視網(wǎng)膜光損傷大鼠Bax、BCL-2的表達(dá)變化及烏司他丁干預(yù)的研究
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更多相關(guān)文章: 烏司他丁 大鼠 視網(wǎng)膜光損傷 ONL Bax Bcl-2 免疫組化
【摘要】:目的:1制定較為理想的視網(wǎng)膜紫外線光損傷的SD大鼠模型。2研究烏司他丁對(duì)大鼠視網(wǎng)膜光損傷的保護(hù)作用及機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:選SD大鼠30只,隨機(jī)分為Ⅰ組(正常對(duì)照組),Ⅱ組(紫外線光照對(duì)照組),Ш組為(紫外線光照+烏司他丁組),Ⅱ、Ш組分為光照后3天、7天組,每組各6只大鼠,所有大鼠均在12小時(shí)明12小時(shí)暗的循環(huán)光環(huán)境下適應(yīng)7天,暗適應(yīng)36小時(shí)后Ⅰ組不做任何處理直接處死取材,Ⅱ、Ш組大鼠放入自制光照箱中紫外線照射8小時(shí)(9:00-17:00),光照度為2200±138Lux,光照后放入暗室飼養(yǎng)。光照前3天Ш組在每天光照前30分鐘腹腔內(nèi)注射烏司他丁2000Ou/kg,分別于光照后3天,7天處死大鼠,摘取雙眼球視網(wǎng)膜組織行HE(蘇木素-伊紅)染色,光鏡下觀察視細(xì)胞的結(jié)構(gòu)形態(tài)改變,分析視網(wǎng)膜外核層厚度(out nuclear layer,ONL)變化,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法比較視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡調(diào)控基因Bax、Bcl-2的蛋白表達(dá)及分布變化。 結(jié)果:1:視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)結(jié)果:Ⅰ組大鼠視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)完整,層次清楚,光感受器細(xì)胞內(nèi)外節(jié)排列整齊、規(guī)律,分界清晰。內(nèi)外核層排列緊密,染色均勻,細(xì)胞形態(tài)規(guī)整,Ⅱ組和Ш組隨著時(shí)間的延長(zhǎng),外核層逐漸變薄,內(nèi)外節(jié)腫脹,,核破裂,排列紊亂。2:視網(wǎng)膜外核層厚度檢測(cè);Ⅰ組視網(wǎng)膜外核層厚度最厚,組內(nèi)各時(shí)相差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),Ⅱ組和Ш組視網(wǎng)膜外核層隨著光照時(shí)間的延長(zhǎng),逐漸變薄,組內(nèi)各時(shí)相差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3:免疫組化檢測(cè):Ⅰ組BCL-2染色強(qiáng)陽(yáng)性,Bax染色陰性。Ⅱ組Bax隨光照時(shí)間的延長(zhǎng)染色呈持續(xù)性增強(qiáng),BCL-2隨光照時(shí)間的延長(zhǎng),表達(dá)逐漸減弱,與Ⅰ組比較有顯著性差異(P0.05)。Ш組與Ⅱ組比較有顯著差異,具有上調(diào)凋亡基因BCL-2表達(dá),下調(diào)Bax表達(dá)的作用。 結(jié)論:1、光鏡下提示:視網(wǎng)膜外核層厚度隨光照時(shí)間的延長(zhǎng)而變薄,細(xì)胞核明顯變少,排列稀疏、紊亂,說(shuō)明紫外線光照可導(dǎo)致視網(wǎng)膜光感受器受損,視細(xì)胞凋亡。2、烏司他丁可減輕視網(wǎng)膜光損傷,保護(hù)視細(xì)胞,其機(jī)制可能為,通過(guò)調(diào)節(jié)視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡基因,導(dǎo)致Bax促進(jìn)凋亡蛋白減少,BCL-2抑制凋亡蛋白增多,從而抑制視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡,起到了保護(hù)視網(wǎng)膜光感受器的作用。
【關(guān)鍵詞】:烏司他丁 大鼠 視網(wǎng)膜光損傷 ONL Bax Bcl-2 免疫組化
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R774.1
【目錄】:
- 中英文縮略詞表4-5
- 中文摘要5-7
- Abstract7-9
- 第一章 前言9-11
- 第二章 材料與方法11-16
- 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-22
- 第四章 討論22-27
- 結(jié)論27-28
- 問(wèn)題及展望28-29
- 參考文獻(xiàn)29-33
- 附圖33-38
- 綜述38-46
- 參考文獻(xiàn)43-46
- 讀研期間發(fā)表的文章46-47
- 致謝47
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