本文關(guān)鍵詞：辛伐他汀對大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注中Bcl-2和Bax表達及細胞凋亡的影響

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【摘要】：目的： 1.采用夾閉大鼠右側(cè)頸總動脈的方法,建立視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷模型。觀察缺血再灌注后視網(wǎng)膜各層形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化、Bcl-2(The B-cell leukemia/lymphoma-2)和Bax (Bcl-2-Associated X)的變化趨勢以及視網(wǎng)膜細胞的凋亡情況。 2.初步探討辛伐他汀在大鼠眼部缺血再灌注損傷中的作用,為將來治療眼部缺血再灌注損傷提供新的理論依據(jù)。 方法： 1.采用夾閉頸總動脈的方法造模。選取健康成年SD雄性大鼠165只,數(shù)字表法隨機分為對照(CON)組、模型(MOD)組和藥物(SIM)組,每組55只,每組分4h、8h、16h、24h、48h,總共5個時間點,各時間點11只。模型組、藥物組夾閉右側(cè)頸總動脈,對照組暴露右頸總動脈不夾閉。 2.分別在處理4h、8h、16h、24h、48h后對對照(CON)組、模型(MOD)組和藥物(SIM)組大鼠脫頸處死,制作眼球標本行HE染色觀察視網(wǎng)膜各層形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化,免疫組織化學(xué)染色檢測Bcl-2和Bax的蛋白表達水平,提取視網(wǎng)膜RNA用Real Time RT-PCR方法檢測Bcl-2和Bax mRNA的表達水平,采用Tunel法檢測視網(wǎng)膜各層的細胞凋亡情況。 結(jié)果： 1.HE染色結(jié)果顯示：對照組各層結(jié)構(gòu)無異常。模型組8h時視網(wǎng)膜出現(xiàn)水腫；16h時水腫加重,出現(xiàn)RGCs數(shù)目減少,INL層變��；24h時水腫基本消失,RGCs數(shù)目繼續(xù)減少,INL進一步變��；48h時視網(wǎng)膜變薄。藥物組8h和16h時較模型組視網(wǎng)膜組織水腫減輕；16h、24h及48h和模型組相比,RGCs減少較低,視網(wǎng)膜INL厚度改變不明顯。 2.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示：模型組Bcl-2于4h開始下降,在24h達到最低值,與對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；藥物組各時間點均高于模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。各組相應(yīng)時間點相比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F4,8,16,24,48=8.079,9.005,9.904,35.563,8.810,P0.05)。模型組Bax從4h開始上升,24h達到高峰,與對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；藥物組各時間點均低于模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。各組相應(yīng)時間點相比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F4,8,16,24,48=16.601,13.525,10.303,25.849,13.805,P0.05)。 3. Real Time RT-PCR方法結(jié)果顯示：Bcl-2mRNA在模型組各組均低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；而藥物組各組均高于模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。各組相應(yīng)時間點相比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F4,8,16,24,48=112.934,109.750,3534.800,112.428,128.140,P0.05)。Bax mRNA在模型組各組均高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；而藥物組各組均低于模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。各組相應(yīng)時間點相比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F4,8,16,24,48=74.115,54.504,81.271,243.743,97.163,P0.05)。 4.Tunel法結(jié)果顯示：模型組細胞凋亡指數(shù)從4h開始上升,24h達到高峰,與對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；藥物組低于模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。各組相應(yīng)時間點相比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F4,836,24,48=87.096,232.245,575.564,389.205,771.658,P0.05)。 結(jié)論： 1.本研究采用夾閉頸總動脈的方法成功建立大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注模型：模型組Bcl-2的表達減少,Bax的表達增加,視網(wǎng)膜厚度出現(xiàn)短暫水腫,RGCs數(shù)目減少,INL變薄,凋亡細胞數(shù)目增加。 2.藥物組與模型組相比較,Bcl-2的表達增加,Bax的表達降低,視網(wǎng)膜厚度改變不明顯,RGCs數(shù)目減少較低,凋亡細胞數(shù)目降低。因此,凋亡基因Bcl-2和Bax的比例變化在視網(wǎng)膜缺血再灌注中對于細胞凋亡具有重要的作用。 3.辛伐他汀,可能通過調(diào)節(jié)視網(wǎng)膜缺血再灌注中凋亡基因Bcl-2和Bax的表達來抑制細胞凋亡。這可能成為視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷預(yù)防和治療的新途徑。
【關(guān)鍵詞】：辛伐他汀 再灌注損傷 視網(wǎng)膜 細胞凋亡 Bcl-2/Bax
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R774.1
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-12
• 前言12-14
• 研究現(xiàn)狀、成果12-13
• 研究目的、方法13-14
• 對象與方法14-23
• 1 實驗動物、主要儀器與試劑14-15
• 2 實驗方法15-22
• 3 統(tǒng)計學(xué)處理22-23
• 結(jié)果23-29
• 1 大鼠視網(wǎng)膜組織HE染色結(jié)果23
• 2 Bcl-2和Bax免疫組化檢測結(jié)果23-25
• 3 Bcl-2和Bax實時焚光定量PCR檢測結(jié)果25-27
• 4 Tunel檢測結(jié)果27-29
• 討論29-33
• 結(jié)論33-34
• 論文創(chuàng)新點34-35
• 參考文獻35-38
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明38-39
• 綜述39-52
• 綜述參考文獻49-52
• 致謝52

【引證文獻】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 沈捷;眶內(nèi)及眶外針刺對兔前部缺血性視神經(jīng)病變中Bax及Bcl-2表達影響的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

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本文編號：722992