玻璃酸鈉模擬粘蛋白功能和重建生理淚膜的機(jī)制研究
本文關(guān)鍵詞:玻璃酸鈉模擬粘蛋白功能和重建生理淚膜的機(jī)制研究
【摘要】:目的: 本研究擬分析玻璃酸鈉在兔干眼模型中的治療效能,闡明其模擬粘蛋白功能和重建生理淚膜的機(jī)制。 材料和方法: 健康新西蘭兔48只,體重2.5kg-3kg,電腦隨機(jī)分為4組,每組12只,選取右眼作為實(shí)驗(yàn)眼,A組為0.1%玻璃酸鈉滴眼液治療組,B組為0.3%玻璃酸鈉滴眼液治療組,C組為生理鹽水對(duì)照組,D組為空白對(duì)照組,分別頸部皮下注射氫溴酸東莨菪堿注射液1.0mg/kg,4次/天,連續(xù)35天,每天8點(diǎn)、11點(diǎn)、14點(diǎn)和18點(diǎn)進(jìn)行注射。注藥7天后:A組滴0.1%玻璃酸鈉滴眼液,B組滴0.3%玻璃酸鈉滴眼液,C組滴生理鹽水,連續(xù)28天。注藥第7天、第14天、第21天、第28天和第35天對(duì)每組行淚液分泌試驗(yàn)、淚液蕨類結(jié)晶實(shí)驗(yàn)、角結(jié)膜麗絲胺綠染色、結(jié)膜印記細(xì)胞學(xué)檢查、淚膜破裂時(shí)間(BUT)、角膜熒光素染色。A、B組滴玻璃酸鈉滴眼液5分鐘,30分鐘,60分鐘,90分鐘行角結(jié)膜麗絲胺綠染色、角膜熒光素染色和淚液蕨類結(jié)晶實(shí)驗(yàn)。分別在第21天和35天氯胺酮過量隨機(jī)處死每組6只兔子,取實(shí)驗(yàn)眼眼角膜和結(jié)膜組織,免疫熒光技術(shù)觀察粘蛋白MUC5AC、MUC1的表達(dá)。掃描電子顯微鏡下觀察角膜上皮的再生和修復(fù)。 結(jié)果: 1.皮下注射氫溴酸東莨菪堿注射液7天后,實(shí)驗(yàn)兔雙眼角膜熒光素鈉染色均陽(yáng)性,淚液分泌量均低于11.0±1.59mm。 2.與對(duì)照組相比,0.1%玻璃酸鈉滴眼液組第一次滴藥90min內(nèi)角結(jié)膜麗絲胺綠染色、角膜熒光素染色和淚液蕨類結(jié)晶評(píng)分差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,0.3%玻璃酸鈉滴眼液組30分鐘后麗絲胺綠和熒光素鈉染色評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),淚液蕨類結(jié)晶實(shí)驗(yàn)90分鐘內(nèi)評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.4組淚液分泌量整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4.與對(duì)照組相比,0.1%玻璃酸鈉滴眼液組麗絲胺綠染色評(píng)分降低,至第28天,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.002),第35天統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)差異。0.3%玻璃酸鈉滴眼液組至第28天,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001),并持續(xù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。0.1%玻璃酸鈉滴眼液組和0.3%玻璃酸鈉滴眼液組熒光素鈉染色評(píng)分降低,至第21天,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PA0.001,PB<0.001),并持續(xù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。 5.與對(duì)照組相比,A組淚液蕨類結(jié)晶實(shí)驗(yàn)評(píng)分降低,至第14天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.02),并持續(xù)至第28天(P0.01),B組至第14天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.04),并持續(xù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。 6.與對(duì)照組相比,A組和B組淚膜破裂時(shí)間(BUT)時(shí)間延長(zhǎng),至第28天,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PA0.006,PB0.005),,并持續(xù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。 7.與對(duì)照組相比,A組和B組結(jié)膜印記細(xì)胞學(xué),至第35天,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PA0.006,PB0.005), 8.與對(duì)照組相比, A、B組實(shí)驗(yàn)眼角結(jié)膜上皮Muc5Ac、Muc1表達(dá)顯著高于C、D組,CD44表達(dá)低于C、D組。結(jié)論: 玻璃酸鈉滴眼液不僅能夠模擬淚液粘蛋白穩(wěn)定淚膜、保水、保濕、潤(rùn)滑的作用,而且能促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞增殖和損傷修復(fù),減輕角膜上皮炎癥,恢復(fù)眼表?yè)p傷,從而有效治療干眼。
【關(guān)鍵詞】:玻璃酸鈉滴 干眼 粘蛋白
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R777.34;R-332
【目錄】:
- 摘要3-5
- ABSTRACT5-10
- 第1章 引言10-12
- 第2章 材料和方法12-18
- 2.1 實(shí)驗(yàn)材料12-13
- 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物12
- 2.1.2 主要試劑和耗材12-13
- 2.2 實(shí)驗(yàn)方法13-17
- 2.2.1 動(dòng)物模型建立13
- 2.2.2 觀察指標(biāo)及測(cè)試方法13-16
- 2.2.3 免疫熒光化學(xué)法16
- 2.2.4 掃描電鏡觀察16-17
- 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析17-18
- 第3章 結(jié)果18-33
- 3.1 淚液分泌實(shí)驗(yàn)18-19
- 3.2 熒光素鈉染色評(píng)分19-21
- 3.3 麗絲胺綠染色評(píng)分21-24
- 3.4 淚膜破裂時(shí)間(BUT)24
- 3.5 結(jié)膜印記細(xì)胞學(xué)檢查24-25
- 3.6 淚液蕨類結(jié)晶25-26
- 3.7 免疫熒光26-31
- 3.8 掃描電鏡31-33
- 第4章 討論33-38
- 4.1 皮下注射氫溴酸東莨菪堿建立兔干眼模型33-35
- 4.2 玻璃酸鈉模擬粘蛋白功能和重建生理淚膜的機(jī)制研究35-38
- 4.2.1 保水作用35-36
- 4.2.2 潤(rùn)滑作用36
- 4.2.3 穩(wěn)定淚膜36
- 4.2.4 對(duì)細(xì)胞保護(hù)作用36-37
- 4.2.5 促進(jìn)角膜上皮修復(fù)37-38
- 第5章 全文總結(jié)38-39
- 第6章 問題和展望39-40
- 致謝40-41
- 參考文獻(xiàn)41-44
- 綜述44-52
- 參考文獻(xiàn)50-52
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