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體外培養(yǎng)人角膜內(nèi)皮細胞的UVB損傷及抗壞血酸的抗氧化保護作用研究

發(fā)布時間:2017-08-17 07:31

  本文關(guān)鍵詞:體外培養(yǎng)人角膜內(nèi)皮細胞的UVB損傷及抗壞血酸的抗氧化保護作用研究


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【摘要】:以非轉(zhuǎn)染人角膜內(nèi)皮(HCE)細胞系為體外實驗?zāi)P拖到y(tǒng)研究了UVB氧化損傷、Asc抗氧化保護及其分子機理。體外培養(yǎng)的HCE細胞經(jīng)UVB和/或Asc處理后,利用MTT和光鏡對細胞的活力和形態(tài)進行了檢測,利用8-羥基脫氧鳥苷免疫熒光染色對DNA的氧化損傷進行了檢測,并利用二氫乙啶染色對胞內(nèi)活性氧(ROS)的水平進行了檢測。結(jié)果顯示,100~800 mj/cm2的UVB輻射能劑量和時間依賴性地損傷HCE細胞的活力;200 mj/cm2UVB(自然太陽光中的平均輻射劑量)能引起HCE細胞發(fā)生皺縮,并顯著增加細胞的DNA氧化損傷程度及胞內(nèi)ROS水平;而1 mmol/L Asc不僅能顯著增強HCE細胞的活力、促進細胞分裂,而且還能顯著降低200 mj/cm2UVB所引起的DNA氧化損傷及胞內(nèi)ROS水平。綜上所述,UVB通過誘導(dǎo)ROS的產(chǎn)生進而引起DNA氧化損傷,對HCE細胞具有顯著的氧化損傷作用;而Asc能夠通過降低UVB誘導(dǎo)的ROS水平進而保護DNA免受氧化損傷,對HCE細胞的UVB損傷具有一定的抗氧化保護作用。本文研究結(jié)果對于利用Asc等抗氧化保護劑保護HCE細胞免受UVB氧化損傷具有一定的理論指導(dǎo)價值。
【作者單位】: 中國海洋大學(xué)角膜組織工程重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】人角膜內(nèi)皮細胞 UVB 氧化損傷 活性氧 抗壞血酸 抗氧化保護劑
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)資助項目(2006AA02A132)
【分類號】:R772.2
【正文快照】: 0引言人角膜內(nèi)皮細胞(HCE細胞)在成年后便喪失了增殖能力,并以每年0.3%~0.6%的速率死亡[1]。在受到創(chuàng)傷、藥物毒害和氧化損傷后[1-3],HCE細胞的死亡速率加快,密度的過度下降則會引起HCE失代償,輕者會造成視敏度下降,重者則會造成角膜水腫、透明度降低甚至角膜內(nèi)皮盲[1]。其中,

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