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玻璃酸鈉模擬粘蛋白功能和重建生理淚膜的機制研究

發(fā)布時間:2017-07-08 15:18

  本文關鍵詞:玻璃酸鈉模擬粘蛋白功能和重建生理淚膜的機制研究


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【摘要】:目的: 本研究擬分析玻璃酸鈉在兔干眼模型中的治療效能,闡明其模擬粘蛋白功能和重建生理淚膜的機制。 材料和方法: 健康新西蘭兔48只,體重2.5kg-3kg,電腦隨機分為4組,每組12只,選取右眼作為實驗眼,A組為0.1%玻璃酸鈉滴眼液治療組,B組為0.3%玻璃酸鈉滴眼液治療組,C組為生理鹽水對照組,D組為空白對照組,分別頸部皮下注射氫溴酸東莨菪堿注射液1.0mg/kg,4次/天,連續(xù)35天,每天8點、11點、14點和18點進行注射。注藥7天后:A組滴0.1%玻璃酸鈉滴眼液,B組滴0.3%玻璃酸鈉滴眼液,C組滴生理鹽水,連續(xù)28天。注藥第7天、第14天、第21天、第28天和第35天對每組行淚液分泌試驗、淚液蕨類結晶實驗、角結膜麗絲胺綠染色、結膜印記細胞學檢查、淚膜破裂時間(BUT)、角膜熒光素染色。A、B組滴玻璃酸鈉滴眼液5分鐘,30分鐘,60分鐘,90分鐘行角結膜麗絲胺綠染色、角膜熒光素染色和淚液蕨類結晶實驗。分別在第21天和35天氯胺酮過量隨機處死每組6只兔子,取實驗眼眼角膜和結膜組織,免疫熒光技術觀察粘蛋白MUC5AC、MUC1的表達。掃描電子顯微鏡下觀察角膜上皮的再生和修復。 結果: 1.皮下注射氫溴酸東莨菪堿注射液7天后,實驗兔雙眼角膜熒光素鈉染色均陽性,淚液分泌量均低于11.0±1.59mm。 2.與對照組相比,0.1%玻璃酸鈉滴眼液組第一次滴藥90min內角結膜麗絲胺綠染色、角膜熒光素染色和淚液蕨類結晶評分差異均無統(tǒng)計學意義,0.3%玻璃酸鈉滴眼液組30分鐘后麗絲胺綠和熒光素鈉染色評分差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),淚液蕨類結晶實驗90分鐘內評分差異無統(tǒng)計學意義。 3.4組淚液分泌量整個實驗期間差異無統(tǒng)計學意義。 4.與對照組相比,0.1%玻璃酸鈉滴眼液組麗絲胺綠染色評分降低,至第28天,差異有統(tǒng)計學意義(P0.002),第35天統(tǒng)計學無差異。0.3%玻璃酸鈉滴眼液組至第28天,差異有統(tǒng)計學意義(P0.001),并持續(xù)至實驗結束。0.1%玻璃酸鈉滴眼液組和0.3%玻璃酸鈉滴眼液組熒光素鈉染色評分降低,至第21天,差異有統(tǒng)計學意義(PA0.001,PB<0.001),并持續(xù)至實驗結束。 5.與對照組相比,A組淚液蕨類結晶實驗評分降低,至第14天差異有統(tǒng)計學意義(P0.02),并持續(xù)至第28天(P0.01),B組至第14天差異有統(tǒng)計學意義(P0.04),并持續(xù)至實驗結束。 6.與對照組相比,A組和B組淚膜破裂時間(BUT)時間延長,至第28天,差異有統(tǒng)計學意義(PA0.006,PB0.005),,并持續(xù)至實驗結束。 7.與對照組相比,A組和B組結膜印記細胞學,至第35天,差異有統(tǒng)計學意義(PA0.006,PB0.005), 8.與對照組相比, A、B組實驗眼角結膜上皮Muc5Ac、Muc1表達顯著高于C、D組,CD44表達低于C、D組。結論: 玻璃酸鈉滴眼液不僅能夠模擬淚液粘蛋白穩(wěn)定淚膜、保水、保濕、潤滑的作用,而且能促進角膜上皮細胞增殖和損傷修復,減輕角膜上皮炎癥,恢復眼表損傷,從而有效治療干眼。
【關鍵詞】:玻璃酸鈉滴 干眼 粘蛋白
【學位授予單位】:南昌大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R777.34;R-332
【目錄】:
  • 摘要3-5
  • ABSTRACT5-10
  • 第1章 引言10-12
  • 第2章 材料和方法12-18
  • 2.1 實驗材料12-13
  • 2.1.1 實驗動物12
  • 2.1.2 主要試劑和耗材12-13
  • 2.2 實驗方法13-17
  • 2.2.1 動物模型建立13
  • 2.2.2 觀察指標及測試方法13-16
  • 2.2.3 免疫熒光化學法16
  • 2.2.4 掃描電鏡觀察16-17
  • 2.3 統(tǒng)計學分析17-18
  • 第3章 結果18-33
  • 3.1 淚液分泌實驗18-19
  • 3.2 熒光素鈉染色評分19-21
  • 3.3 麗絲胺綠染色評分21-24
  • 3.4 淚膜破裂時間(BUT)24
  • 3.5 結膜印記細胞學檢查24-25
  • 3.6 淚液蕨類結晶25-26
  • 3.7 免疫熒光26-31
  • 3.8 掃描電鏡31-33
  • 第4章 討論33-38
  • 4.1 皮下注射氫溴酸東莨菪堿建立兔干眼模型33-35
  • 4.2 玻璃酸鈉模擬粘蛋白功能和重建生理淚膜的機制研究35-38
  • 4.2.1 保水作用35-36
  • 4.2.2 潤滑作用36
  • 4.2.3 穩(wěn)定淚膜36
  • 4.2.4 對細胞保護作用36-37
  • 4.2.5 促進角膜上皮修復37-38
  • 第5章 全文總結38-39
  • 第6章 問題和展望39-40
  • 致謝40-41
  • 參考文獻41-44
  • 綜述44-52
  • 參考文獻50-52

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