目的:研究siRNA抑制高遷移率族蛋白-1(high mobility group protein box-1, HMGB1)表達(dá)對人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響。方法:RT-PCR和Western blot檢測HMGB1在人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)。體外化學(xué)合成靶向HMGB1 siRNA,RT-PCR和Western blot檢測其抑制效率。MTT法檢測HMGB1沉默后Y79細(xì)胞的增殖情況。Caspase-3活性檢測試劑盒檢測HMGB1沉默后Y79細(xì)胞的凋亡情況。采用流式細(xì)胞儀來分析細(xì)胞周期的分布以及細(xì)胞凋亡率的變化。結(jié)果:HMGB1 mRNA和蛋白在人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞中高表達(dá),siRNA抑制HMGB1表達(dá)后,Y79細(xì)胞增殖抑制,促進(jìn)凋亡。結(jié)論:抑制HMGB1的表達(dá)可以降低人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞的增殖,并促進(jìn)其凋亡,為人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的生物學(xué)治療提供新的思路。

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.2 Real-time PCR
    1.3 Western blot
    1.4 RNA干擾
    1.5 細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn)
    1.6 Caspase-3活性檢測
    1.7 流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 HMGB1 mRNA在各細(xì)胞系中的轉(zhuǎn)錄水平
    2.2 Western blot檢測HMGB1蛋白在各細(xì)胞系中的表達(dá)
    2.3 Real time-PCR 檢測siRNA抑制Y79細(xì)胞HMGB1 mRNA表達(dá)水平
    2.4 Western blot檢測siRNA抑制Y79細(xì)胞HMGB1蛋白表達(dá)水平
    2.5 MTT法檢測HMGB1 siRNA對Y79細(xì)胞增殖能力的影響
    2.6 沉默HMGB1誘導(dǎo)Y79細(xì)胞的Caspase-3激活作用
    2.7 HMGB1 siRNA 對Y79細(xì)胞周期的影響
    2.8 HMGB1 siRNA對Y79細(xì)胞凋亡的影響
3 討論



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