多西環(huán)素對堿燒傷大鼠角膜組織中NF-κB和Bcl-2、Bax表達(dá)的影響
本文關(guān)鍵詞:多西環(huán)素對堿燒傷大鼠角膜組織中NF-κB和Bcl-2、Bax表達(dá)的影響
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【摘要】:目的:通過建立SD大鼠角膜堿燒傷模型,研究多西環(huán)素作用于堿燒傷大鼠角膜組織后核因子NF-κB (nuclear factor kappa B)和抗凋亡因子Bcl-2、促凋亡因子Bax的表達(dá)情況及相互關(guān)系,探索多西環(huán)素誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞凋亡的機(jī)制,為多西環(huán)素在大鼠堿燒傷中的應(yīng)用提供了一定的依據(jù)和基礎(chǔ)。 方法:使用自制模具建立SD大鼠一側(cè)眼角膜堿燒傷動物模型,以0.3%多西環(huán)素眼液滴眼為實(shí)驗(yàn)組,以0.1%地塞米松眼液滴眼為陽性對照組,以眼液溶媒滴眼為陰性對照組。于燒傷后3天、7天、14天、21天分別隨機(jī)取4只大鼠,麻醉處死后取下燒傷側(cè)角膜組織,一半角膜組織進(jìn)行RNA提取,逆轉(zhuǎn)錄成cDNA后行RT-PCR,檢測角膜組織中Bcl-2基因及Bax基因的表達(dá)情況,另一半放入-80℃冰箱保存,各時間點(diǎn)組織標(biāo)本收集完全后進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測角膜組織中NF-κB的表達(dá)情況。 結(jié)果:RT-PCR檢測顯示燒傷后第3天陰性對照組Bcl-2mRNA的相對表達(dá)量為0.87±0.15,第7天為0.91±0.14,第14天為0.99±0.13,第21天為1.06±0.37;第3天陽性對照組Bcl-2mRNA的相對表達(dá)量為0.57±0.35,第7天為0.20±0.06,第14天為0.72±0.12,第21天為1.05±0.86;第3天多西環(huán)素組Bcl-2mRNA的相對表達(dá)量為0.30±0.15,第7天為0.22±0.08,第14天為0.42±0.06,第21天為0.74±0.22;燒傷后3天、7天、14天時多西環(huán)素組Bcl-2基因與陰性對照組相比表達(dá)顯著下降(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;第3天陰性對照組BaxmRNA的相對表達(dá)量為1.02±0.42,第7天為1.13±0.48,第14天為1.03±0.34,第21天為1.09±0.27;第3天陽性對照組BaxmRNA的相對表達(dá)量為0.69±0.48,第7天為0.25±0.16,第14天為0.77±0.07,第21天為0.77±0.34;第3天多西環(huán)素組BaxmRNA的相對表達(dá)量為1.88±0.55,第7天為2.18±0.60,第14天為0.94±0.28,第21天為1.27±0.57;燒傷后3天、7天時多西環(huán)素組Bax基因與陰性對照組相比表達(dá)顯著升高(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;燒傷后3、7天時多西環(huán)素組Bax基因與陽性對照組相比表達(dá)顯著升高(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ELISA檢測顯示燒傷后第3天陰性對照組NF-κB蛋白相對含量為45.87±1.15pg/mL,第7天為47.52±2.34pg/mL,第14天為42.45±3.13pg/mL,第21天為26.74±3.37pg/mL,第3天陽性對照組NF-κB蛋白相對含量為26.57±2.35pg/mL,第7天為18.87±2.34pg/mL,第14天為38.74±3.12pg/mL,第21天為30.47±2.86pg/mL,第3天多西環(huán)素組NF-κB蛋白相對含量為23.30±2.15pg/mL,第7天為24.96±7.14pg/mL,第14天為36.21±2.67pg/mL,第21天為28.39±3.22pg/mL;燒傷后3天、7天時多西環(huán)素組NF-κB蛋白相對含量與陰性對照組相比表達(dá)有顯著下降(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,與陽性對照組各個時間點(diǎn)比較均無顯著改變,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;燒傷后3天、7天時NF-κB蛋白表達(dá)量與Bcl-2mRNA相對表達(dá)量呈明顯正相關(guān)(r=0.746, P0.05; r=0.772, P0.05),第14天、21天時兩者無明顯相關(guān)關(guān)系,統(tǒng)計(jì)學(xué)沒有意義。 結(jié)論:多西環(huán)素作用于堿燒傷大鼠角膜可影響NF-κB、Bcl-2和Bax基因的表達(dá),多西環(huán)素可以抑制NF-κB、Bcl-2的表達(dá),上調(diào)Bax的表達(dá),這可能是多西環(huán)素誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞凋亡,減輕炎癥反應(yīng)的機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】:多西環(huán)素 堿燒傷 角膜 炎癥細(xì)胞 凋亡
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R965;R772.2
【目錄】:
- 中英文對照4-6
- 摘要6-8
- ABSTRACT8-11
- 前言11-14
- 材料與方法14-21
- 結(jié)果21-25
- 討論25-31
- 結(jié)論31-32
- 展望32-34
- 參考文獻(xiàn)34-41
- 綜述41-53
- 參考文獻(xiàn)49-53
- 致謝53
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號:731542
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