發(fā)布時(shí)間：2017-08-21 16:34

  本文關(guān)鍵詞：致白內(nèi)障基因Hsf4b K65R位點(diǎn)突變對(duì)下游熱休克蛋白表達(dá)的影響

  更多相關(guān)文章： 熱休克因子b 晶狀體上皮細(xì)胞 熱休克蛋白 點(diǎn)突變

【摘要】：目的:探討致白內(nèi)障基因熱休克因子4b(Hsf4b)K65R位點(diǎn)突變對(duì)其調(diào)控下游熱休克蛋白(HSP)表達(dá)的影響。方法:采用KOD-Plus-Mutagenesis-Kit試劑盒構(gòu)建pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R賴氨酸突變質(zhì)粒;通過慢病毒感染小鼠晶狀體上皮細(xì)胞mLEC構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)Hsf4b/K65R突變質(zhì)粒的細(xì)胞株;Western blotting檢測(cè)Hsf4b在mLEC K65R點(diǎn)突變細(xì)胞株和野生株中的表達(dá);Western blotting及real-time PCR檢測(cè)K65R點(diǎn)突變后下游蛋白Hsp70、Hsp90、Hsp27和CryAB表達(dá)的變化。結(jié)果:陽(yáng)性克隆PCR及基因測(cè)序證明慢病毒載體pWZL-blast-HAHsf4b/K65R構(gòu)建成功。K65R點(diǎn)突變后不影響Hsf4b在小鼠晶狀體上皮細(xì)胞mLEC中的表達(dá),但能影響下游蛋白CryAB、Hsp27、Hsp70i和Hsp90a的表達(dá)。結(jié)論:pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R載體可用于慢病毒感染穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建。Hsf4b K65R位點(diǎn)突變能顯著影響其對(duì)熱休克蛋白的調(diào)控功能。
【作者單位】： 河南大學(xué)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)與分子免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室抗體藥物河南省工程實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 熱休克因子b 晶狀體上皮細(xì)胞 熱休克蛋白 點(diǎn)突變
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.U1404826) 河南省教育廳項(xiàng)目(No.14B310015) 河南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)科研專項(xiàng)(青年科研人才種子基金)
【分類號(hào)】：R776.1
【正文快照】： 先天性白內(nèi)障是導(dǎo)致兒童失明的主要原因,其主要病理改變?yōu)榫铙w發(fā)育遲緩、晶狀體內(nèi)非透明瘢塊組織形成。熱休克因子4b(heat shock factor 4b,Hsf4b)主要在晶狀體內(nèi)表達(dá),是調(diào)控新生兒期晶狀體發(fā)育的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子,其通過調(diào)控?zé)嵝菘说鞍?heat shock protein,HSP)和晶狀體蛋白的

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 張軍;馬增翼;李淑蓮;劉廣超;胡延忠;;HSF4B通過上調(diào)RhoA和Rac1促進(jìn)晶狀體上皮細(xì)胞遷移[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2013年04期

2 吳明星;吳開力;卞慶寧;姬紅培;王忠浩;劉奕志;;年齡相關(guān)性白內(nèi)障晶體上皮細(xì)胞的基因表達(dá)譜變化的初步分析[J];中國(guó)病理生理雜志;2006年07期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 賈松柏;石晶明;陳，

本文編號(hào)：713993