本文關(guān)鍵詞：NFBD1在鼻咽癌放射治療中的價值研究

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【摘要】：目的 觀察NFBD1在電離輻射誘導(dǎo)的DNA損傷反應(yīng)中的作用，從而分析NFBD1對鼻咽癌放射敏感性的影響，并初步探討其分子機制。 方法 以慢病毒感染的方法將特異性針對NFBD1基因的shRNA轉(zhuǎn)入鼻咽癌細(xì)胞，并用嘌呤霉素篩選獲得穩(wěn)定表達(dá)的單克隆細(xì)胞，采用FCM、克隆形成及彗星實驗檢測抑制NFBD1聯(lián)合電離輻射對鼻咽癌細(xì)胞放射敏感性的影響，用免疫熒光、激光共聚焦及Western blot檢測抑制NFBD1對電離輻射誘導(dǎo)的DNA損傷修復(fù)方式的影響，并初步探索其分子機制。 結(jié)果 NFBD1-shRNA慢病毒載體感染后，，鼻咽癌細(xì)胞中NFBD1mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯降低。沉默NFBD1聯(lián)合電離輻射明顯提高了細(xì)胞的凋亡率及有效抑制細(xì)胞的生長（p0.05），并導(dǎo)致G2/M checkpoint的失活，彗星實驗顯示沉默NFBD1延遲了電離輻射誘導(dǎo)的DNA損失修復(fù)，而免疫熒光結(jié)果表明沉默NFBD1抑制了電離輻射誘導(dǎo)的非同源末端鏈接和同源重組修復(fù)方式，沉默NFBD1也明顯降低了電離輻射誘導(dǎo)的γ-H2AX、p-ATM、Rad51、DNA-PKcs蛋白表達(dá)。 結(jié)論采用慢病毒感染的方法靶向抑制NFBD1基因可穩(wěn)定沉默NFBD1的表達(dá)，沉默NFBD1基因聯(lián)合電離輻射可提高鼻咽癌細(xì)胞的放射敏感性、G2/M checkpoint失活及延遲DNA損傷修復(fù)，并抑制了非同源末端鏈接和同源重組的修復(fù)方式，其分子機制可能是沉默NFBD1打破了NFBD1、γ-H2AX和p-ATM三者構(gòu)成的正反饋循環(huán)，抑制了DNA損傷信號的放大及傳導(dǎo)，從而提高了鼻咽癌細(xì)胞的放射敏感性。
【關(guān)鍵詞】：鼻咽癌 電離輻射 DNA損傷反應(yīng) RNA干擾
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R739.63
【目錄】：

• 中英縮略語對照5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-14
• 第一部分 沉默 NFBD1 聯(lián)合電離輻射對鼻咽癌細(xì)胞生長、G2/M checkpoint、細(xì)胞 凋亡及 DNA 損傷程度的影響14-34
• 1 材料與方法14-26
• 2 實驗結(jié)果26-30
• 3 討論30-31
• 4 小結(jié)31-32
• 參考文獻32-34
• 第二部分 沉默 NFBD1 引起鼻咽癌細(xì)胞放射敏感性的機制34-43
• 1 材料與方法34-38
• 2 實驗結(jié)果38-40
• 3 討論40-41
• 4 小結(jié)41-42
• 參考文獻42-43
• 全文總結(jié)43-46
• 文獻綜述46-53
• 參考文獻50-53
• 致謝53-54
• 碩士期間發(fā)表的論文54-55

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 鄧偉;黃天壬;陳萬青;張思維;鄭榮壽;利基林;;中國2003—2007年鼻咽癌發(fā)病與死亡分析[J];腫瘤;2012年03期

2 邱志利;曾泉;劉學(xué)良;胡國華;;NFBD1在鼻咽癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2013年02期

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本文編號：762368