本文關(guān)鍵詞：Netrin-1對早期糖尿病視網(wǎng)膜病變大鼠視網(wǎng)膜血管通透性的影響

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【摘要】：目的：觀察外源性netrin-1對糖尿病視網(wǎng)膜病變大鼠視網(wǎng)膜血管通透性的影響并分析可能的作用機制。 方法：健康清潔級雄性SD大鼠100只,隨機分為正常對照組10只,正常+BSS空白對照組10只,糖尿病(DM)組80只。其中,DM組大鼠腹腔注射鏈脲左菌素(STZ)60mg/kg誘導。常規(guī)飼養(yǎng)3個月,每月隨機處死DM大鼠3只,行雙眼視網(wǎng)膜HE染色,當確定大鼠視網(wǎng)膜出現(xiàn)糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)時將剩余DM大鼠玻璃體腔注射5μ1不同濃度netrin-1,并根據(jù)濃度不同分為DR+netrin-1低劑量組(10μg/ml), DR+netrin-1中劑量組(50μg/ml), DR+netrin-1高劑量組(100μg/m1)及DR+BSS對照組,注藥1月后處死全部大鼠。伊文思藍檢測各組大鼠血-視網(wǎng)膜屏障,評估視網(wǎng)膜血管通透性變化；免疫組化方法觀察視網(wǎng)膜膠質(zhì)細胞特異性標記物GFAP的表達情況；熒光定量RT-PCR分析各組視網(wǎng)膜緊密連接蛋白occludin mRNA的表達。 結(jié)果：正常對照組大鼠視網(wǎng)膜GFAP免疫組化見神經(jīng)節(jié)細胞層及神經(jīng)纖維層少量棕黃色顆粒,色淡；而在DR空白對照組中原有的視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層、神經(jīng)節(jié)細胞層棕黃色顆粒顏色加深,染色范圍擴大；玻璃體腔注射netrin-1, GFAP陽性染色顆粒范圍變小進一步減小,顏色變淡。對GFAP行半定量分析發(fā)現(xiàn)：DR+netrin-1注射組較DR空白對照組GFAP表達減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),且netrin-1濃度越高,GFAP陽性表達越低,兩者呈明顯相關(guān)性(P0.05)。netrin-1低劑量組與DR空白對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。netrin-1高劑量組與正常對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。對視網(wǎng)膜血管通透性檢測顯示：DR空白對照組較正常大鼠血管通透性升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),外源性netrin-1可降低視網(wǎng)膜血管的滲透性,但不能使其恢復正常,并且該作用與netrin-1濃度有關(guān)(P0.05)。熒光定量RT-PCR顯示：與正�？瞻讓φ战M比較,DR空白對照組大鼠視網(wǎng)膜occludin mRNA的表達量減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),外源性給予netrin-1后,occludin mRNA的表達升高,與同病程DR空白對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),雖然occludin mRNA表達增多,但仍不能恢復至正常水平(P0.05)。 結(jié)論： 1.大鼠腹腔注射鏈脲左菌素3個月時可誘導出糖尿病視網(wǎng)膜病變動物模型。 2.糖尿病視網(wǎng)膜病變大鼠血-視網(wǎng)膜屏障通透性增高,緊密連接蛋白occludin與血管通透性密切相關(guān)； 3.糖尿病視網(wǎng)膜病變時膠質(zhì)細胞活化增多,其活化狀態(tài)可影響occludin蛋白的表達,進而調(diào)控血管通透性； 4.外源性netrin-1對血-視網(wǎng)膜屏障具有保護作用,并且該作用與其濃度有關(guān),濃度越高對視網(wǎng)膜血管的保護作用越顯著,但不能逆轉(zhuǎn)糖尿病視網(wǎng)膜病變進程； 5. Netrin-1可能是通過抑制膠質(zhì)細胞活化來調(diào)節(jié)緊密連接蛋白occludin的表達進而降低血管通透性的。
【關(guān)鍵詞】：軸突導向因子-1 膠質(zhì)纖維酸性蛋白 緊密連接蛋白 血-視網(wǎng)膜屏障 糖尿病視網(wǎng)膜病變
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R587.2;R774.1
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 第一章 材料與方法10-21
• 1.1 實驗材料10-12
• 1.2 實驗方法12-21
• 第二章 結(jié)果21-25
• 2.1 視網(wǎng)膜 GFAP 免疫組織化學染色結(jié)果21-22
• 2.2 視網(wǎng)膜血管通透性測定22-23
• 2.3 熒光定量RT-PCR結(jié)果23-24
• 2.4 GFAP與occludin蛋白的相關(guān)性分析24-25
• 第三章 討論25-29
• 第四章 結(jié)論29-30
• 參考文獻30-34
• 附錄34-40
• 綜述40-55
• 參考文獻48-55
• 攻讀學位期間的研究成果55-56
• 致謝56-57

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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本文編號：686840