本文關鍵詞：分化抑制因子1及其信號通路在中耳膽脂瘤骨質(zhì)破壞中的作用

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【摘要】：研究目的：探討分化抑制因子1（inhibitors of differentiation1,Id1）及其信號通路在中耳膽脂瘤骨質(zhì)破壞中的作用。 研究方法：（1）收集膽脂瘤患者的31例膽脂瘤標本及14例外耳道正常皮膚標本，以免疫組化技術，分析膽脂瘤臨床標本和外耳道正常皮膚標本組織蛋白酶K(CathepsinK,CTSK)表達情況。（2）以免疫印跡法測量臨床膽脂瘤標本中NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR等蛋白表達情況。（3）以Id1基因轉染人角化細胞株Rhek-1A，，建立體外模型。應用細胞消化計數(shù)法觀察Id1基因轉染Rhek-1A細胞后增殖活性的變化。（4）實時定量PCR法觀察轉染后Id1、NF-κB、NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR等mRNA的變化。（5）蛋白印跡法觀察轉染后NF-κB、NFATc1、CathepsinK等表達的變化。 研究結果：（1）CathepsinK主要表達于膽脂瘤組織及外耳道皮膚組織上皮細胞漿。CathepsinK在膽脂瘤組織中陽性表達率為96.8%，明顯高于其在外耳道正常皮膚組織中的陽性表達率50%（P0.01)。（2）臨床膽脂瘤標本中NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR等蛋白均有不同程度表達。（3）Id1基因轉染Rhek-1A細胞后增殖能力明顯提高。（4）實時定量PCR觀察到Id1、NF-κB、NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR在Rhek-Id1細胞的表達分別是Rhek-1A細胞的10.14倍、25.19倍、74.35倍、1.14倍、18.46倍、43.08倍、55.47倍。（5）免疫印跡法觀察到Rhek-Id1細胞Id1、NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR的蛋白表達高于Rhek-1A細胞。 結論：Id1可以引起Rhek-1A細胞過度增生，激活NF-κB通路，上調(diào)細胞轉錄因子c-Fos和NFATc1,促進破骨效應分子TRAP、CTSK、OSCAR等的基因表達，可能參與膽脂瘤骨質(zhì)破壞。
【關鍵詞】：分化抑制因子1(Id1) 中耳膽脂瘤 骨質(zhì)破壞
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R764.21
【目錄】：

• 目錄3-4
• 英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-6
• ABSTRACT6-8
• 前言8-10
• 第一部分 臨床膽脂瘤標本破骨相關信號分子及細胞因子表達情況10-19
• 第一節(jié) 免疫組化（IHC）檢測組織蛋白酶 K 在中耳膽脂瘤上皮的表達10-15
• 1 材料10-11
• 2 實驗方法11-12
• 3 結果12-15
• 第二節(jié) 蛋白印跡檢測破骨相關信號分子及細胞因子在中耳膽脂瘤上皮的表達15-19
• 1 材料15-16
• 2 實驗方法16-18
• 3 結果18-19
• 小結19
• 第二部分 分化抑制因子 1（Id1）及其信號通路在中耳膽脂瘤骨質(zhì)破壞中的作用19-34
• 第一節(jié) Id1 基因轉染人角化細胞 RHEK-1A 后增殖活性改變19-21
• 1 材料19-20
• 2 實驗方法20
• 3 結果20-21
• 第二節(jié) 實時熒光定量 PCR 檢測 Id1 基因轉染人角化細胞株 RHEK-1A 后破骨相關基因表達21-29
• 1 材料21-23
• 2 實驗方法23-25
• 3 結果25-29
• 第三節(jié) 蛋白印跡檢測 Id1 基因轉染人角化細胞株 RHEK-1A 后破骨相關蛋白表達29-33
• 1 材料29-31
• 2 實驗方法31-33
• 3 結果33
• 小結33-34
• 討論34-39
• 結論39-40
• 參考文獻40-44
• 致謝44-45
• 綜述45-52
• 參考文獻51-52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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本文編號：743416