本文關(guān)鍵詞：分化抑制因子1及其信號通路在中耳膽脂瘤骨質(zhì)破壞中的作用

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【摘要】：研究目的：探討分化抑制因子1（inhibitors of differentiation1,Id1）及其信號通路在中耳膽脂瘤骨質(zhì)破壞中的作用。 研究方法：（1）收集膽脂瘤患者的31例膽脂瘤標(biāo)本及14例外耳道正常皮膚標(biāo)本，以免疫組化技術(shù)，分析膽脂瘤臨床標(biāo)本和外耳道正常皮膚標(biāo)本組織蛋白酶K(CathepsinK,CTSK)表達(dá)情況。（2）以免疫印跡法測量臨床膽脂瘤標(biāo)本中NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR等蛋白表達(dá)情況。（3）以Id1基因轉(zhuǎn)染人角化細(xì)胞株Rhek-1A，，建立體外模型。應(yīng)用細(xì)胞消化計(jì)數(shù)法觀察Id1基因轉(zhuǎn)染Rhek-1A細(xì)胞后增殖活性的變化。（4）實(shí)時(shí)定量PCR法觀察轉(zhuǎn)染后Id1、NF-κB、NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR等mRNA的變化。（5）蛋白印跡法觀察轉(zhuǎn)染后NF-κB、NFATc1、CathepsinK等表達(dá)的變化。 研究結(jié)果：（1）CathepsinK主要表達(dá)于膽脂瘤組織及外耳道皮膚組織上皮細(xì)胞漿。CathepsinK在膽脂瘤組織中陽性表達(dá)率為96.8%，明顯高于其在外耳道正常皮膚組織中的陽性表達(dá)率50%（P0.01)。（2）臨床膽脂瘤標(biāo)本中NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR等蛋白均有不同程度表達(dá)。（3）Id1基因轉(zhuǎn)染Rhek-1A細(xì)胞后增殖能力明顯提高。（4）實(shí)時(shí)定量PCR觀察到Id1、NF-κB、NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR在Rhek-Id1細(xì)胞的表達(dá)分別是Rhek-1A細(xì)胞的10.14倍、25.19倍、74.35倍、1.14倍、18.46倍、43.08倍、55.47倍。（5）免疫印跡法觀察到Rhek-Id1細(xì)胞Id1、NFATc1、c-Fos、CathepsinK、TRAP、OSCAR的蛋白表達(dá)高于Rhek-1A細(xì)胞。 結(jié)論：Id1可以引起Rhek-1A細(xì)胞過度增生，激活NF-κB通路，上調(diào)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子c-Fos和NFATc1,促進(jìn)破骨效應(yīng)分子TRAP、CTSK、OSCAR等的基因表達(dá)，可能參與膽脂瘤骨質(zhì)破壞。
【關(guān)鍵詞】：分化抑制因子1(Id1) 中耳膽脂瘤 骨質(zhì)破壞
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R764.21
【目錄】：

• 目錄3-4
• 英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-6
• ABSTRACT6-8
• 前言8-10
• 第一部分 臨床膽脂瘤標(biāo)本破骨相關(guān)信號分子及細(xì)胞因子表達(dá)情況10-19
• 第一節(jié) 免疫組化（IHC）檢測組織蛋白酶 K 在中耳膽脂瘤上皮的表達(dá)10-15
• 1 材料10-11
• 2 實(shí)驗(yàn)方法11-12
• 3 結(jié)果12-15
• 第二節(jié) 蛋白印跡檢測破骨相關(guān)信號分子及細(xì)胞因子在中耳膽脂瘤上皮的表達(dá)15-19
• 1 材料15-16
• 2 實(shí)驗(yàn)方法16-18
• 3 結(jié)果18-19
• 小結(jié)19
• 第二部分 分化抑制因子 1（Id1）及其信號通路在中耳膽脂瘤骨質(zhì)破壞中的作用19-34
• 第一節(jié) Id1 基因轉(zhuǎn)染人角化細(xì)胞 RHEK-1A 后增殖活性改變19-21
• 1 材料19-20
• 2 實(shí)驗(yàn)方法20
• 3 結(jié)果20-21
• 第二節(jié) 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測 Id1 基因轉(zhuǎn)染人角化細(xì)胞株 RHEK-1A 后破骨相關(guān)基因表達(dá)21-29
• 1 材料21-23
• 2 實(shí)驗(yàn)方法23-25
• 3 結(jié)果25-29
• 第三節(jié) 蛋白印跡檢測 Id1 基因轉(zhuǎn)染人角化細(xì)胞株 RHEK-1A 后破骨相關(guān)蛋白表達(dá)29-33
• 1 材料29-31
• 2 實(shí)驗(yàn)方法31-33
• 3 結(jié)果33
• 小結(jié)33-34
• 討論34-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 致謝44-45
• 綜述45-52
• 參考文獻(xiàn)51-52

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：743416