本文關(guān)鍵詞：microRNA-184對TGF-β_2誘導人晶狀體上皮細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)分化的調(diào)控研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:白內(nèi)障術(shù)后殘留的晶狀體上皮細胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是后發(fā)性白內(nèi)障的主要病理改變,其具體的分子機制尤其是基因表達的調(diào)控機制尚不十分清楚。研究表明,轉(zhuǎn)化生長因子β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)是晶狀體上皮細胞轉(zhuǎn)分化過程最有效的誘導因子,在后發(fā)性白內(nèi)障發(fā)病過程中發(fā)揮著重要作用。微小RNA(microRNAs)是一類非編碼單鏈RNA,能在轉(zhuǎn)錄或翻譯水平調(diào)節(jié)靶基因的表達,從而在細胞增殖、凋亡、分化、腫瘤發(fā)生以及機體代謝等生命過程扮演了重要角色。目前,microRNAs參與EMT調(diào)控成為研究的熱點。本課題通過TGF-β2體外誘導人晶狀體上皮細胞發(fā)生EMT,采用micro RNA調(diào)控技術(shù),研究miR-184介導TGF-β2誘導人晶狀體上皮細胞EMT及其分子機制,為阻斷TGF-β2誘導的人晶狀體上皮細胞EMT生物學過程及后發(fā)性白內(nèi)障的預(yù)防和治療提供了新的思路。方法:體外培養(yǎng)人晶狀體上皮細胞HLE-B3,使用不同濃度TGF-β2處理細胞后,采用細胞免疫熒光及western blotting法觀察和分析晶狀體上皮細胞中上皮細胞標志物E-鈣粘連蛋白(E-cadherin)和間質(zhì)細胞標志物波形蛋白(vimentin)等細胞轉(zhuǎn)分化相關(guān)蛋白的變化,應(yīng)用qRT-PCR法檢測TGF-β2對細胞miR-184的表達影響。建立人晶狀體上皮細胞EMT研究模型,采用脂質(zhì)體介導的miRNA調(diào)控技術(shù)轉(zhuǎn)染HLE-B3細胞,通過qRT-PCR法檢測轉(zhuǎn)染miR-184 mimic和miR-184 inhibitor后細胞mi R-184的表達。應(yīng)用激光共聚焦及western blotting等方法觀察上調(diào)和下調(diào)miR-184基因?qū)GF-β2誘導的人晶狀體上皮細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)分化及靶基因bin3表達影響。結(jié)果:外源性TGF-β2成功誘導體外培養(yǎng)人晶狀體上皮細胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)分化。miRNA調(diào)控技術(shù)能夠在基因水平調(diào)控TGF-β2誘導的人晶狀體上皮細胞mi R-184的表達,并且能夠影響TGF-β2誘導的人晶狀上皮細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)分化相關(guān)蛋白及靶基因bin3的表達。結(jié)論:miR-184是影響TGF-β2誘導人晶狀體上皮細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)分化過程的一種重要基因,下調(diào)miR-184的表達能夠抑制TGF-β2誘導的晶狀體上皮細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)分化,其分子機制可能是在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平抑制靶基因bin3表達。
【關(guān)鍵詞】：微小RNA-184 轉(zhuǎn)分化生長因子β2 人晶狀體上皮細胞 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)分化
【學位授予單位】：桂林醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R776.1
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 英漢縮略詞對照表8-10
• 第一部分 TGF- β 2 誘導人晶狀體上皮細胞上皮 － 間質(zhì)轉(zhuǎn)分化及micro RNA-184的表達10-36
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-26
• 2 結(jié)果26-31
• 3 討論31-35
• 4 結(jié)論35-36
• 第二部分 micro RNA-184通過抑制靶基因bin3介導TGF-β_2 誘導人晶狀體上皮細胞上皮－間質(zhì)轉(zhuǎn)分化36-53
• 前言36-38
• 1 材料與方法38-42
• 2 結(jié)果42-48
• 3 討論48-51
• 4 結(jié)論51-53
• 參考文獻53-58
• 附錄（綜述）58-70
• 參考文獻66-70
• 碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄70-71
• 致謝71

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本文編號：462024