本文關(guān)鍵詞：常染色體顯性Y字縫先天性白內(nèi)障的疾病相關(guān)候選基因定位

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【摘要】：[目的]先天性白內(nèi)障是兒童期視力缺損的首要病因之一,其中約8.3-25%的先天性白內(nèi)障發(fā)病與遺傳因素相關(guān)。其遺傳方式可包括常染色體顯性、常染色體隱性及X連鎖遺傳,迄今為止,已發(fā)現(xiàn)與遺傳性先天性白內(nèi)障相關(guān)的25個疾病相關(guān)候選基因和超過35個相關(guān)位點。本實驗對一個典型Y字縫表型的先天性白內(nèi)障家系進行疾病相關(guān)候選基因定位研究。 [方法]本實驗擬研究中國貴州省山區(qū)一個四代的先天性白內(nèi)障家系,共納入該家系成員16人,其中患者8人,男2人,女6人,正常對照成員8人。所有家系成員均接受詳細(xì)病史調(diào)查和眼科檢查,包括視力、裂隙燈、散瞳眼底檢查等,根據(jù)相關(guān)病史、白內(nèi)障手術(shù)史或裂隙燈檢查所見確定成員患病與否。抽取所有成員的外周血樣本,提取基因組DNA,用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴增相關(guān)候選基因的編碼區(qū)及內(nèi)含子、外顯子交界區(qū)序列。擴增產(chǎn)物進行雙向測序,并進行序列分析。利用SWISS-MODEL、DEEPVIEW/SWISS-Pdb、pI/MW、Mutation Taster在線預(yù)測軟件分析突變對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、等電點、分子量和功能等的影響。 [結(jié)果]裂隙燈下檢查該家系表型為典型Y字縫型白內(nèi)障,伴皮質(zhì)散在點狀混濁。分析家系圖,遺傳方式確定為常染色體顯性遺傳。測序結(jié)果發(fā)現(xiàn)MIP基因編碼區(qū)一條等位基因的第337位堿基由C變?yōu)門(c.337CT),導(dǎo)致MIP蛋白在第113位氨基酸處終止編碼(p.R113X),從而使其結(jié)構(gòu)組成由正常的263個氨基酸變?yōu)?12個氨基酸,該突變在8名健康家系成員和100名正常對照者中均未有發(fā)現(xiàn)。利用SWISS-MODEL、DEEPVIEW/SWISS-Pdb軟件構(gòu)建正常以及突變MIP蛋白的三維構(gòu)型,經(jīng)pI/MW預(yù)測,MIP蛋白的理論等電點由正常的8.62變?yōu)?.18,分子量由正常的28121Da減小至11956Da,經(jīng)Mutation Taster在線軟件預(yù)測該突變?yōu)榭赡苤虏〖墑e。 [結(jié)論l本研究首次證實了MIP基因第1外顯子中第337位堿基發(fā)生C_T改變是與Y字縫型先天性白內(nèi)障共分離的無義突變,提示MIP基因是該先天性白內(nèi)障家系的疾病相關(guān)基因,并進一步支持了MIP蛋白在人晶狀體發(fā)育及白內(nèi)障形成過程中具有重要作用的理論。
【關(guān)鍵詞】：先天性白內(nèi)障 MIP基因 無義突變 聚合酶鏈反應(yīng)
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R779.66
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文縮略語9-12
• 前言12-15
• 第一部分 先天性Y字縫白內(nèi)障家系15-21
• 1 前言15
• 2 材料及方法15-16
• 3 結(jié)果16-19
• 4 討論19-20
• 5 小結(jié)20-21
• 第二部分 疾病相關(guān)候選基因定位及突變篩選21-33
• 1 前言21-22
• 2 材料及方法22-28
• 3 結(jié)果28-29
• 4 討論29-32
• 5 小結(jié)32-33
• 第三部分 突變型MIP蛋白的分子生物信息學(xué)研究33-39
• 1 前言33-34
• 2 方法34
• 3 結(jié)果34-37
• 4 討論37-38
• 5 小結(jié)38-39
• 參考文獻39-44
• 綜述44-56
• 參考文獻51-56
• 作者簡歷及在讀期間所取得的科研成果56-57

【共引文獻】

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張凱;β B2晶狀體蛋白C末端最后一個折疊片層的先天性白內(nèi)障相關(guān)突變的致病機制研究[D];浙江大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 苗琦;先天性進行性皮質(zhì)點狀白內(nèi)障相關(guān)候選基因定位及功能研究[D];浙江大學(xué);2014年

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本文編號：548502