發(fā)布時間：2017-05-28 06:07

  本文關(guān)鍵詞：Slit2對人脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和管腔形成的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 觀察腺病毒介導(dǎo)的Slit2及Slit2ShRNA轉(zhuǎn)染缺氧誘導(dǎo)的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（retinal pigment epithelial cells RPE）對人脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(Human choroidal microvascular endothelial cell,HCMEC)增殖的影響，觀察外源性Slit2蛋白對人HCMEC細(xì)胞遷移和管腔形成的影響，并研究探討Slit2/Robo4信號通路在脈絡(luò)膜新生血管（Choroidalneovascularization,CNV)中的可能作用，為CNV提供新的治療方向。 方法： 1.體外培養(yǎng)人RPE細(xì)胞、人HCMEC細(xì)胞，，200μmol/L氯化鈷建立化學(xué)缺氧模型，觀察缺氧條件下Slit2及Slit2ShRNA轉(zhuǎn)染的RPE細(xì)胞對HCMEC細(xì)胞增殖的影響； 2.RT-PCR、免疫組化鑒定Slit2、Robo1、Robo4、Rac1、cdc42在HCMEC細(xì)胞上的表達(dá)； 3.Western-blot檢測不同濃度外源性Slit2蛋白（0ng/ml、50ng/mL、75ng/mL、100ng/mL、125ng/mL、150ng/mL）對人HCMEC細(xì)胞Robo4表達(dá)的影響； 4.外源性150ng/mlSlit2對VEGF誘導(dǎo)的人HCMEC細(xì)胞遷移和管腔形成的影響； 5. Western-blot檢測Rac1、cdc42的表達(dá)。 結(jié)果： 1.Slit2組光吸收值(A值)在24h、48h均高于其他組(與缺氧組P=0.001，其余P=0.000），Slit2ShRNA組光吸收值(A值)在24h、48h均低于其他組（48h與缺氧組P=0.003，與空腺病毒組P=0.008，其余P=0.000）； 2.Slit2、Robo4、Rac1、cdc42表達(dá)于人HCMEC細(xì)胞上； 3.在外源性不同濃度的Slit2（0ng/ml、50ng/mL、75ng/mL、100ng/mL、125ng/mL、150ng/mL）作用下，隨著Slit2蛋白濃度的增加，Robo4表達(dá)增加； 4.外源性150ng/ml Slit2蛋白可以抑制VEGF誘導(dǎo)的人HCMEC細(xì)胞的遷移和管腔形成； 5.實驗組2中Rac1表達(dá)高于陽性對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p0.05)，陰性對照組與實驗組1差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p0.05)。四組中cdc42的表達(dá)差異無明顯統(tǒng)計學(xué)意義（p0.05)。 結(jié)論： 1.Slit2的高表達(dá)可明顯促進(jìn)HCMEC細(xì)胞的增殖，沉默RPE細(xì)胞中的Slit2的表達(dá)后，會明顯抑制HCMEC細(xì)胞的增殖。 2.外源性Slit2蛋白抑制VEGF誘導(dǎo)的人HCMEC細(xì)胞的遷移和管腔形成，Slit2/Robo4信號通路可能通過影響下游信號分子Rac1從而達(dá)到抑制作用。
【關(guān)鍵詞】：視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 人脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Slit2 Robo4 血管內(nèi)皮生長因子
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R773.4
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 第一部分 缺氧條件下 Slit2 及 Slit2 ShRNA 轉(zhuǎn)染的 RPE 細(xì)胞對 HCMEC 細(xì)胞增殖的影響13-20
• 1 材料與方法13-16
• 2 結(jié)果16-18
• 3 討論18-19
• 4 結(jié)論19-20
• 第二部分 Slit2/Robo4 信號通路對 HCMEC 細(xì)胞遷移和管腔形成的影響20-32
• 1 材料與方法20-26
• 2 結(jié)果26-30
• 3 討論30-31
• 4 結(jié)論31-32
• 全文結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-35
• 文獻(xiàn)綜述35-39
• 參考文獻(xiàn)37-39
• 致謝39-40
• 碩士研究生在讀期間發(fā)表論文40-41

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 陳軍;于東風(fēng);劉弋;楊錦雷;;Slit2/Robo1蛋白在直腸癌中的表達(dá)及與微血管密度的關(guān)系[J];安徽醫(yī)藥;2011年06期

2 張曉梅;王彬杰;王巍;王小丹;付小玻;馬洪梅;張楠;;Transwell小室共培養(yǎng)條件下缺氧時視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞對內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2011年04期

3 黃莉蕓;周希瑗;;腺病毒介導(dǎo)的slit2 shRNA對缺氧誘導(dǎo)的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的影響[J];中國生物制品學(xué)雜志;2014年03期

4 楊淑萍;盧雪峰;王仲;洪彬驊;張永生;;Slit2與MVD及食管癌生物學(xué)行為關(guān)系的研究[J];醫(yī)學(xué)與哲學(xué)(臨床決策論壇版);2009年01期

  本文關(guān)鍵詞：Slit2對人脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和管腔形成的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：402047