本文關(guān)鍵詞：鼻咽癌細胞中S100A8與S100A9基因的克隆及其質(zhì)粒構(gòu)建和表達

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【摘要】：我們發(fā)現(xiàn)S100A8和S100A9蛋白質(zhì)不僅在鼻咽癌患者血漿中水平高于健康人,而且在鼻咽癌組織及培養(yǎng)細胞中也存在高表達。本研究的目的是在鼻咽癌細胞中克隆S100A8和S100A9基因并構(gòu)建表達質(zhì)粒和在鼻咽癌細胞中表達,為內(nèi)源性S100A8和S100A9蛋白質(zhì)與鼻咽癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系研究奠定基礎(chǔ)。PCR擴增目的基因S100A8和S100A9片段,將其插入載體p Bud CE4.1構(gòu)建S100A8-S100A9-p Bud CE4.1表達質(zhì)粒,經(jīng)雙酶切、PCR及測序鑒定后轉(zhuǎn)染至人鼻咽癌細胞系(CNE1)進行表達并用Real time-PCR及Western Blot進行檢測。PCR、雙酶切和測序結(jié)果顯示,S100A8和S100A9氨基酸序列無變異(S100A8有1個堿基突變),表達質(zhì)粒S100A8-S100A9-p Bud CE4.1構(gòu)建正確。Real Time-PCR和Western Blot結(jié)果顯示,S100A8和S100A9基因在CNE1中正確轉(zhuǎn)錄與表達。成功克隆S100A8和S100A9基因并構(gòu)建S100A8-S100A9-p Bud CE4.1表達質(zhì)粒且可在鼻咽癌細胞中穩(wěn)定表達。
【作者單位】： 廣西壯族自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心;廣西醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;廣西醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)科學(xué)實驗中心;
【關(guān)鍵詞】： 鼻咽癌 質(zhì)粒pBudCE. CNE細胞系 SA SA
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.81260405) 廣西自然科學(xué)基金(No.2011GXNSFA018233) 廣西區(qū)域性高發(fā)腫瘤早期防治研究重點實驗室基金項目(GK2013-A-02-02)共同資助
【分類號】：R739.63
【正文快照】： Cloning,Plasmid Construction and Expression of S100A8 and S100A9 Genein Nasopharyngeal Carcinoma CellsHe Qin1Huang Yuanjiao2,3*Han Zijian3Yan Xuemin2Cai Yan21 Guangxi Zhuang Autonomous Region Center for Disease Control and Prevention,Nanning,530021;2 Dep

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本文編號：552233