大鼠外傷性白內(nèi)障晶狀體上皮細胞中TGF-β1及ICAM-1表達的研究
發(fā)布時間:2017-09-02 22:19
本文關鍵詞:大鼠外傷性白內(nèi)障晶狀體上皮細胞中TGF-β1及ICAM-1表達的研究
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【摘要】:目的:外傷性白內(nèi)障的發(fā)展變化是一個比較復雜的生理生化過程,是眾多眼外傷發(fā)展進程中都會存在的情況之一。在某種程度上,外傷性白內(nèi)障與后發(fā)性白內(nèi)障有著大體相同的致病機理,二者客觀上都是對晶狀體的一種創(chuàng)傷刺激過程。因此研究外傷性白內(nèi)障的致病機理不但可以對其預防和診治達到事半功倍的效果,更有意義的是,可以指導防治后發(fā)性白內(nèi)障的發(fā)生,為患者術后保存良好視力起到關鍵性作用。近年來,與白內(nèi)障形成相關的某些細胞因子得到了科學家們的密切關注。轉(zhuǎn)化生長因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)可使晶體上皮細胞發(fā)生異常排列、紡錘形分化并細胞外基質(zhì)(ext ra ce llular matrix,ECM)積聚增厚而致白內(nèi)障樣改變。細胞間粘附分子-1(inter cellular adhesionmolecule-1, ICAM-1)介導多種細胞之間、細胞-ECM之間彼此附著粘連,同時也調(diào)節(jié)細胞生長分化、延伸遷移等生物學行為。本實驗旨在通過觀察TGF-β1和ICAM-1在外傷性白內(nèi)障晶體上皮細胞(1ens epithelial cell,LEC)中的表達狀況,探討二者之間的相聯(lián)性以及它們與白內(nèi)障的發(fā)病關系;為外傷性白內(nèi)障的發(fā)病機理及其一般發(fā)展規(guī)律提供可能性理論依據(jù);為白內(nèi)障的臨床預防與治療提供有效的新方向。 方法:取20只體重為280g±30g健康成年大鼠,雌雄皆可。模型組:均在大鼠左眼人為建立穿透傷性白內(nèi)障動物模型;正常對照組:未穿刺的對側(cè)右眼。術后將大鼠隨機抽取為12h(0.5d),24h(1d),72h(3d),168h(7d)4個時段組,每組各有5只,仔細察看各組大鼠晶狀體混濁纖維化的程度狀況。通過免疫組化染色法觀察大鼠LEC中ICAM-1的表達變化情況,用同樣的方法觀察TGF-β1的表達情況,比較造模前后各組中二者的含量水平;分析各組LEC內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子β1與ICAM-1的相關性。采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件管理數(shù)據(jù),P<0.05代表具有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果: 1.造模后用裂隙燈觀察各組外傷性白內(nèi)障的發(fā)展情況:對側(cè)眼組大鼠晶狀體始終未見纖維化;模型組晶狀體均出現(xiàn)不一樣程度的混濁,且纖維化程度呈時間依賴性。術后12h(0.5d)僅限于針頭劃傷的地方呈輕微混濁;術后1d混濁面積逐漸擴張,呈淡白色云片狀;術后3d范圍更大且混濁加深,呈白色絮狀混濁及斑片狀混濁;術后5d呈白色凝塊樣大面積混濁。此后白內(nèi)障纖維化進展大致趨于穩(wěn)固不變。 2.采用免疫組織化學染色方法測出各組LEC中TGF-β1、ICAM-1的表達:①TGF-β1的表達情況:正常對側(cè)眼組可見到少數(shù)散在TGF-β1蛋白表達,模型組各時間點TGF-β1較對側(cè)眼組的陽性表達率明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(t0.5d=5.269,t1d=9.610,t3d=20.857,t7d=31.790,每組間均P0.05);在四個時間組中,模型組的TGF-β1表達逐漸增多(F=235.592,P0.05;組間多重比較,各組間P 0.05),此目的因子在對側(cè)眼組中的表達無明顯變化(F=0.565,P0.05)。②ICAM-1的表達情況:對側(cè)眼組沒有發(fā)現(xiàn)目的因子的蛋白染色,,模型組各時間點ICAM-1較對側(cè)眼組的陽性表達率明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(t0.5d=25.332,t1d=32.933,t3d=43.507,t7d=56.482,每組間均P0.05);在四個時間組中,模型組ICAM-1含量逐漸增加(F=92.383,P0.05;組間多重比較,各組間P0.05),而對側(cè)眼組的ICAM-1無明顯變化(F=0.047,P0.05)。 ③經(jīng)線性相關性分析證明,模型組LEC中TGF-β1表達與ICAM-1呈顯著正相關(r=0.863P0.05)。 結(jié)論: 1.外傷性白內(nèi)障病理表現(xiàn)為晶狀體蛋白異常改變以及上皮細胞非正常纖維化生長、延伸和上皮-間充質(zhì)變化。 2.外傷性白內(nèi)障LEC中TGF-β1、ICAM-1的陽性染色均高于對側(cè)眼組,且二者具有明顯相關性。說明當晶狀體受到創(chuàng)傷應激時,促進TGF-β1及ICAM-1產(chǎn)生增多,共同參與外傷性白內(nèi)障的形成及發(fā)展過程。
【關鍵詞】:外傷性白內(nèi)障 轉(zhuǎn)化生長因子β1 晶狀體上皮細胞
【學位授予單位】:大連醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R776.1
【目錄】:
- 摘要7-9
- Abstract9-12
- 前言12-13
- 材料與方法13-17
- 1. 實驗對象13
- 2. 主要試劑13
- 3. 主要儀器13-14
- 4. 動物模型14
- 5. 實驗分組14
- 6. 標本處理14
- 7. 指標測定14-16
- 8. 數(shù)據(jù)分析16-17
- 結(jié)果17-20
- 1. 造模后用裂隙燈觀察各組大鼠單眼外傷性白內(nèi)障晶狀體的形成情況17
- 2. 免疫組化檢結(jié)果17-20
- 討論20-26
- 結(jié)論26-27
- 參考文獻27-29
- 綜述29-37
- 參考文獻35-37
- 致謝37-38
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條
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本文編號:781208
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