胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為視網(wǎng)膜祖細(xì)胞的體外研究
發(fā)布時(shí)間:2024-10-03 01:45
目的探討小鼠胚胎干細(xì)胞(mouse embryonic stem cell,m ESC)誘導(dǎo)為視網(wǎng)膜祖細(xì)(retinal progenitor cells,RPC)的體外培養(yǎng)方法,為致盲性視網(wǎng)膜變性疾病的治療提供種子細(xì)胞。方法用細(xì)胞免疫熒光染色法和流式細(xì)胞術(shù)對(duì)m ESC進(jìn)行m ESC標(biāo)記物階段特異性胚胎抗原1、細(xì)胞增殖核抗原Ki67、細(xì)胞周期和堿性磷酸酶進(jìn)行鑒定后,在無血清條件下懸浮培養(yǎng)形成擬胚體(embryoid bodies,EB)并添加抑制因子1、左右決定因子A和γ-促分泌酶抑制劑等誘導(dǎo)分化為RPC,并對(duì)其分化的細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記物兔來源配對(duì)盒基因6(paired box6,Pax6)、兔來源性別決定區(qū)Y框蛋白(Sox2)和鼠來源轉(zhuǎn)錄因子同源異型框蛋白(orthodentical homeobox 2,Otx2)的檢測以及增殖能力和細(xì)胞周期的檢測。結(jié)果 m ESC標(biāo)記物堿性磷酸酶陽性表達(dá),特異性胚胎抗原1陽性率為(80.66±0.64)%,Ki67和細(xì)胞周期檢測顯示有較高增殖能力。定向誘導(dǎo)分化后,RPC標(biāo)記物Pax6、Sox2和Otx2陽性率分別為(50.87±2.97)%、(49.1...
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1材料與方法
2結(jié)果
3討論
本文編號(hào):4006606
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