射線(OGy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)單純或聯(lián)合奈達鉑作用鼻咽癌5-8F細胞后,其細胞凋亡情況改變應用SPSS17.0進行統(tǒng)計分析,奈達鉑+放療組細胞凋亡率較單純放療組顯著升高(P0.05),。(2)X-射線(OGy、2Gy、4Gy、6Gy)單純或聯(lián)合奈達鉑作用鼻咽癌5-8F細胞后,其細胞周期G2/M期分布改變應用SPSS17.0進行統(tǒng)計分析,奈達鉑+放療組細胞凋亡率較單純放療組顯著升高(P0.05)。 4.細胞免疫化學染色結(jié)果顯示：X-射線(OGy、2Gy、4Gy、6Gy)單純或聯(lián)合奈達鉑作用鼻咽癌5-8F細胞后,其細胞Fas蛋白表達情況應用SPSS17.0進行統(tǒng)計分析,奈達鉑+放療組細胞Fas蛋白陽性表達率較單純放療組顯著上調(diào)(P0.05)。 結(jié)論： 1.低劑量奈達鉑可提高人鼻咽癌5-8F細胞的放射敏感性,其機制可能與低劑量奈達鉑可上調(diào)細胞內(nèi)的Fas蛋白表達,從而誘導人鼻咽癌5-8F細胞的凋亡,改變細胞周期分布有關(guān)； 2.臨床治療中,奈達鉑有可能會成為治療鼻咽癌的放射增敏劑。
【關(guān)鍵詞】：奈達鉑 放療敏感性 人鼻咽癌5-8F細胞 Fas蛋白
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R739.63;R730.55
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 1 前言11-15
• 2 材料和方法15-22
• 2.1 材料裝置15-16
• 2.2 實驗方法16-22
• 2.2.1 鼻咽癌細胞株5-8F的細胞培養(yǎng)及受試細胞準備16
• 2.2.2 藥物和試劑準備16-17
• 2.2.3 MTT比色法檢測5-8F細胞增殖抑制17
• 2.2.4 最佳照射時間T的測定17-18
• 2.2.5 克隆形成試驗檢測放射敏感性18-19
• 2.2.6 流式細胞儀檢測細胞凋亡和細胞周期19-21
• 2.2.7 免疫細胞化學21
• 2.2.8 統(tǒng)計學分析21-22
• 3 結(jié)果22-34
• 3.1 MTT比色法檢測5-8F細胞增殖抑制率22-23
• 3.2 最佳照射時間T的測定23-24
• 3.3 克隆形成實驗的結(jié)果24-26
• 3.4 流式細胞儀檢測細胞凋亡和細胞周期的結(jié)果26-27
• 3.4.1 流式細胞儀檢測細胞凋亡26-27
• 3.4.2 流式細胞儀檢測細胞周期分布27
• 3.5 免疫細胞化學染色檢測Fas蛋白表達及結(jié)果27-34
• 4 討論34-40
• 4.1 奈達鉑(Nedapaltin)放射增敏可行性分析35-36
• 4.2 奈達鉑(Nedapaltin)放射增敏實驗結(jié)果分析36-38
• 4.2.1 奈達鉑合適藥物濃度選擇36
• 4.2.2 最佳照射時間的選擇36-37
• 4.2.3 奈達鉑放射增敏作用實驗37
• 4.2.4 奈達鉑放射增敏作用機制的初步探討37-38
• 4.3 待探討問題38-40
• 5 結(jié)論40-41
• 參考文獻41-45
• 綜述45-60
• 參考文獻55-60
• 個人簡歷60-61
• 致謝61

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 林少俊;陳傳本;韓露;鄭葳;陳梅;潘建基;;鼻咽癌調(diào)強放射治療230例初步結(jié)果[J];福建醫(yī)科大學學報;2007年01期

2 常方方;高明;周云;;奧沙利鉑聯(lián)合順鉑對體外培養(yǎng)BGC-823細胞增殖及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表達的影響[J];鄭州大學學報(醫(yī)學版);2009年02期

3 張t，

本文編號：803527